血细胞分析仪检验

,第一部分全自动血细胞计数仪的原理及构造,血细胞分析仪(Blood cell analyzer,BCA)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。,发 展 史 手工计数仪器简单计数两分群三分群五分群五分群网织红,一、血细胞分析仪概述,一、血细胞分析仪概述,20世纪40年代末， 电阻抗法微粒子计数专利50年代， Coulter Model A型用于临床60年代， 测定参数达7项70年代， 全血细胞计数（CBC）80年代， 双通道、白细胞23分群、五分群90年代以来，多功能、多参数、流水线,一、红细胞计数原理,细胞具有相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒通过计数小孔时可引起电阻及电压的变化，出现脉冲信号。脉冲信号的数量代表细胞的数量，脉冲的大小代表细胞的大小，从而对血细胞进行计数和体积测定-（库尔特原理）,利用此原理可进行：白细胞检测红细胞和血小板检测。,白细胞检测（按大小）,红细胞和血小板的检测,CPU对血小板和红细胞分布图进行判断,红细胞和血小板共用一个小孔管，正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限，血小板计数准确容易,红细胞和血小板检测,联合检测型原理,主要体现在白细胞分类，实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出，发现异常细胞。共有特点是：均使用了鞘流技术。,容量、电导、光散射检测技术,每个细胞接受三维分析定义到三维散点图的相应位置,电阻抗,电导性,光散射,体积(volume，V) 电阻抗原理测定细胞体积和数量电导性(conductivity，C) 高频电磁探针，测量细胞内部结构，细胞内核浆比例光散射(scatter，S)细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强。,电阻抗、射频与细胞化学联合,这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术，通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统幼稚细胞检测系统,白细胞分类散射图,联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞，综合分析实验数据，从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。,网织红细胞检测原理,网织红细胞中嗜碱性物质RNA，在活体状态下与特殊的荧光染料结合荧光强度与RNA含量成正比用流式细胞术检测 网织红细胞大小和 RNA含量及血红蛋 白的含量,红细胞指数,红细胞指数（MCV、MCH和MCHC）通过RBC计数（RBC）、Hb浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）的值计算出。计算公式如下：,SLS-血红蛋白测定法,在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb，SLS-Hb进入血红蛋白检测系统。测定SLS-Hb在555nm波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。,第二部分临床意义,血红蛋白测定的临床意义,血红蛋白浓度、红细胞比容和红细胞计数是贫血、红细胞增多和真性红细胞增多症的诊断和分类的重要指标。血红蛋白次定的临床意义和红细胞相同。血红蛋白低于参考值下线可判定为贫血。,(一)红细胞参数,红细胞（RBC） 生理变化： 红细胞受多种生理因素影响。除年龄性别差异外还受到不同生活环境和习惯等影响。 其中：高原生活、长期吸烟、重体力劳动者红细胞和血红蛋白偏高。6个月2岁婴儿、老年人、孕妇的红细胞通常低于参考值下线。静脉血测定结果较毛细血管低10%-15%。在同一天内上午七点结果最高。,RBC病理性增多（1）原发性增多：真性红细胞增多症等。（2）继发性增多：缺氧导致肾上腺素大量分 泌继发性的引起红细胞增多。（3）相对性增多：由于呕吐等因素造成的暂 时性血液浓缩。,红细胞病理性减少,引起红细胞病理性减少的发生机制为红细胞生成障碍、造血原料缺乏和利用障碍、红细胞破坏过多和失血等。,RDW的意义：用于缺铁性贫血（IDA）的诊断与疗效观察。用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断（IDA与地中海贫血）。用于贫血的分类（Bessman分类法）。,白细胞增多：中性粒细胞：见于急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。嗜酸性粒细胞：见于变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、手术后、烧伤等。嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。淋巴细胞：见于百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。单核细胞：见于结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病恢复期等。,减少：中性粒细胞：见于伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等。嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒、应用肾上腺皮质激素后。淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。,血细胞分析仪检验图形及临床应用,直方图观察的内容：1.峰的位置：反映主细胞群位置有无异常。2.峰的高度：主细胞群数量的多少。3.峰底宽度：反映细胞群体大小的不均一性或离散程度的大小。4.有无异常峰出现：多提示血液中有异常细胞群或干扰因素存在。5.峰的起始有无异常：若有提示有干扰因素存在6.波谷位置高低:多提示细胞比例变化或有异常细胞群。,红细胞直方图：,白细胞直方图：,血小板直方图,散点图,第三部分,血细胞分析仪的性能评价与全面质量控制,一、血细胞分析仪的性能评价,1.精密度 分为批间重复性试验和批内重复性试验 2.携带污染 不同浓度样品间连续测定的相互影响 3.仪器的最佳线性范围 4.可比性 5.准确性 6.总重复性,血细胞分析仪全面质量控制,一、分析前质量控制对技术人员要求：上岗前应经过严格的岗前培训。仪器安装条件：安装在远离电磁干扰、防潮、防尘、通风条件好等仪器验收：必须对仪器的技术性能进行测试、校准和评价。仪器的校准,标本的采集和运送：真空采血管（紫色盖头）采集EDTA-K2抗凝的静脉血。采血后立即与抗凝剂混匀，在试管外壁贴上单据号等病人信息或检验联号后，放置室温立即送检。穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。标本在室温下最多保留4小时。不能在4小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（28）中保存，8小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。,坚持做校准和质控（二）分析中质控每天开机检查：电压、气压是否在规定范围内。试剂是否充足。试剂：良好的