DNA的粗提取与鉴定的实验练习

1 选修 1 DNA 的粗提取与鉴定的实验练习 1 DNA 的粗提取与鉴定的实验 l 本实验材料选用鸡血细胞液而不用鸡的全血 主要原因是由于鸡血细胞液中含有较高含量 的 2 图 A 中加入蒸馏水的目的是 3 通过图 B 所示步骤取得滤液后 再向滤液中加入 2mol L 的 NaCl 溶液的目的是 并在坐 标系内画出 DNA 的溶解度随 NaCl 溶液浓度的变化的图象 4 图 C 所示加入蒸馏水的目的是 5 为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA 可用 试剂进行检验 颜色反应为 色 2 下面是某位同学以洋葱为实验材料进行 DNA 提取与鉴定的实验步骤 a 称取 30 克已切碎的洋葱 放入研钵中 加入少量石英砂 倒入 10mL 0 14mol L 的氯化钠溶液 充分 研磨 b 研磨后 用漏斗和纱布过滤 得到滤液 c 沿烧杯壁缓缓向滤液中加入 95 的酒精溶液 20mL 并用玻璃棒快速搅拌 待纤维状粘稠物析出 用玻 璃棒可将其轻轻卷起 d 取两支试管 编为 1 2 号 各加入 2mol L 的氯化钠溶液 2mL 向 1 号试管中加入一些纤维状粘稠物 振荡使其溶解 然后向两支试管中各加入 2mL 二苯胺试剂 观察颜色变化 请分析回答 1 指出以上实验步骤中的三个错误 2 在 a 步骤中 加入少量石英砂是为了 有时人们还在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂 原 因是洗涤剂能 有利于 DNA 的释放 3 c 步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是 色的 4 在所有操作均正确的情况下 d 步骤中 1 号 2 号试管内溶液颜色变化分别为 5 DNA 提取实验不宜用猪血作为实验材料 原因是 3 关于 DNA 粗提取的实验材料的选择 研究者经过多次实验效果的比较 最终选择鸡血做实验材料 请 据图回答问题 1 在实验中 两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 B A 稀释血液 冲洗样品 B 使血细胞破裂 降低 NaCl 浓度使 DNA 析出 C 使血细胞破裂 增大 DNA 溶解量 D 使血细胞破裂 提取含杂质较少的 DNA 2 生活在牧区的人们 采集牛 羊和马血比较方便 若它们按实验要求完成实验步骤后 结果是很难 提取到 DNA 原因是 3 不同的 NaCl 溶液中 DNA 的溶解度不同 在 NaCl 溶液浓度是 时 DNA 的溶解度最小 2 4 DNA 的析出和鉴定时 析出 DNA 时应将处理后的溶液过滤 加入与滤液体积相等的 冷却的 写出体积分数 静置后溶液中将析出 DNA 鉴定时所用的试剂为 4 某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活动 具体步骤如下 材料处理 称取新鲜的菜花 辣椒和蒜黄各 2 份 每份 10 g 剪碎后分成两组 一组置于 20 C 另一组 置于 20 C 条件下保存 24 h DNA 粗提取 第一步 将上述材料分别放入研钵中 各加入 15 mL 研磨液 充分研磨 用纱布过滤 取滤液备用 第二 步 将滤液放在 60 75 C 的恒温水浴箱中保温 10 15 min 然后将溶液过滤 第三步 先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液 再加入 20 mL 体积分数为 95 的冷酒精溶液 然后用玻 璃棒缓缓地向一个方向搅拌 使絮状物缠绕在玻璃棒上 第四步 取 6 支试管 分别加入等量的 2 mol L NaCl 溶液溶解上述絮状物 DNA 检测 在上述试管中各加入 4 mL 二苯胺试剂 混合均匀后 置于沸水中加热 5 min 待试管冷却后 比较溶液颜色的深浅 结果如表 材料保存温度菜花辣椒 20 C 20 C 注 越多表示蓝色越深 分析上述实验过程 回答下列问题 1 该探究性实验课题的名称是 2 第二步操作目的是 3 第三步中 缓缓地 搅拌 这是为了减少 4 根据实验结果 得出结论并分析 结论 1 与 20 C 相比 相同实验材料在 20 C 条件下保存 DNA 的提取量较多 结论 2 针对结论 1 请提出合理的解释 3 5 氯仿密度大于水 能使蛋白质变性沉淀 与水和 DNA 均不相溶 且对 DNA 影响极小 为了进一歩提高 DNA 纯度 依据氯仿的特性 在 DNA 粗提取第四步的基础上继续操作的步骤是 然后用体积分数为 95 的冷酒精溶液使 DNA 析出 5 图为鸡血细胞中 DNA 的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图 请据图分析 回答下列问题 1 图中正确的实验操作顺序是 用序号与箭头表示 2 步骤 中加入蒸馏水的目的是 步骤 中加入蒸馏水后 DNA 析出 该操作的原理 是 3 步骤 中所用酒精最佳是经过 后再使用 该步骤的目的 是 4 DNA 可用 试剂鉴定 沸水浴后的颜色反应为 5 由于鸡血较难找到 某学生试图用人血代替 结果没有成功 其原因最可能 是 6 请回答下列有关 DNA 粗提取及鉴定的相关问题 1 在提取 DNA 实验过程中用到两种浓度的 NaCl 溶液 其作用分别是 2mol L NaCl 溶液 0 14mol L NaCl 溶液 2 用鸡血提取 DNA 的整个操作过程中 每 100mL 血液中加入 3g 柠檬酸钠的作用是 3 鉴定 DNA 所用的试剂 7 下图表示以鸡血为实验材料进行 DNA 的粗提取与鉴定的操作程序 请分析回答下列问题 4 1 步骤一中 向鸡血细胞液中加入 并搅拌 可使鸡血细胞破裂 2 步骤二中 过滤后收集含有 DNA 的 3 步骤三 四的操作原理是 步骤四中 通过向溶液中加入 调节 NaCl 溶液的物质的量浓度至 mol L 时 DNA 将会析出 过滤去除溶液中的杂质 4 步骤七 向步骤六过滤后的 中加入等体积的冷却的 静置 2 3 min 溶液中会出现 色丝状物 这就是粗提取的 DNA 5 步骤七 DNA 遇 试剂 沸水浴 5 min 冷却后 溶液呈 色 5 选修 1 DNA 的粗提取与鉴定的实验练习参考答案 1 解 1 DNA 存在于鸡血细胞中 因此 DNA 提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血 2 分析题图可知 图 A 的操作是向鸡血细胞中加入蒸馏水 目的是使血细胞吸水胀破 释放出核物质 DNA 3 图 B 所示步骤是向含有 DNA 的滤液中加入 2mol L 的 NaCl 溶液 目的是使 DNA 溶解于 NaCl 溶液中 DNA 的溶解度随 NaCl 溶液浓度的变化曲线如下图 4 分析题图可知 C 步骤是向溶解有 DNA 的高浓度 NaCI 溶液中加入蒸馏水 目的是稀释 NaCL 溶液的浓 度 使 DNA 析出 5 在沸水浴的条件下 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色 因此可以用二苯胺鉴定 DNA 故答案为 1 DNA 2 使血细胞吸水胀破 释放出核物质 DNA 3 使 DNA 溶解于 NaCl 溶液中 4 使 DNA 的溶解度下降而沉淀析出 5 二苯胺 蓝色 2 解 1 以上实验步骤中的三个错误为 a 步骤中 倒入的氯化钠溶液浓度为 0 14mol L b 步骤 中 用玻璃棒快速搅拌 d 步骤中没有沸水浴加热 2 洗涤剂能溶解细胞膜 有利于 DNA 的释放 3 c 步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是白色的 4 1 号试管中含有 DNA 加入二苯胺后沸水浴加热颜色变蓝 2 号试管中不含 DNA 加入二苯胺后沸水 浴加热颜色不变蓝 5 DNA 提取实验不宜用猪血作为实验材料 原因是猪的成熟红细胞无细胞核 或无 DNA 故答案为 1 a 步骤中 倒入的氯化钠溶液浓度为 0 14mol L b 步骤中 用玻璃棒快速搅拌 d 步骤中没有沸水 浴加热 意思正确即可 2 研磨充分 溶解细胞膜 3 白 6 4 变蓝 不变蓝 5 猪的成熟红细胞无细胞核 或无 DNA 3 解 1 实验中两次使用蒸馏水 第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出 DNA 第二次日的是 稀释 NaCl 溶液 使 DNA 从溶液中析出 故选 B 2 牛羊马为哺乳动物 其成熟的红细胞中没有细胞核 因此若它们按实验要求完成实验步骤后 结果 是很难提取到 DNA 3 不同的 NaCl 溶液中 DNA 的溶解度不同 在 NaCl 溶液浓度是 0 14mol l 时 DNA 的溶解度最小 4 DNA 的析出和鉴定时 析出 DNA 时应将处理后的溶液过滤 加入与滤液体积相等的 冷却的 95 的酒 精 静置后溶液中将析出 DNA 鉴定时所用的试剂为二苯胺 故答案为 1 B 2 牛羊马为哺乳动物 其成熟的红细胞中没有细胞核 3 0 14mol l 4 95 的酒精 二苯胺 4 1 探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影响 2 去除滤液中的杂质 3 DNA 断裂 4 等质量的不同实验材料 在相同的保存温度下 从蒜黄中提取的 DNA 量最多 低温抑制了相关 酶的活性 DNA 降解速度慢 5 将第四步获得的溶液与等量的氯仿充分混合 静置一段时间 吸取上清液 5 1 2 加速血细胞的破裂 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 随 NaCl 溶液浓度的降低而减小 3 充分预冷 提取含杂质较少 或较纯净 的 DNA