基因工程的基本操作程序习题汇总

1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 1 页 共 14 页 基因工程的基本操作程序习题基因工程的基本操作程序习题 一 选择题 每小题 3 分 共 39 分 1 下列关于基因工程的叙述 错误的是 A 目的基因和受体细胞均可来自动物 植物或微生物 B 限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 C 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D 载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达 2 下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述 错误的是 A 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B 限制性核酸内切酶的活性受温度影响 C 限制性核酸内切酶能识别和切割 RNA D 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 3 如图是利用基因工程技术培育转基因植物 生产可食用疫苗的部分过程示意图 其 中 Pst Sma EcoR Apa 为四种限制性核酸内切酶 下列说法错误的是 A 图示过程是基因工程的核心步骤 B 表达载体构建时需要用到限制酶 Sma C 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D 除图示组成外 表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构 4 下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图 有关叙述正确的是 A 过程 获取的目的基因 可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B 将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因 不能得到抗冻性增强的抗冻 蛋白 C 过程 构成的重组质粒缺乏标记基因 需要转入农杆菌才能进行筛选 D 应用 DNA 探针技术 可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 2 页 共 14 页 达 5 下图为 DNA 分子在不同酶的作用下所发生的变化 图中依次表示限制酶 DNA 聚合酶 DNA 连接酶 解旋酶作用的正确顺序是 A B C D 6 下列关于基因工程的叙述 不正确的是 多选 A 基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B 细菌质粒是基因工程常用的运载体 C 通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的 DNA 用另一种处理运载体 DNA D 为培育成抗除草剂的作物新品种 导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 7 天然的玫瑰没有蓝色花 这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B 而开蓝色花的 矮牵牛中存在序列已知的基因 B 现用基因工程技术培育蓝玫瑰 下列操作正确的 是 A 提取矮牵牛蓝色花的 mRNA 经逆转录获得互补的 DNA 再扩增基因 B B 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 B C 利用 DNA 聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞 D 将基因 B 直接导入大肠杆菌 然后感染并转入玫瑰细胞 9 将 ada 腺苷酸脫氨酶基因 通过质粒 pET28b 导人大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨 酶 下列叙述错误的是 A 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 ada D 每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 10 下列叙述符合基因工程概念的是 A B 淋巴细胞与肿瘤细胞融合 杂交瘤细胞中含有 B 淋巴细胞中的抗体基因 B 将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌 获得能产生人干扰素的菌株 C 用紫外线照射青霉菌 使其 DNA 发生改变 通过筛选获得青霉素高产菌株 D 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上 11 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中 下列操作错误的是 A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B 用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C 将重组 DNA 分子导入烟草原生质体 D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 13 下列关于基因工程的叙述 错误的是 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 3 页 共 14 页 A 目的基因和受体细胞均可来自动 植物或微生物 B 限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 C 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D 载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达 二 填空题 共 51 分 1 科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的 DNA 分子重组 并且在大 肠杆菌体内表达成功 请根据图回答问题 1 此图表示的是采取 合成基因的方法获取 基因的过程 2 图中 DNA 是以 为模板 形成单链 DNA 在酶的作用下合成双链 DNA 从而获得了所需要的基因 3 图中 代表 DNA 含 基因 4 图中 表示 2 下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程 请据图回答下列有关问题 1 若限制酶 的识别序列和切点是 GATC 限制酶 识别序列和切点是 G GATCC 那么在 过程中 应用限制酶 切割质粒 用限制酶 切割抗虫基因 2 将通过 过程得到的大肠杆菌涂布在含有 的培养基上 若能够生长说明已 导入了普通质粒或重组质粒 反之则说明没有导入 3 要确定抗虫基因导入后 是否能稳定遗传并表达 需进行检测和鉴定工作 则在个 体水平上的鉴定过程可简述为 经筛选分析 该植株细胞中含有一个携 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 4 页 共 14 页 带抗虫基因的 DNA 片段 因此可以把它看作是杂合子 理论上 该转基因植株自 交产生的 F1代中 仍具有抗虫特性的植株占总数的 4 过程所用的现代生物技术称为 从遗传学角度来看 据细胞通过 过 程 能形成棉植株的根本原因是细胞具有 3 干扰素是病毒侵入人体后由淋巴细胞产生的一种免疫活性物质 它具有广谱抗病毒 的作用 利用现代生物技术生产干扰素的流程如下 1 过程 产生的物质 A 是 cDNA 文库 大于 小于 人的基因组文库 2 过程 用到的工具酶是 过程 需先用 处 理受体细胞 过程 通常采用 技术 3 过程 和 的关键技术分别是 4 基因工程的核心步骤是图中的 填标号 4 2011 安徽理综安徽理综 31 家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力 将人干扰素基因导入家 蚕细胞并大规模培养 可提取干扰素用于制药 1 进行转基因操作前 需用 酶短时处理幼蚕组织 以便获得单个细胞 2 为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达 需要把来自 cDNA 文库的干扰素基因片段 正确插入表达载体的 和 之间 3 采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞 该 PCR 反应体系的主要 成分应包含 扩增缓冲液 含 Mg2 水 4 种脱氧核糖核苷酸 模板 DNA 和 4 利用生物反应器培养家蚕细胞时 贴壁生长的细胞会产生接触抑制 通常将多孔的 中空薄壁小玻璃珠放入反应器中 这样可以 增加培养的细胞数量 也有 利于空气交换 5 2010 天津理综 天津理综 7 下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线 图中 tetR表示四环素抗性基因 ampR表示氨苄青霉素抗性基因 BamH Hind Sma 直线所示为三种限制酶的酶切位点 据图回答问题 1 图中将人乳铁蛋白基因插入载体 需用 限制酶同时酶切载体和人 乳铁蛋白基因 筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 5 页 共 14 页 2 能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 填字母代号 A 启动子 B tetR C 复制原点 D ampR 3 过程 可采用的操作方法是 填字母代号 A 农杆菌转化 B 大肠杆菌转化 C 显微注射 D 细胞融合 4 过程 采用的生物技术是 5 对早期胚胎进行切割 经过程 可获得多个新个体 这利用了细胞的 性 6 为检测人乳铁蛋白是否成功表达 可采用 填字母代号 技术 A 核酸分子杂交 B 基因序列分析 C 抗原 抗体杂交 D PCR 6 2009 上海卷上海卷 人体细胞内含有抑制癌症发生的 P53基因 生物技术可对此类基因的 变化进行检测 1 目的基因的获取方法通常包括 和 2 上图表示从正常人和患者体内获取的 P53基因的部分区域 与正常人相比 患者在 该区域的碱基会发生改变 在上图中用方框圈出发生改变的碱基对 这种变异被称 为 3 已知限制酶 E 识别序列为 CCGG 若用限制酶 E 分别完全切割正常人和患者的 P53 基因部分区域 见上图 那么正常人的会被切成 个片段 而患者的则被切 割成长度为 对碱基和 对碱基的两种片段 4 如果某人的 P53基因部分区域经限制酶 E 完全切割后 共出现 170 220 290 和 460 个碱基对的四种片段 那么该人的基因型是 以 P 表示正常基因 P 表示异常基因 7 2009 福建卷福建卷 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示 质粒上有 Pst Sma EcoR Apa 等四种限制酶切割位点 请回答下列问题 1 构建含抗病基因的表达载体 A 时 应选用限制酶 对 进行切割 2 培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长 欲利用该培养基筛选已导入 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 6 页 共 14 页 抗病基因的香蕉细胞 应使基因表达载体 A 中含有 作为标记基因 3 香蕉组织细胞具有 因此 可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉 组织细胞培育成植株 图中 依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 8 2012 高考全国新课标卷高考全国新课标卷 40 根据基因工程的有关知识 回答下列问题 1 限制性内切酶切割 分子后产生的片段 其末端类型有 和 2 质粒运载体用 EcoR 切割后产生的片段如下 为使运载体与目的基因相连 含有目的基因的 DNA 除可用 EcoR 切割外 还 可用另一种限制性内切酶切割 该酶必须具有的特点是 3 按其来源不同 基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类 即 DNA 连接酶和 DNA 连接酶 4 反转录作用的模板是 产物是 若要在体外获得大量反转录产物 常采用 技术 5 基因工程中除质粒外 和 也可作为运载体 6 若用重组质粒转化大肠杆菌 一般情况下 不能直接用未处理的大肠杆菌作为受 体细胞 原因是 9 2012 福建高考 福建高考 现代生物科技专题 肺细胞中的 let 7 基因表达减弱 癌基因 RAS 表达增强 会引发肺癌 研究人员利用基因工程技术将 let 7 基因导入肺癌细胞 实验表达 发现肺癌细胞的增殖受到抑制 该基因工程技术基本流程如图 请回答 进行过程 时 需用 酶切开载体以插入 let 7 基因 载体应用 RNA 聚 合酶识别和结合的部位 以驱动 let 7 基因转录 该部位称为 进行过程 时 需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞 以利于传代培 养 研究发现 let 7 基因能影响 RAS 的表达 其影响机理如图 据图分析 可从 细胞提取 进行分子杂交 以直接检测 let 7 基因是否转录 肺癌细胞增 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 7 页 共 14 页 殖受到抑制 可能是由于细胞中 RASmRNA RAS 蛋白 含量减少 引起的 10 2012 天津高考天津高考 7 生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究 以下实 例为体外处理 蛋白质 DNA 复合体 获得 DNA 片段信息的过程图 据图回答 1 过程 酶作用的部位是 键 此过程只发生在非结合区 DNA 过程 酶作用的部位是 键 2 两过程利用了酶的 特性 3 若将得到的 DNA 片段用于构建重组质粒 需要过程 的测序结果与 酶的识别序列进行对比 以确定选用何种酶 4 如果复合体中的蛋白质为 RNA 酶聚合 则其识别 结合 DNA 序列位基因的 5 以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 多选 A 分离得到核糖体 用蛋白酶酶解后提取 rRNA B 用无水乙醇处理菠菜叶片 提取叶绿体基粒膜上的光合色素 C 通过分子杂交手段 用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位 D 将抑制成熟基因导入番茄 其 mRNA 与催化成熟酶基因的 mRNA 互补结合 终止后者翻译 延迟果实成熟 11 2012 江苏高考江苏高考 32 图 1 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度 bp 即碱基对 和 部分碱基序列 图 2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列 现有 Msp I BamH I Mbo I Sma I4 种限制性核酸内切酶 它们识别的碱基序列和酶切位点分别为 C CGG G GATCC GATC CCC GGG 请回答下列问题 1 图 1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接 2 若用限制酶 SmaI 完全切割图 1 中 DNA 片段 产生的末端是 末端 其产物 长度为 3 若图 1 中虚线方框内的碱基对被 T A 碱基对替换 那么基因 D 就突变为基因 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 8 页 共 14 页 d 从杂合子中分离出图 1 及其对应的 DNA 片段 用限制酶 Sma I 完全切割 产 物中共有 种不同长度的 DNA 片段 4 若将图 2 中质粒和目的基因 D 通过同种限制酶处理后进行连接 形成重组质粒 那么应选用的限制酶是 在导入重组质粒后 为了筛选出含重组质粒的大肠 杆菌 一般需要用添加 的培养基进行培养 经检测 部分含有重组质粒 的大肠杆菌菌株中目的基因 D 不能正确表达 其最可能的原因是 答案 1 解析 基因工程中有 3 种工具 但工具酶只有 2 种 工具酶本质为蛋白质 载体本质为小型 DNA 分子 但不一定是环状 标记基因的作用 筛选 检测目的基 因是否导入受体细胞 常见的有抗生素抗性基因 发光基因 表达产物为带颜色物质等 受体细胞中常用植物受精卵或体细胞 经组织培养 动物受精卵 一般不用体细胞 微生物 大肠杆菌 酵母菌等 一般不用支原体 原因是它营寄生生活 一定能用哺乳 动物成熟红细胞 原因是它无细胞核 不能合成蛋白质 答案 D 2 解析 考查基因工程中工具酶的有关知识 限制性核酸内切酶的化学成分是蛋白质 它的活性受到温度和 pH 的影响 限制性核酸内切酶的特点是能识别双链 DNA 中特定的核 苷酸序列 可在特定的位点进行切割 但不能识别和切割 RNA 限制性核酸内切酶主要是 从原核生物体内分离出来的 答案 C 解析 图示过程为基因表达载体的构建过程 是基因工程中的核心步骤 构建过程中 需要将目的基因完整切割下来 此时要用到限制酶 Pst EcoR 抗卡那霉素基因是标 记基因 目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞 基因表达载体包括启动子 目的基 因 终止子和标记基因等 答案 B 4 解析 过程 中通过逆转录法获得的目的基因 可用于基因工程 但该目的基因 中不存在内含子和非编码序列 因此不能用于比目鱼的基因组测序 将多个抗冻基因编码 区相连形成的能表达的新基因可能不再是抗冻基因 利用农杆菌的目的是将重组质粒导入 受体细胞 而不是筛选重组质粒 应用 DNA 探针技术 可以检测受体细胞中是否成功导 入了目的基因 但不能检测目的基因是否完全表达 答案 B 5 C 限制酶可在特定位点对 DNA 分子进行切割 DNA 聚合酶在 DNA 分子复制时 将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链 DNA 连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起 解旋酶的作用是将 DNA 双链解开螺旋 为复制或转录提供模板 6 ACD 基因工程经常以抗菌素抗性基因为标记基因 质粒是基因工程常用的运载 体 通常用同一种限制酶切割目的基因和运载体 以获得相同的黏性末端 受体细胞可以 是受精卵 也可以是体细胞 D 为培育成抗除草剂的作物新品种 导入抗除草剂基因时 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 9 页 共 14 页 只能以受精卵为受体 7 答案 A 解析 提取矮牵牛蓝色花的 mRNA 逆转录得到 DNA 然后扩增 可获得大量的 基因 B A 正确 从基因文库中获取目的基因 只要根据目的基因的相关信息和基因文库 中的信息进行筛选对比即可 不需要用限制酶进行切割 B 错误 目的基因与质粒的连接 需要用 DNA 连接酶 而不是 DNA 聚合酶 C 错误 目的基因需要和运载体连接后形成重 组质粒再导入 而且应该用农杆菌进行感染 而不是大肠杆菌 D 错误 8 解析 将多个抗冻基因编码区相连成能表达的新基因 合成的蛋白质为新的蛋白质 不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 故选项 B 正确 过程 是利用反转录法合成目的基因 由于没有非编码区和编码区中的内含子 不能用于比目鱼基因组测序 用作载体的质粒 必须具有标记基因才能便于检测和筛选 应用 DNA 探针技术 可检测转基因抗冻番茄中 目的基因的存在和转录 但不能检测是否成功表达 故选项 A C D 错误 答案 B 9 解析 受体大肠杆菌成功表达腺苷酸脱氨酶 说明每个大肠杆菌细胞至少含有一 个重组质粒 且每个 ada 至少指导合成一个腺苷酸脱氨酶分子 重组质粒的形成需先用限 制性核酸内切酶切割目的基因和质粒形成相同的黏性末端 再在 DNA 连接酶的作用下连 接起来 连接起来的序列中会 含有限制性核酸内切酶的识别位点 不同的限制性核酸内切 酶识别位点不同 不是每个限制性核酸内切酶的识别位点都能插入 ada C 项错误 答案 C 10 解析 基因工程是在生物体外 通过对 DNA 分子进行人工 剪切 和 拼接 对生 物的基因进行改造和重新组合 然后导入受体细胞内进行无性繁殖 使重组基因在受体细 胞内表达 产生出人类所需要的基因产物 所以 B 为基因工程 而 A 为动物细胞工程 C 为诱变育种 D 无人为因素不属于基因工程 答案 B 11 解析 限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体 烟草花叶病毒的遗传物质 是 RNA 不能用限制性核酸内切酶切割 A 项错误 DNA 连接酶可以连接具有相同黏性 末端的目的基因和载体 B 项正确 受体细胞可以是受精卵和体细胞 也可以是去除细胞 壁的原生质体 C 项正确 目的基因为抗除草剂基因 所以未成功导入目的基因的细胞不 具有抗除草剂的能力 筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞 D 项正确 答案 A 12 解析 抗除草剂基因导入到油菜的染色体后则可以通过花粉传入环境中 转抗虫基 因的植物可杀死无抗性昆虫 对昆虫的抗性具有选择作用 所以会导致昆虫群体抗性基因 频率增加 转基因技术打破了生殖隔离 动物的生长激素基因转入植物后可以表达 来源 于自然界的目的基因导入植物体后 可能破坏原有的基因结构 具有不确定性 外源基因 也可能通过花粉传播 使其他植物成为 超级植物 等 所以转基因技术存在着安全性问题 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 10 页 共 14 页 答案 A 13 解析 载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞 但由于它和目的基因是 相互独立的 并不能促进目的基因的表达 答案 D 二 填空题二 填空题 1 答案 1 人工 胰岛素原目的 2 胰岛素原信使 RNA 逆转录 3 重组 胰岛素原 4 将重组 DNA 分子导入受体细胞 解析 本题是对基因工程操作程序的考查 操作时 首先要获取目的基因 然后让目的 基因与载体结合构建成重组 DNA 分子 再通过一定方法把重组 DNA 分子导入受体细胞使 其扩增和表达 2 解析 本题极易出错的部分有 在第 1 小题中没有看清目的基因插入的位置 从而 不能确定用限制酶 还是 来切割质粒还是切割抗虫基因 第 3 小题检测抗虫性状在个体 水平上是否表达 应该让害虫吞食转基因棉花的叶片 观察害虫的存活情况 这个地方也 有出错的 主要没有看清是在哪个水平上进行检测的 在切割质粒时应遵循一个原则 不能同时将两个标记基因切开 至少保留一个 所以 只能用酶 切割 而从目的基因两侧碱基序列可知 只能用酶 才得到含目的基因的 DNA 片段 如果导入了重组质粒 此时重组质粒中四环素抗性基因能正常表达 而氨苄青霉素 抗性基因已被破坏 所以涂布在含有四环素的培养基上 能够生长的话 说明导入了重组 质粒 普通质粒 如果把携带一个抗虫基因的 DNA 片段看作杂合子 可以认为是 Aa 自 交产生的 F1中仍具有抗虫特性的植株占总数的比例为 把一个细胞培养成一个植株的技 3 4 术称为植物组织培养 答案 1 2 四环素 3 让害虫吞食转基因棉花的叶片 观察害虫的存活情况 以确定其是否具有抗虫性状 4 植物组织培养 发育成完整个体的全部遗传物质 3 4 解析 1 cDNA 来自 mRNA 的逆转录或根据 mRNA 的碱基序列人工合成 cDNA 文 库小于基因组文库 2 构建基因表达载体用到限制酶和 DNA 连接酶 将目的基因导入大 肠杆菌须用 Ca2 处理受体细胞 导入动物细胞用显微注射法 3 过程 的关键技术是胚胎 移植 过程 的关键技术是细胞核移植 4 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建 即 3 解析 本题综合考查基因工程 细胞工程和 PCR 技术 意在考查考生对基础知识的 理解 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理可以将动物组织分解成单个细胞 基因表达载体包括启 动子 目的基因 终止子 标记基因等 其中启动子和终止子有利于目的基因的表达 标 记基因有利于目的基因的检测 PCR 技术中需要原料 4 种脱氧核苷酸 缓冲液 模板 DNA 引物和耐热 DNA 聚合酶等 在生物反应器中放入多孔的中空薄壁小玻璃珠的目的 一方面有利于细胞的贴壁生长 避免接触抑制 另一方面有利于气体交换 答案 1 胰蛋白 或胶原蛋白 2 启动子 终止子 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 11 页 共 14 页 3 对干扰素基因特异的 DNA 引物对 TaqDNA 聚合酶 4 扩大细胞贴壁生长的附着 面积 4 解析 1 由图示可知 需用 Hind 和 BamH 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基 因 因酶切后 tetR四环素抗性基因结构被破坏而 ampR氨苄青霉素抗性基因结构完好 故用 含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌 2 启动子是一段特殊的 DNA 序列 是 RNA 聚合酶识别和结合的位点 可调控基因的特异性表达 3 过程 表示 把重组载体导入受体细胞的过程 当受体细胞为动物细胞时 常采用显微注射法 4 过程 表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宫的过程 属于胚胎移植技术 5 经过程 得到新个 体是细胞全能性的体现 6 人乳铁蛋白基因是否成功表达 关键看是否有其表达产物即人 乳铁蛋白 可用抗原 抗体杂交法检测该蛋白是否存在 答案 1 Hind 和 BamH 氨苄青霉素 2 A 3 C 4 胚胎移植技术 5 全能 6 C 5 解析 本题主要考查基因工程相关知识 1 目的基因的获取方法有直接分离和化学方法人工合成两种 2 仔细对比正常人与患 者的基因序列可知是 CG 碱基对变为了 TA 碱基对 这种变化属于基因突变 3 正常人 P53 基因有两个限制酶 E 的识别序列 完全切割后可产生三个片段 患者 P53基因中有一个限 制酶 E 的识别序列发生突变 且突变点位于识别位点内 这样患者就只有一个限制酶 E 的 识别序列 切割后产生两个片段 分别为 290 170 460 对碱基 220 对碱基 4 正常人 的 P53基因经限制酶 E 完全切割后产生三个片段 290 对碱基 170 对碱基和 220 对碱基 患者产生两个片段 460 对碱基和 220 对碱基 则该人的基因型应为 P P 答案 1 从细胞中分离 通过化学方法人工合成 2 见下图 基因碱基对的替换 基因突变 3 3 460 220 4 P P 解析 本题考查基因工程的有关知识 1 从图可看出 只有 Pst EcoR 两种酶能 保持抗病基因结构的完整性 所以构建含抗病基因的表达载体 A 时 应选用限制酶 Pst EcoR 两种酶 对抗病基因的 DNA 和质粒进行切割 2 卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长 欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的 香蕉细胞 应使基因表达载体 A 中含有抗卡那霉素基因 以此作为标记基因 3 香蕉组织细胞具有全能性 因此 可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组 织细胞培育成植株 图中 依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 12 页 共 14 页 答案 1 Pst EcoR 含抗病基因的 DNA 质粒 2 抗卡那霉素基因 3 全能性 脱分化 再分化 6 答案 1 黏性末端 平末端 2 切割产生的 DNA 片段末端与 EcoR 切割产生的相同 3 E coli T4 4 mRNA RNA cDNA DNA PCR 5 噬菌体 动植物病毒等 6 未处理的大肠杆菌吸收质粒 外源 DNA 的能力极弱 解析 1 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将 DNA 的两条链分别切开时 产生的是黏性末端 而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时 产生的则是平末端 2 为使运载体与目的基因相连 不同的限制酶应切割出相同的黏性末端 它们必须 要能识别相同的核苷酸序列 并且使每条链中相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 3 DNA 连接酶 根据酶的来源不同 可以将这些酶分为两类 一类是从大肠杆菌 中分离得到的 称为 E coli DNA 连接酶 另一类是从 T4 噬菌体中分离出来的 称为 T4DNA 连接酶 4 反转录是以 RNA 为模版来合成 DNA 的过程 可以在体外短时间内大量扩增 DNA 的技术叫 PCR 多聚酶链式反应 5 基因工程中除质粒外 还有 噬菌体的衍生物 动植物病毒等 6 大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜 能阻止其他物质的进入 只能通过 Ca2 处 理细胞 使细胞处于能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态 这种细胞称为感受态细胞 7 答案 10 分 1 限制性核酸内切酶 或限制 启动子 2 胰蛋白 3 RNA RAS 蛋白 解析 1 过程 表示基因表达载体的构建 在该过程中需要用限制酶对载体进行 切割以便于目的基因的插入 限制性核酸内切酶 简称限制酶 写其他的不得分 启动 子是一段特殊的 DNA 序列 是 RNA 聚合酶结合和识别的位点 RNA 聚合酶结合到该位 点 可驱动转录过程 2 过程 表示动物细胞培养 培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理 使 之分散成单个的细胞 之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养 3 判断目的基因是否在受体细胞中转录 可用分子杂交技术来进行 从细胞中提取 1 50 01 上午 1 50 01 上午 1 50 01 上午 3 29 2020 143 29 20201 50 01 上午 第 13 页 共 14 页 mRNA 和用放射