尿沉渣检测实际应用

泌尿系统疾病与尿液检查,SYSMEX 市场部血液体液课李培龙,图像法 DNA/RNA荧光染色法,UF-100 ( 1995 ),UA-2000 ( 1993 ),UA-1000 ( 1990 ),1990 1995 2000 2005,UF-500i ( 2008 ),UF-1000i ( 2007 ),UF-50 ( 1999 ),图像法分析,尿液流式细胞分析,UF-100i ( 2005 ),SYSMEX尿有形成分分析仪发展历史,一杯茶水引发的闹剧,记者用一个崭新的玻璃杯泡了一杯绿茶，并将茶水当作尿样，分别送往10家医院做尿常规检测，结果令人大吃一惊：两家民营医院和两家省级医院没有从茶水中检出问题，另外6家医院则不同程度从茶水中检测出白细胞和红细胞、胆红素、蛋白等阳性，5家医院给记者配了消炎药，总计药费1300元。,茶水发炎？求真相！,136份报告127份结果呈“阳性” 4月8日，著名生命科学类专业网站丁香园网站公布一份报告，称包括北京协和医院、中日友好医院等全国92家三甲医院的医生自发参加了模拟“茶水尿常规”检测，回收有效报告单136份，其中检出“阳性”项目的报告单为127份，占总数的93.4%；未检出“阳性”项目的报告单为9份，占总数的6.6%.前日上午，中国医师协会检验医师分会副主任委员、北京天坛医院检验科主任康熙雄介绍，报道发表后，引起医疗界广泛关注。 新浪网,原理决定一切！,只有干化学是不够的！,主要内容,2,检测原理、临床意义及影响因素,尿沉渣的主要参数和临床价值,尿常规的主要内容,尿常规检查的方法学进展（80年代前）,80年代前的尿常规检测方法：手工化学方法加显微镜镜检。,尿常规检查的方法学进展（90年代初）,90年代开始，尿常规检测方法：干化学方法加必要时显微镜镜检。,尿常规检查的方法学进展（90年代中）,自动化，干化学+沉渣+镜检,尿常规的组成,1、物理检测（目视或自动分析外观、颜色、浊度、折射率仪、渗透压仪）,2、化学成分粗筛（尿干化学分析仪(手工,半自动或全自动)）,3、有形成分细筛（尿流式分析仪、显微镜检查和染色技术）,泌尿系症状与尿液指标的变化,由此可见，尿常规是肾脏疾病重要的检查手段,各类疾病尿常规关注的项目,各方法的检测原理及影响因素,目测法、半自动、全自动尿机,一、尿干化学检查,尿干化学项目的临床意义,干化学的优缺点,优点：1、方便快捷 解放劳动力2、大批量自动化分析,缺点：1、干扰因素多，容易造成假阴性或假阳性，与镜检结果有差异。2、半定量报告差距较大，不利于连续观察病情、和临界值的判断。 3、检测灵敏度低，漏检率高。4、各厂家的仪器、试纸条结果差异较大。,尿干化学的干扰,对淋巴细胞（如肾移植早期排异反应时出现）无反应,不稳定酶、肌红蛋白、菌尿会引起假阳性；高渗性红细胞漏检,IG型肾病的球蛋白、骨髓瘤的本周氏蛋白漏检,白细胞只测中性粒脂酶,红细胞只测HGB过氧化物酶,蛋白只测白蛋白,对于假单胞菌属和革兰氏阳性菌等无反应 尿道感染漏诊,NIT只测含有亚硝酸盐还原酶的某些细菌,Vit C : GLU、ERY假阴性；青霉素：LEU假阴性；,临床药物影响,只做尿干化学可能造成,RBC、WBC易出现假阳性或假阴性有病理意义的尿有形成分漏检前后结果不一致结果不可通用性,尿干化学应为初筛试验,二、显微镜检查,尿沉渣检查标准化的建议,全国临床检验尿液检查标准化方案1、建立依据：JCCLS、NCCLS、ECCLS2、报告标准化：规定尿沉渣结果必须报 xxxx /ul 3、检测时间：2小时内完成检验。4、标准化操作：标本留取、离心、定量计数板、计数体积5、检查内容：RBC、WBC,管型,结晶,细菌,寄生虫（或虫卵）、真菌、精子、粘液等6、尿沉渣检查应建立质量保证体系,卫生部临检中心,中华医学会检验学会血液学与体液学检验专家委员会 (2002年1月28-2月1日，广州),显微镜项目的临床意义,*丛玉隆,马骏龙,岳秀岭,等.中国健康人尿液显微镜检测法有形成分结果调查.临床检验杂志,2006;24(2) :8184,病理管型的临床意义,尿结晶的临床意义,三鹿奶粉患儿尿中非晶形尿酸盐,碱性尿酸性尿中磷酸胺镁结晶,结石病人尿中尿酸结晶,显微镜检查的优缺点,优点：1、准确辨别多种有形成分形态，有重要临床意义。2、相差显微镜还能分辨红细胞的变形性，为血尿来源提供诊疗依据。缺点：1、费时：每份标本处理时间15min 无法保证2h内完成，形态改变2、人为误差大：检测CV403、线性范围窄：高值标本无法准确 定量，以致无法连续监测病情,畸形红细胞（G5）脱落的芽苞,畸形红细胞（G3）面包圈,畸形红细胞（G3）花环状,正形红细胞,尿比重高或碱性尿时的小红细胞,红细胞在高渗尿中，由于尿液浓缩，红细胞因脱水而皱缩颜色较深呈锯齿状,红细胞在碱性尿中，易发生变形、缩小、或完全破坏呈褐色颗粒状,显微镜是什么的金标准？形态 or 计数?,小游戏：请把镜下不同颜色的圆点数清,您用了多少时间？不同的人计算结果一致吗？如果背景再复杂些还能算清吗？,单做干化学+显微镜可能出现,结果处理时间过长，延误诊疗检测超过2小时，尿渗透压致WBC、RBC管型、病理上皮细胞破碎，漏检结果无可比性、重复性：镜检CV40%无法连续观察疗效,到底是多少？你的药灵不灵？,WBC前天是4，今天还是4,显微镜是形态的金标准而非定量计数的金标准,三、尿沉渣分析仪,最新全自动尿沉渣分仪UF1000i/500i,流式细胞计数核酸荧光染色技术，沉渣、细菌在专用通道检测,为临床提供更多信息和参数,UF1000i报告项目的临床意义,*各实验室应自已定义或验证参考范围,UF1000i研究参数临床意义,*各实验室的复检限应自定义或验证后使用*为避免医疗纠纷，建议女性病人勿报告此项,UF1000i诊断信息的临床意义,红细胞信息判断血尿来源,肾性和非肾性血尿的通用诊断标准异形红细胞 75%为肾性血尿;异形红细胞20%为非肾性血尿,三种红细胞形态定义,混合型?,小细胞型 ?,正常细胞型?,分布宽,分布窄,小细胞,正常细胞,UF对血尿来源的判断,Toru Hyodo, Kazuo Kumano et al. Detection of glomerular and non-glomerular red blood cell by automated urinary sediment analyzer. Jpn J Nephrol 37:35-43,1995. UF-100：敏感性 100， 特异性 92.54%* 镜检法： 敏感性 95.83%，特异性 93.33%马骏龙，丛玉隆等。全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的探讨。中华医学检验杂志 V20 (5), 1997。 UF-100：敏感性 100， 特异性 78.2%*Hyodo所选非肾小球病变对象排除了血尿同时伴菌尿病人,UTI（尿路感染症）信息,Forward Scatter (前向散射),Fluorescent (荧光),杆菌/E.coli,球菌/S.aureus,判断标准： WBC:10个/L， BACT：105cfu/L,诊断尿道感染和药物疗效观察,通过白细胞准确的定量信息和直观的散点图信息为急、慢性泌尿系统感染提供快速鉴别诊断依据；判断尿路感染的用药治疗效果；对预后进行监测。,白细胞检测,散点图区分布：体积大的高Fsc的白细胞为细胞活性较强的白细胞，一般在急性感染时为主慢性感染时，白细胞活性较弱、或凋亡，荧光染色较强，因此出现在高Fl区,尿液电导率定量分级信息,表达电流通过导体的难易程度的指标尿液电导率与摩尔渗透压浓度之间有较高的相关性（= 0.928）反映肾脏功能以及尿液浓缩功能好坏的重要指标 分级报警的等级值1 级（RANK1）0.03.0 mS/cm2 级 （RANK2）3.115.0 mS/cm3 级 （RANK3）15.127.0 mS/cm4 级（RANK4）27.139.0 mS/cm 5 级 （RANK5）39.1mS/cm ,电导率与尿渗透压相关性研究,姜文玲，两种方法测定的尿液渗透压和尿液电导率相关关系分析，中国医学工程2007，15（2）,电导率与代谢物浓度的关系,Slope=1.08 R=0.84,Slope=0.752 R=0.98,电导率为何不受GLU、PRO影响？,电导率只测定尿液中的离子浓度，与蛋白质无关尿中的葡萄糖为无机物，不带电荷，与电导率无关，与渗透压有关；因此糖尿病患者的蛋白、尿糖不影响尿电导率的检测，可以排除蛋白、尿糖对尿渗透压的影响，有效检测肾脏浓缩稀释功能。,UF1000i的优点,优点：1、快速：100标本/小时；保持有形成分的完整性，令计数更准确；快速为临床提供多信息的诊疗参考依据。2、准确定量计数：CV10%，重复性好。3、线性范围广：060000的计数范围，让严重泌尿系疾病患者的诊疗有据可依。4、为临床提供更多临床诊断信息：RBCInfo、UTI?、Cond.RANK,最佳尿常规检查方法：,化学成分定性初筛,软件衔接整体化报告,细胞形态、管型确认,有形成分定量筛选,干化学UF筛选镜检确认,尿液分析的整体检测流程,70 %,尿常规报告的解读,尿组合这么多结果，如何分析？,病人用VC4g，抑制隐血化学反应，致使其造成假阴性。,RBC ：20-25/HP,显微镜：RBC0-2/高倍视野,有类血红蛋白物质干扰,体检中心的困惑,医院院体检中心： 尿常规潜血（干化学）阳性率太高，而受检者并无相关临床表现，无谓的进一步检查给体检者带来经济和精神上的负担。该如何分析及对检查者解释？,体检中心的困惑,免疫胶体金法为比对方法进行鉴别，阳性者为真阳性，阴性者为假阳性。,假阳性的标本中：ph=6.5的占17.3%,统计11月份体检中心集体体检尿常规1379潜血结果如下：(阳性：342）,尿液检查质量控制,标本采集前病人的准备,向病人解释检测时间及方法食物的影响：（提醒病人注意控制） 过量饮水尿液稀释，致假阴性 高蛋白饮食PH降低、NIT假阴性药物的影响：（验单应注明影响的药物） PH:碳酸氢钠、乙酰唑胺等 GLU：皮质醇、阿司匹林、对氨基水杨酸等致假阳性； Vit C、左旋多巴、非那宗吡啶等致假阴性。 KET：水杨酸盐、苯乙双胍等致假阳性。 PRO：奎宁、奎宁丁等致假阳性、大量青霉素致假阴性。 ERY：大量Vit C致假阴性。 LEU：呋喃妥因致假阳性；Vit C、庆大、头孢氨苄等致假阴性。 管型：影响肾功能的抗生素、抗结核药、抗肿瘤药、麻醉药、 疫苗、类毒素、免疫血清等均可能引起假阳性。,标本采集前准备,容器要求：一次性洁净容器，容积50ml，圆形开口直径4.0cm,底部较宽易于开启的密封装置,不同方式所采尿标本的检测应用范围,来源: Roche 尿液基础与实验诊断 2003版, P9.德文 Peter Hagemann, Horet Kimling ,Bernd Zawta 等 ,顾可梁 翻译,男性患者尿标本采集,采集前先洗手指导未行包皮切除的患者褪上包皮露出尿道口用消毒清洁的小布巾清洁阴茎头，从尿道口开始向上清洁排尿第一部份去掉，采集中段尿到容器中，后段排掉避免前列腺液或精液混入。,女性患者尿标本采集,采集前先洗手采用蹲式用消毒清洁的小布巾清洁尿道口和周围处排尿第一部份去掉，采集中段尿到容器中，后段排掉避开月经期，防止阴道分泌物混入尿内,婴幼儿尿标本采集,分开儿童的腿保证会阴部清洁、干燥、无黏液、勿施粉、油等移去防护纸，拉紧皮肤，将采集袋紧贴于会阴/阴茎