细菌各论

第十章 呼吸道感染细菌,概述：定义：是经呼吸道传播，引起呼吸道器官或 呼吸道以外器官病变的一类细菌。 包括：结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌 嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌 流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌等,结 核 分 枝 杆 菌,(Mycobacterium tuberculosis),分枝杆菌属是一类细长微弯的细菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名。特点1 、细胞壁含有大量的脂类2 、菌体不易着色，故采用抗酸染色，故又称抗酸杆菌3 、致病与菌体成分有关，形成慢性肉芽肿性病变4、 营养要求高，生长缓慢5、 可分为三大类：结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、 麻风分枝杆菌,结核分枝杆菌（结核杆菌）为结核病的病原体,抗酸染色,由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5石炭酸复红加温染色，再用3盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。,结 核 病,结核病为各类传染病之首，全球1/3人感染，每年新发结核病例900万，70%在亚洲。每年有200-300万人死于结核病，其中儿童占10万，我国每年死于结核病 20万人。据世界卫生组织报道结核病在许多国家出现回升现象。 1980年后，结核发病率不断上升，若不加紧防治，到2020年将会有10亿人感染，2亿人患病。,我国是结核病负担最重的国家之一，仅次于印度，居第二位。5.5亿人感染结核菌，500万结核病患者，其中开放性肺结核病人150万。结核病是传染性疾病中第一号杀手。,结核分枝杆菌,形态与染色,细长略带弯曲，细胞壁脂质含量较高抗酸染色阳性，又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)有荚膜L型-莫赫(Much)颗粒，抗酸阴性，G+,结核杆菌抗酸染色,培养特性,专性需氧偏酸 最适PH6.56.8营养要求高 罗氏培养基(Lowenstein) (内含血清、蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐类以及孔雀绿等)生长缓慢 1824小时/代,结核杆菌培养,生物学特性,培养特点：馋、懒、丑。馋-营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。懒-生长缓慢，1418h分裂1次，在固体培养基上25w才出现肉眼可见的菌落。丑-典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样。,菌体成分及抗原构造,(1) 脂质 (lipid) : 主要包括磷脂、脂肪酸和蜡质 , 占细胞壁干重的60%，它们大多与蛋白质或多糖结合成复合物存在于细胞壁中 , 与细菌毒力密切相关。(2) 蛋白质 :如旧结核菌素 (OT) , 纯蛋白质衍生物(PPD) 等 ,具有抗原性。(3) 多糖 : 具有抗原性。,抵抗力（四强）,对干燥的抵抗力特别强 粘附在尘埃上保持传染性810天,在干燥的痰液中可存活68个月。结核分枝杆菌对酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗力，15min不受影响对碱性染料有抵抗力对青霉素等抗生素耐药,抵抗力（四弱）,对乙醇敏感对湿热敏感 液体中626315分钟或煮沸 对紫外线敏感 直接日光照射数小时即被杀灭对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、对氨基水杨酸等抗痨药物敏感，但长期用药容易出现耐药性,变异性,结核杆菌多种性状可发生变异形态变异：在异烟肼、溶菌酶等作用下形成L型（多形性）;菌落变异：R-S型变异，毒力减弱毒力变异：卡介苗： 1908年两位科学家将有毒的牛型分枝杆菌接种在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经13年230代传代获得的减毒菌株，即卡介苗（BCG）沿用至今。耐药性变异：,致病性和免疫性,结核杆菌无侵袭性酶，不产生内、外毒素，其致病性主要与菌体内某些致病物质有关，菌体能在组织细胞内（特别是巨噬细胞内）增殖引起局部炎症，机体的免疫损伤可引起全身血源播散。,致病物质,致病性,(1) 索状因子,由分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖脂能使细菌在液体培养基中呈蜿蜒索状排列是重要的致病物质，若将其从细菌中提出，则细菌丧失毒力能破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿,(2) 磷 脂,促使单核细胞增生,增强菌体蛋白质的致敏作用抑制蛋白酶对组织的分解，与结核结节的形成有关,(3) 硫酸脑苷脂,抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合使细菌能在吞噬细胞中长期存活,(4) 蜡质D,肽糖脂和分枝菌酸的复合物具有佐剂作用，可激发机体产生迟发型超敏反应,3、蛋白质,有抗原性，和蜡质D结合后能使机体发生超敏反应在形成结核结节中发挥一定作用,二、所致疾病,感染方式呼吸道、消化道或皮肤损伤等多途径侵入机体所致疾病疾病种类多样化以肺结核最为常见,临床类型,1、肺部感染（1）原发感染常见儿童（外源性感染）,（2）继发感染常见成人（原发病灶内源性感染; 外源性感染） 特点：局部病变不易扩散,一般局限于肺部，易发生干酪样坏死,逐渐钙化而痊愈； 免疫应答能力低下者，干酪样坏死可液化，形成空洞和开放性肺结核，传染性强,2、肺外感染,部分患者结核分枝杆菌可进入淋巴、血液循环引起肺内、外播散，如结核性脑膜炎、肾结核痰菌被咽入消化道或食入了消毒不严格的牛奶也可引起肠结核、结核性腹膜炎等结核分枝杆菌L型在肺外检出率较高,人体对该菌有较强免疫力（感染率高，发病率低）属胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞为主的细胞免疫结核的免疫属于感染免疫(infection immunity)，又称有菌免疫,即只有当结核分枝杆菌或其组分存在体内时才有免疫力。一旦体内的结核分枝杆菌或其组分全部消失，免疫也随之不存在。细胞免疫与迟发型超敏反应并存通过测定机体对结核分枝杆菌有无超敏反应即可判定对结核有无免疫力，常用结核菌素试验进行测定,免 疫 性,结核杆菌,豚鼠,皮下注射,再 次,1014天局部溃烂不愈，附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身,结核杆菌,皮下注射,豚鼠,局部迅速产生浅溃烂，易愈合。,免疫和变态反应,结核分枝杆菌,从以上看出再感染时，浅溃烂，易愈合，不扩散，说明机体有一定的免疫力，但溃烂发生快，说明同时存在变态反应。,结核分枝杆菌,结核菌素蛋白蜡质D,机体（巨噬细胞移动抑制因子被激活）,注 入,产生变态反应不产生免疫,结核杆菌rRNA,注 入,机体（结核杆菌生长抑制因子被激活）,产生免疫不产生变态反应,完整结核杆菌,注 入,激活以上两种细胞因子,产生免疫产生变态反应,结核分枝杆菌,结核菌素试验,原理：根据上述两者同时存在的原理，用结核菌素测定机体能否发生迟发性超敏反应，以判断机体对结核有无免疫力试剂 旧结核菌素（OT） 两种 纯蛋白衍生物（PPD）：PPDC，BCGPPD方法：取 PPD-C 和 BCG-PPD 各 5 单位 ,分别注入两前臂皮肤，48-72h后观察结果,结果：红肿硬结5mm，阳性（ 15mm，强阳性）红肿硬结5mm，阴性两侧红肿中 , 若 PPD-C 侧大于 BCG-PPD 侧时为感染 , 反之则为卡介苗接种所致 ; 5mm 者为阴性反应。,意义阳性： 过去/BCG成功，有免疫力强阳性：现在 活动性阴性： 无/未接种BCG假阴性：感染初期，老年人，严重结核合并其它传染病导致细胞免疫低下者继发性免疫低下者，如使用免疫抑制剂，艾滋病等免疫功能低下者,应 用,选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果，结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗。在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断测定肿瘤患者的细胞免疫功能,微生物检查与防治,微生物学检查 1 标本直接涂片染色观察：抗酸染色，菌数少时需浓缩集菌；金胺染色； 2分离培养鉴定（生长慢，注意L型感染） 3 动物实验 4 快速诊断：聚合酶链反应 (PCR) 扩增技术快速鉴定结核分枝杆菌 DNA。 防治 1 应用卡介苗预防接种 2 治疗原则：早期发现、早期治疗、联合用药、彻底治愈。,结核分枝杆菌,结核杆菌的形态、抗酸染色性及培养特点？简述结核分枝杆菌类脂成分在致病中的作用？结核杆菌的免疫的特点？什么是感染免疫？结核菌素试验的原理、结果判断和意义？,第二节 白喉棒状杆菌,俗称白喉杆菌,该菌是急性呼吸道传染病白喉的病原体（患者在咽喉部出现灰白色的假膜）;该菌产生外毒素-白喉毒素，引起全身中毒。,生物学性状,形态染色G+棒状杆菌，一端或两端膨大成棒状，字母状（V形、L形）或栅栏状排列。美兰染色：菌体着色不均，有着色深颗粒；Albert染色：菌体绿色，内有蓝褐色颗粒异染颗粒是白喉杆菌在形态上的主要特征。,培养特性营养要求较高吕氏血清培养基上细小、灰白色S型小菌落（形态典型，异染颗粒明显）亚碲酸钾血平板黑色菌落鉴别选择（吸收并还原碲）,变异 白喉棒状杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异,抵抗力较弱湿热（100，1min） 敏感 一般化学消毒剂青霉素、氯霉素、红霉素干燥 耐 日光 较其他无芽胞细菌强寒冷,致病性与免疫性,致病物质白喉毒素（主要致病因素） A肽链毒性功能 结构 B肽链与受体结合（心脏、神经、肾上腺等）协助A链进入易感细胞内 毒性机制：蛋白质合成中必需的延伸因子灭活抑制肽链延长蛋白合成受阻组织变性坏死索状因子：破坏线粒体，影响细胞呼吸和能量产生K抗原：抗吞噬，有利定植,所致疾病白喉传染源：病人、带菌者传播途径：呼吸道（飞沫）易感人群：6月-5岁潜伏期：2-7天,致病机制,白喉棒状杆菌在呼吸道局部繁殖,产生白喉毒素,局部,炎症反应,坏死性组织渗出的纤维素白细胞大量细菌,灰白色假膜,咽部,喉头水肿,气管,假膜脱落,呼吸阻塞,可窒息死亡,入血,毒血症,与易感组织受体结合,心肌炎周围神经炎肾上腺出血,也可死亡,凝固,免疫性： 体液免疫为主，依靠血中白喉抗毒素中和外毒素。机体免疫与年龄的关系：6月: 免疫力强 自然被动免疫6月-5岁: 免疫力弱 需人工自动免疫加强5岁: 免疫力强 隐性感染，人工自动免疫,微生物学检查与防治,细菌学检查+毒力实验人工自动免疫（类毒素、百白破三联疫苗），平时预防人工被动免疫（抗毒素），紧急预防，治疗治疗：抗菌素+抗生素,直接涂片染色镜检：美蓝、革兰染色法或奈瑟染色法 染色，有典型形态的白喉棒状杆 菌，结合临床症状可做初步诊断。 分离培养（吕氏血清斜面 ） 典型的菌落。 直接涂片染色镜检 生化反应和毒力实验（Elek）等进一步鉴定。 药敏实验,标本,细菌分离和鉴定,白喉杆菌的形态特性；白喉杆菌的主要致病物质及所致疾病；,本节要点,第三节 嗜肺军团菌,G短小杆菌，多形性，有鞭毛、菌毛及微荚膜，无芽胞,专性需氧，2.5-5%CO2生长良好营养要求较高，需特殊培养基（BCYE,缓冲活性炭酵母提取物培养基）常存在于人工管道的水源中（空调冷却管，淋浴头，呼吸机等），故可以气溶胶传播,引起军团病，经呼吸道传播（夏秋季） 三种临床类型流感样型（旁地亚克热）：轻症、发热、寒战、上感症状、无肺炎肺炎型（军团病）：重症、高热、咳嗽、肺炎、多器官损伤，最后发展为呼吸衰竭肺外感染型（继发感染）：多脏器感染症状 细胞免疫为主（胞内寄生菌），无疫苗治疗首选红霉素,第四节 百日咳鲍特菌,G小杆菌，是百日咳的病原体,致病物质包括荚膜、菌毛及多种毒素百日咳毒素丝状血凝毒素腺苷酸环化酶毒素气管细胞毒素皮肤坏死毒素,细菌附着纤毛上皮细胞，引起其坏死脱落，使其运动受抑制，促进黏液分泌，但不能及时排出，局部炎症、缺血、坏死，引起剧烈阵