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第 7 章创伤感染的细菌 【 教学目标 】1. 掌握: 葡萄球菌、 A群链球菌的主要致病物质、所致疾病;破伤风梭菌致病性和防治原则。2. 熟悉:葡萄球菌、 A群链球菌的形态染色、培养特性、分类、防治原则,致病性葡萄球菌的鉴别要点;链球菌抗 “ O” 试验及意义;破伤风梭菌的生物学特性。3. 了解:葡萄球菌抗原构造,免疫性和微生物检查;链球菌抗原构造,免疫性和细菌学检查;破伤风梭菌免疫性和微生物检查;第一节第一节 葡萄球菌葡萄球菌 属属一 、生物学特征1、形态与染色: 葡萄串状排列的 G+菌。广泛存在于自然界,医务人员带菌率 70%,是医院内交叉感染的重要 来源。2、培养特性 易培养 普通平板 血平板:有些菌形成透明溶血环( 溶血) 有 色素 金黄色 白色 柠檬色普通平板 血平板3、生化反应 :分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不产气,致病株能分解 甘露醇 。4抗原结构磷壁酸磷壁酸SPA荚膜荚膜 或或 多糖:有利于多糖:有利于 细菌粘附细菌粘附 葡萄球菌葡萄球菌 A蛋白蛋白细胞壁的表面蛋白细胞壁的表面蛋白SPAFab Fc本质 :单链多肽, 90%以上的金葡菌表面, 完全抗原特性:与人和一些 动物 IgG1, IgG2, IgG4的 FC段非特异性结合。 作用: 1) SPA与 IgG结合后所形成的复合物具有 抗吞噬 、 激活补体,促细胞分裂, 引起 超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。SPAIgGFc receptor巨噬细胞细菌细菌 2)含 SPA的金黄色葡萄球菌为载体,开展 协同凝集试验 ,用于多种微生物 可溶性抗原 检测。Y+ YYYY+ YYYY YY Y YYYY Y葡萄球菌 Ab 待 测 Ag 凝集5分类与分型: 按色素及生化反应不同:分 3种 金黄色葡萄球菌( S.aureus)表皮葡萄球菌( S.epidermidis) 腐生葡萄球菌( S.saprophyticus)(致病性葡萄球菌的 鉴别 )6抵抗力: 对外界因素的抵抗力强于其他无芽孢菌 对消毒剂和碱性染料(龙胆紫)敏感 易产生耐药性,特别对青霉素MRSA耐 甲氧西林金黄色葡萄球菌,长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与 MRSA定植或感染的病人接触都是造成院内 MRSA流行的危险因素。二、致病性:1致病物质 :外毒素葡萄球菌溶血素杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素毒性休克综合征毒素 -1酶凝固酶透明质酸酶纤维蛋白酶耐热核酸酶( 1) 葡萄球菌 溶血素: 外毒素,有 、 、 、 等型别,对人致病的主要是 溶素; 能 损伤细胞膜,破坏 红细胞、白细胞、血小板及多种组织细胞。( 2)杀白细胞素 细胞毒素; 只 攻击白细胞和 吞噬细胞; 死亡的白细胞形成脓栓、导致中毒性炎症反应和组织坏死; 抵抗宿主吞噬细胞吞噬,增强细菌侵袭力。( 3)肠毒素 约 1/3临床分离金黄色 葡萄球菌可产生, 9种血清型。 引起急性胃肠炎,即 食物中毒。 耐热 100 30min, 抗胃肠液中 蛋白酶。 作用机制:刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒。食物中毒1-6h污染食物大量肠毒素 人误食产毒素细菌呕吐( 4)表皮剥脱毒素 (表皮溶解毒素) 裂解表皮的棘细胞层细胞; 引起烫伤样皮肤综合征 ( SSSS)( 5)毒性休克综合征毒素 -1( TSST-1): 能引起发热; 增加对内毒素的敏感性; 与葡萄球菌肠毒素、溶素及革兰阴性菌产生的内毒素共同作用,引发毒性休克综合征。( 6) 凝固酶 : 能使经抗凝处理的人或兔血浆发生凝固 游离凝固酶(分泌到菌体外) 结合凝固酶(纤维蛋白原受体)凝固 酶原样物质 凝固酶样物质纤维蛋白原(液态)纤维蛋白(固态) 血浆凝固协同因子纤维蛋白原 + 菌体 纤维(液态) 蛋白 原受体血浆凝固交联致病机理: 抵抗吞噬细胞 的 吞噬作用 ,保护细菌; 保护细菌免受血清中杀菌 物质的 杀灭 ; 使感染 局限化并能形成血拴。 意义:鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标毒素性疾病 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征化脓性感染 皮肤软组织感染 内脏器官感染 全身感染2所致疾病 :特点:脓汁黄而粘稠,化脓灶局限痈皮肤化脓感染 支气管炎、肺炎(脓血痰) 脓胸 骨髓炎 心内膜炎 中耳炎各器官化脓感染 多途径侵入机体,导致多部位感染SSSS 弥漫性红斑和水疱形成,继以表皮上层大片脱落,受损部位的炎症反应轻微。毒素性疾病 :由外毒素引起 烫伤样皮肤综合征( SSSS)表皮剥脱毒素 食物中毒 :产毒菌株污染食物,繁殖产毒,食后1-6h发生急性胃肠炎(恶心、 呕吐、 腹疼、腹泻), 1-2d恢复 。 毒性休克综合征:高热,呕吐、腹泻、弥漫性红疹、低血压,休克等3、免疫性 机体 有天然免疫 力 感染 后建立的特异性免疫力 不强 ,故可反复 感染ELISA三、微生物学检查法标本 脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检 革兰阳性葡萄球菌生长现象 色素, 溶血生化反应毒素鉴定四、防治 原则防注意消毒隔离注意个人卫生防 止医源性感染防止耐药性产生治抗菌素药敏试验自身菌苗疗法第二节 链球菌属( 1)甲型溶血性链球菌:菌落周围有草绿色溶血环,这类细菌成为草绿色 链球菌 机会致病菌 ;( 2)乙型溶血性链球菌:菌落周围有完全透明溶血环,这类菌成为溶血性 链球菌 致病力强 ;( 3)丙型溶血性链球菌:菌落周围无溶血环,称不溶血性 链球菌 不致病 。溶血溶血一 、生物学性状1 形态染色 : G+,球形,链状排列, 球形 或卵圆形,直径 0.5-1.0m,链状排列,培养早期( 2-4h)有荚膜。无芽胞,无鞭毛。2 培养特性: 营养要求高 (含血液、血清等 ),少数专性厌 O2 液体培养为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落,不同菌株溶血不一 3、抗原构造C抗原,细胞壁中,群特异性(分 20个群 , A群 致病菌 (溶血性链球菌或化脓性链球菌 )C抗原外层,有四种成分: M抗原荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质二、 致病性与免疫性一) A群链球菌(化脓性链球菌)1致病物质 :细胞壁成分脂磷壁酸( LAT): 菌毛样结构,有助于链球菌的定植。M蛋白: 抵抗吞噬;与心肌、肾小球基底膜有共同抗原,与超敏反应有关细胞壁受体: 有利于细菌黏附侵袭性酶透明质酸酶(扩散因子):分解细胞间质的透明质酸 组织中扩散链激酶( SK):SK 纤维蛋白溶解 溶纤维蛋白酶原 溶纤维蛋白酶 病菌扩散用于治疗急性心肌梗塞链道酶( SD):降解 DNA,脓汁变稀,病菌扩散。胶原酶:溶解胶原纤维外毒素链球菌溶血素链球菌溶血素 O( SLO):对氧敏感,遇氧失活SLO破坏红细胞和中性粒细胞抗原性强,感染 2周至病后一年内可查到抗体( ASO)ASO试验,风湿热及其活动性的辅助诊断链球菌溶血素 S( SLS):对氧稳定,抗原性弱。引发 溶血致热外毒素(红疹毒素):直接作用于下丘脑引起发热2所致疾病 :多途径感染,引起多种疾病, A群引起者占 90%以上。( 1)化脓性感染 :淋巴管炎,淋巴结炎,蜂窝组织炎, 扁桃体炎,咽峡炎,鼻窦炎,中耳炎,产褥热等。淋巴管炎面部脓疱疮蜂窝组织炎丹毒( 2)毒素性疾病 :u猩 红热小儿急性呼吸道 传 染病潜伏期 2 5天,起病急 剧 ,突 发 高 热 、 头 痛、咽痛、恶 心、呕吐 典型病征:草莓舌、皮疹、口周 苍 白( 3)超敏反应性疾病 : 风湿热: A群链球菌感染 12周时,表现为关节炎、心肌炎、心内膜炎、心包炎等; 急性肾小球肾炎:多见于儿童和少年,链球菌感染 12周后表现肾脏损害。M蛋白引发机体的超敏反应3、免疫性 :抗 M蛋白抗体有保护作用型别间无交叉免疫猩红热患者可建立牢固的 同型 抗毒素免疫二)甲型溶血型链球菌(草绿色链球菌)亚急性心 内膜 炎:龋 齿:变形链球菌口腔、上呼吸道正常菌群三、微生物学检查法标本直接涂片镜检革兰阳性链球菌分离培养脓汁,血液,咽喉拭子1、细菌学诊断 抗 “ O”试验( ASO test) :链球菌侵入体内 产生 链球菌溶血素 O( SLO), 刺激机体产生相应 抗体( ASO)。用SLO 检测病人血清 中 ASO的量。 效价为 250单位左右,辅助诊断风湿热; 400单位,活动性风湿热 。2、血清学检查四、防治原则 :积极治疗儿童链球菌感染选用青霉素第三 节 破 伤风梭菌一、生物学性 状 G+ ,芽孢正圆位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状,有周鞭毛,专 性厌氧 致病条件: 伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深(如刺伤),有泥土或异物污染 大面积创伤、烧伤,坏死组织多,局部组织缺血 有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口 无侵袭力,仅在局部繁殖,其致病作用完全有赖于病菌所产生的外毒素 破伤风痉挛毒素二、致病性破伤风痉挛毒素 强毒性蛋白质:对人的致死量是强毒性蛋白质:对人的致死量是 1g 经经 0.3%甲醛作用甲醛作用 4周后脱毒成为类毒素周后脱毒成为类毒素 稳定期产生:一条多肽 细菌裂解释出菌体:断裂为 轻链( A链) -S-S-重链( B链) A链具有毒性作用链具有毒性作用 B链能与神经细胞表面受体神经节苷脂结合链能与神经细胞表面受体神经节苷脂结合 对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力痉挛 毒素重 链 ( B链 ) +神 经 元 细 胞膜受体轻链( A链)进入胞浆内小泡中沿轴索逆行向上到达脊髓前角,并上行至脑干阻止释放抑制性神经冲动传递介质(伸肌、屈肌同时收缩,呈强直性痉挛)发病机制典型症状w 牙关紧闭 苦笑面容w 颈项强直 角弓反张w 膈肌痉挛 呼吸困难三、免疫性 破伤风免疫属外毒素免疫,主要是抗毒素发挥中和作用(毒素与中枢神经组织结合非常牢固,一旦结合即非抗毒素所能中和) 病后不会获得牢固免疫力 获得有效免疫力的途径是人工免疫四、微生物学检查法 临床诊断主要结合创伤史和特有体征 微

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