肝炎病毒检测

肝炎病毒检测,第二临床诊断学科,,LOGO,内容,,LOGO,概述,肝炎是指肝脏有炎性损害，是临床上的多发病。许多病原微生物、寄生虫、毒物、毒素、酒精、药物以及自身免疫紊乱都会引起肝炎。,,LOGO,内容,,LOGO,肝炎的流行历史久远，可追溯到公元前。但是引发临床表现以肝脏损害症状为主的肝炎病毒的研究只是近50年的事情。 自1965年Blumberg等发现“澳抗”后，又相继发现了多种肝炎病毒。 自然界中引起肝炎的病毒很多，但具有嗜肝性的却有限，它们分别是甲、乙、丙、丁、戊五种肝炎病毒。,概述,肝炎病毒分类,,LOGO,甲肝病毒特点,是单链RNA病毒。经粪口传播。发病率高，婴幼儿和青少年高发。起病急，多伴有黄疸。自限性，多可自愈。无慢性化。终身免疫。,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,检查：HAV常在转氨酶升高前56天就存在于患者的血液和粪便中。发病2周开始，粪便中不再排出HAV。目前临床上主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫分析（RIA）法检测HAV-IgM和HAV-IgG，其次检测HAVAg。HAV-RNA可采用PCR技术检测。,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,【参考值】 均为阴性 抗HAV-IgM、 抗HAV-IgA、 抗HAV-IgG HAVAg HAV-RNA,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（1）抗HAV-IgM是病毒衣壳蛋白抗体，于HAV感染1周后产生，血中持续36个月，是早期诊断甲肝的特异性抗体。 抗HAV-IgA是感染早期肠道粘膜分泌的局部抗体。,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（2）抗HAV-IgG 代表着抗HAV总抗体，甲肝初期血中滴度已相当高，23个月达高峰。抗HAV-IgG为保护性抗体，病愈后可长期存在. 对流行病学调查和接种疫苗效果的观察有重要意义。,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（3）HAVAg 存在于HAV感染后1020天的粪便中，其阳性可证实HAV在体内的存在。 见于急性期甲肝。 发病第1周时粪便阳性率为42.9%，12周为18.3%，2周后消失。,,LOGO,一、甲型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（4）HAV-RNA 从分子水平对HAV抗原给以更准确的说明。 对甲型肝炎的诊断具有特异性，对早期诊断的意义更大。临床少用。,,LOGO,乙肝病毒示意图,,LOGO,乙肝病毒特点,是能够感染人类的最小的双链DNA病毒，两条链长短不一。具有顽强的抵抗力，耐热、耐低温、耐紫外线、耐干燥。,,LOGO,乙肝病毒特点,传播途径很广，血液、体液、夫妻、母婴均可传播。发病率高。,,LOGO,乙肝病毒特点,具有很强的嗜肝性。感染后易形成慢性炎症，反复迁延，肝脏损伤严重。易形成肝硬化。是肝癌的主要诱因。,丙肝病毒示意图,,LOGO,丙肝病毒特点,是RNA病毒，易发生变异和变形。传播途径为血液。通过两种机制损害肝脏，一是直接破坏肝细胞，二是通过激发免疫破坏肝脏。慢性肝炎、肝硬化、肝癌发病率均高于乙肝。,,LOGO,三、丙型肝炎病毒标志物检测,HCV为直径3060nm的RNA病毒，可通过体液途径和母婴传播，但HCV主要通过输血而感染，占输血后肝炎的80%90%，HCV主要在宿主的肝细胞内复制，引起的丙型肝炎虽较乙型肝炎轻，但更易转变为慢性。,,LOGO,三、丙型肝炎病毒标志物检测,主要检测 抗-HCV IgM 抗-HCV IgG HCV-RNA。 【参考值】均为阴性,,LOGO,三、丙型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（1）丙型肝炎抗体的检测 急性丙型肝炎患者，发病后4周抗-HCV IgM即可阳性，持续14周，6个月内不能转阴者提示转为慢性丙型肝炎；抗-HCV IgG阳性表明已有HCV感染。输血后肝炎有80%90%的患者抗-HCVIgG阳性。经常接受血制品治疗的患者可以合并HCV的感染，易使病变转为慢性，肝硬化或肝癌。 丙型肝炎抗体是有传染性的标志而不是保护性抗体，故阴性者不能排除丙型肝炎。,,LOGO,三、丙型肝炎病毒标志物检测,【临床意义】（2）HCV-RNA的检测 HCV感染后12周即可从血中检出HCV-RNA。 HCV-RNA的阳性提示HCV复制活跃，传染性强。 连续观察HCV-RNA，结合抗-HCV的动态变化，可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。,,LOGO,丁肝病毒特点,结构上有缺陷，不能单独致病，必须附着在乙肝病毒表面。所有的丁肝病人均同时患有乙肝。,,LOGO,四、丁型肝炎病毒标志物检测,HDV感染发生于以下两种情况：HDV和HBV同时感染；对慢性乙型肝炎病人或HBV携带者发生重叠感染。,,LOGO,四、Hepatitis D virus Infection,【参考值】 HDVAg 抗-HDVIgG 抗-HDVIgM RIA和ELISA法均为阴性； HDV-RNA：RT-PCR法为阴性。,,LOGO,四、丁型肝炎病毒标志物检测,（1）HDVAg 在感染后出现较早，但持续时 间短（12周）。 HDVAg与HBsAg同时阳性，表示丁肝与乙肝病毒同时感染 易迅速发展为慢性或重型肝炎。,【临床意义】,,LOGO,四、丁型肝炎病毒标志物检测【临床意义】（2）抗-HDV IgG阳性：只能在HBsAg阳性的血清中测到，是诊断丁型肝炎的可靠指标，且可以持续多年。 抗-HDV IgM出现较早，用于早期诊断。HDV和HBV联合感染时，抗-HDVIgM一过性升高HDV和HBV重叠性感染时，抗-HDV IgM持续性升高,,LOGO,戊肝病毒特点,是RNA病毒。猪是病毒宿主。经粪-口传播，多由水源被污染所致。主要为青壮年发病，且男性多发。临床表现与甲肝相似，但严重。无终身免疫，一生可以多次患病。主要表现为急性肝炎（急性黄疸性肝炎）,,LOGO,五、戊型肝炎病毒标志物检测,检测可自患者粪便中用电镜或免疫电镜技术检测HEV，或用PCR法检测粪便中的HEV-RNA。目前，临床诊断常检测抗-HEV IgG和抗-HEV IgM。,,LOGO,五、戊型肝炎病毒标志物检测参考值RIA和ELISA法均为阴性 临床意义 95%的急性期病人抗-HEV IgM阳性（持续23个月），是确诊HEV感染较为可靠的指标；抗-HEV IgG阳性（可持续约1年），目前倾向于认为是一种保护性抗体，提示HEV近期感染。,,LOGO,小结,,LOGO,小结,,LOGO,小结,,LOGO,小结,乙肝病毒,乙型肝炎检测及临床应用进展,,LOGO,WHO报道 全球约20亿人曾感染过HBV 3.5亿人为慢性HBV感染者 每年约100万死于HBV感染所致 的肝衰竭、肝硬化和HCC,我国 HBV感染率为57.6% HBV携带者7.18%, 约1.2亿 慢性乙肝病人2000万,慢性乙肝感染的流行分布,,LOGO,,LOGO,全球60亿人口,每年因乙肝相关疾病死亡100例，占死亡病因第七位,15%25%最终将死于与HBV有关的肝癌,20亿人曾感染HBV,占全球人口1/3,,LOGO,,LOGO,,LOGO,,LOGO,乙型肝炎: 世界性的公共卫生问题,1992-1994年调查 HBsAg阳性率为9.70%2000年调查 HBsAg阳性率为9.10%2007年调查 HBsAg阳性率为7.18% 15年内减少3000万人感染HBV 抗HBc阳性率 50%-60% 抗HBs阳性率 20%-30%,,LOGO,,LOGO,,LOGO,中表面抗原（S+preS2）,核蛋白壳HBcAg (HBeAg),DNA聚合酶,膜蛋白,基因组 DNA,小表面抗原HBsAg (S),RNA 引物,大表面抗原（S+preS2+preS1),乙肝病毒颗粒示意图,,LOGO,,LOGO,HBsAg存在三种形式小球形柱形Danes颗粒,,LOGO,,LOGO,HBV检测方法进展,,LOGO,乙肝病毒检测,乙肝病毒进入人体后，带给人体三种抗原（异体蛋白），人体的免疫细胞针对其产生免疫球蛋白，称为抗体，目的为中和抗原，保护人体。人体针对三种抗原产生的抗体为表面抗体(HBsAb) 、 e抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb) 。,,LOGO,乙肝病毒检测,因此，我们就通过检测这些蛋白质（抗原和抗体）来判断人体是否感染病毒，以及感染的程度。,,LOGO,HBsAg,乙肝病毒感染后26个月出现。参与组装病毒。急性自限性肝炎，6个月内可消失；慢性肝炎或慢性病毒携带者，可持续阳性。,HBsAg（）是病毒复制和传染性的标志,,LOGO,HBsAb,是人体针对HBsAg产生的一种保护性抗体，可以中和HBsAg，保护肝细胞。随着HBeAg的消失而出现。,HBsAb（）标志病毒复制减少和传染性降低,,LOGO,HBeAg,由病毒产生，经过肝细胞浆的内质网，直接分泌到肝细胞外，进入外周血液及全身。与HBcAg结构非常相似。不参与组装病毒，但可以麻痹人体免疫系统，是病毒逃避免疫攻击的手段。,HBeAg（）是病毒复制和传染性的标志,,LOGO,HBeAb,随着HBeAg的消失而出现。这不是保护性抗体，它的阳性，是机体对乙肝病毒的一种应答，提示你曾感染过。但病毒的复制基本停止，传染性一般较小。,HBeAb（）标志着病毒复制减少、传染性降低,疾病向好的方向发展,,LOGO,HBcAg,HBcAg只存在于HBV感染的肝细胞内，外周血液中没有。一般血清学方法检测不到HBcAg。很强的免疫源性，刺激人体产生抗体。参与组装病毒。,,LOGO,HBcAb,是人体针对HBcAg产生的抗体，分为两种，IgM型和IgG型。IgM（）产生早，消失早。IgG（）产生晚，持续时间长。,IgM（）是病毒近期感染或慢性感染者病毒活动的标志,IgG（）是病毒近期感染或慢性感染者病毒活动的标志,,LOGO,临床常见的乙肝五项结果,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,急性肝炎早期，传染性强,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,急性或慢性现症感染，传染性强。,“大三阳”,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,有无传染性应结合HBV DNA检测结果,“小三阳”,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,有过HBV感染，目前有无传染性应结合HBV DAN结果,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,HBV感染的恢复期，有免疫力，无传染性,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc ,HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb ,注射疫苗后；遥远的过去有过HBV感染,HB