抗体保存,知多少

免费服务热线 021 64689011 上海睿之生物医药科技有限公司 非常感谢您使用 Scimall 科学在线 提供的产品和服务 更多信息请访问 本本实验实验技技术来术来源于源于 SciMallSciMall 科科学学在在线线 抗体保存 知多少抗体保存 知多少 通常情况下 抗体经恰当保存和处理 大多数应能保持活性数月乃至数年 当然 不同类型抗体 其保存的方法也可 能不一样 以下就抗体的保存 提供一些参考 一 保存温度和条件一 保存温度和条件 对于很多抗体而言 保存在 20 是完全足够了 没有任何证据显示保存在 80 会有更多的好处 分装成小等份可最 大程度减少由冻融造成的损伤 以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染 小等份只需冻融一次 如有剩余 可将剩余 物保存于 4oC 在收到抗体时 在 10 000 g 下离心 20 秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液 并以小等份转移至低蛋白 结合微量离心管中 小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量 小等份应不小于 10 l 等份越小 储液浓度因抗 体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大 在大多数情况下 收到抗体时在 4oC 下保存一至两周 然后再冷冻进行长期保存是可接受的 但也许腹水液是例外 它可能包含蛋白酶 因而应该尽快冻存 同样 遵照说明书上的建议是重要的 大部分抗体的运输条件 一般的运输过程需要 1 2 周的时间 所以是在 4 的条件下来完成的 对于特殊的抗体 如酶 荧光素等偶联抗体 IgG3 同型抗体等抗体的保存有其注意事项 1 偶联抗体偶联抗体 酶偶联抗体不应冻存 而应保存于 4oC 冻融不仅影响抗体结合能力 还会降低酶活性 无论偶联至荧光 染料 酶还是生物素 偶联抗体都应保存于深色试剂瓶中或用金属箔包裹 暴露于光线中将损害偶联物的活性 特别是荧 光偶联物易受到光漂白影响 在实验的所有阶段都应避光 2 IgG3 的同型对照的同型对照 保存在 4 避免冻起来 因为如果出现冻融过程 该抗体非常容易形成多聚体 二 用叠氮化钠防止污染二 用叠氮化钠防止污染 为了防止微生物污染 可将叠氮化钠加入抗体制备品中达到 0 02 w v 的终浓度 但是有时不能使用叠氮化钠 有 以下两中情形 1 如果用抗体染色或处理活细胞 或如果用抗体进行体内研究 一定要使用不包含叠氮化钠的制备品 该抗菌剂也对大 多数其它生物具有毒性 它阻断细胞色素电子传递系统 2 叠氮化钠会干扰氨基参与的任何偶联 应在偶联进行前除去 偶联后 抗体可保存于叠氮化钠中 除此以外 0 01 硫汞撒 硫柳汞 不含伯胺 也是可接受的替代物 叠氮化钠可通过透析或凝胶过滤从抗体溶液中除去 IgG 的分子量为 150 000 道尔顿 IgM 为约 600 000 叠氮化 钠的分子量为 65 道尔顿 截留分子量为 14 000 道尔顿的微透析装置可保留抗体同时使叠氮化物向外扩散 在保持于 4oC 的磁性搅拌器上的烧杯中 每毫升抗体使用至少一升冷 PBS 并搅拌透析装置 6 小时 更换 PBS 两次 每次更换 搅拌至少 6 小时 如有可能 所有材料都应灭菌并且所得的制备物应无菌操作 免费服务热线 021 64689011 上海睿之生物医药科技有限公司 非常感谢您使用 Scimall 科学在线 提供的产品和服务 更多信息请访问 三 冷冻三 冷冻 融化损伤融化损伤 重复冷冻 融化循环可使抗体变性 导致其形成使抗体结合能力降低的聚集物 保存于 20oC 对于大多数抗体是适当 的 保存于 80oC 无明显优势 冰箱不能为无霜型 这些冷冻和融化之间的循环 以减少结霜 恰恰是应该避免的 出 于相同原因 抗体试剂瓶应置于具有最小温度波动的冰箱区域 例如朝冰箱后部放置而不是置于门架上 有些研究人员加入冷冻保护剂甘油达到 50 的终浓度以防止冷冻 融化损伤 甘油可将凝固点降低至低于 20oC 虽 然这对于很多抗体是可接受的 但还是不能确保在该保存条件下的稳定性 通常我们参考具体产品说明书提供的保存方法 在这里 我们也一般不建议将包含甘油的溶液保存于 80oC 因为该温度低于甘油的凝固点 还要注意甘油可被细菌污染 如果加入甘油或任何冷冻保护剂 则应当小心操作 以得到无菌制备物 应避免抗体在稀释至工作浓度后在 4 下保存超过一天 蛋白质在高浓度下保存时一般不易降解 理想的浓度为 1 mg ml 或更高 这是在抗体溶液中加入蛋白质例如 BSA 作为稳定剂的理论基础 加入的蛋白质也有助于减少抗体因结合 于容器壁上而造成的损失 对于打算进行偶联的抗体而言 由于稳定蛋白质会与抗体竞争 降低了偶联的效率 所以不应 加入稳定蛋白质 本实验技术涉及抗体 点击名称查看详细信息 信号转导研究相关抗体 淋巴细胞信号通路相关抗体 神经生物学研究相关抗体 转录调节因子研究相关抗体 肿瘤 凋亡研究相关抗体 细胞周期研究相关抗体 通道研究相关抗体 结构蛋白研究相关抗体 细胞因子和激素研究相关抗体 同源异构结构域研究相关抗体 激素和磷酸化研究相关抗体 GDP GTP 结合研究相关抗体 免费服务热线 021