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文档简介
生化测试一 氨基酸一、填空题1.氨基酸的结构通式为 。2.氨基酸在等电点时,主要以 兼性/两性 离子形式存在,在pHpI的溶液中,大部分以 阴离子形式存在,在pH1B. n=1C. n1D. n大于等于1E. n小于等于110酶的抑制剂 (B)A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性 C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响D.一般为强酸,强碱 E.都和底物结构相似11关于变构调节,正确的是 (B)A.所有变构酶都有一个调节亚基,一个催化亚基B.变构酶的动力学特点是酶促反应与底物浓度的关系呈s形而不呈双曲线形C.变构激活和酶被激活剂激活的机制相同D.变构抑制与非竞争抑制相同12同工酶的叙述,正确的是 (C)A.结构相同来源不同 B.由不同亚基组成 C. 电泳迁移率往往不同 D.对同一底物具有不同专一性13丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于 (C)A反馈抑制 B底物抑制 C竞争性可逆抑制 D非竞争性可逆抑制 E反竞争性可逆抑制14下列叙述哪一种是正确的 (C)A所有辅酶都包含有维生素组分B所有的维生素都可以作为辅酶的成分C所有的B族维生素都可以作为辅酶的成分D只有B族维生素可以作为辅酶的成分E只有一部分B族维生素可以作为辅酶的成分。15. 关于酶的必需基团的错误描述是 (E)A.可催化底物发生化学反应B.可与底物结合C.可维持酶活性中心的结构D.可存在于酶的活性中心以外E.只存在于酶的活性中心 16. 某一符合米曼氏方程的酶,当S=2Km时,其反应速度V等于 (B) A.VmaxB.2/3VmaxC.3/2VmaxD.2VmaxE.1/2Vmax 17. 酶的非竞争性抑制作用的特点是 (D) A.抑制剂与酶的活性中心结构相似 B.抑制剂与酶作用的底物结构相似 C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D.抑制作用不受底物浓度的影响 E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小 18. 关于修饰酶的错误描述是 (C) A.酶分子可发生可逆的共价修饰B.这种修饰可引起其活性改变 C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应 E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式 19. 有关全酶的描述下列哪一项不正确(D) A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成B.通常一种酶蛋白和辅助因子结合 C.而一种辅助因子则可与不同的酶蛋白结合D.酶促反应的特异性取决于辅助因子 E.酶促反应的高效率取决于酶蛋白20.酶的竞争性抑制作用的特点是(B) A.抑制剂与酶的活性中心结构相似 B.抑制剂与酶作用的底物结构相似 C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D.抑制作用不受底物浓度的影响 E.动力学曲线中Km值不变,Vmax变小21.下列哪个过程是酶原的激活过程 (B)A.前胶原原胶原B.胰岛素原胰岛素C.凝血因子IIa D.凝血因子IIIIa E.糖原合成DI22. 已知两种酶互为同工酶(D) A.它们的Km的值一定相同B.它们的等电点相同C.它们的分子结构一定相同D.它们所催化的化学反应相同E.它们的辅基一定相同23. 酶促反应的最适温度 (E)A.随时间延长而升高B.是酶的特征性常数C.在人体内为50D.都不超过50 E.是在某条件下,酶促反应速度最大时的温度 三、是非题1. Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。 ()2. 酶的最适PH值是一个常数,每一个酶只有一个确定的最适PH值。 ()3. 金属离子作为酶的激活剂,有的可以相互取代,有的可以相互拮抗。 ()4. 竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 ()5. 正协同效应使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。 ()6. 从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖(Km=6X10-6mol/l)或果糖(Km=2X10-3mol/l),则该酶对果糖的亲和力更高。 ()7. 判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。 ()8. 蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser,Thr和Tyr外,还有His,Cys,Asp等。()四、名词解释1. 酶的变构调节: 酶在效应物的作用下发生构象改变,同时引起酶的活性变化的调节方式。是一种可逆的快速调节方式。2. 酶的活性中心:酶分子中少数几个氨基酸残基组成的特定空间结构,包括结合部位和催化部位。3. 酶的活力单位: 是指规定条件(最适条件)下一定时间内催化完成一定化学反应量所需的酶量。是衡量酶活力大小的计量单位。有国际酶学会标准单位和习惯单位。4. 比活力: 每单位(一般是mg)蛋白质中的酶活力单位数(酶单位/mg蛋白),可以表示酶的纯度。五、计算题1. 测定一种酶的活性得到下列数据:底物的初浓度:1nmol/10ml;反应时间:10分钟 ;产物生成量:50nmol/10ml;蛋白质浓度:10mg/10ml;反应速度至少在10分钟内与酶活性呈正比,试问此酶的比活力(specific activity)是多少? 把酶的活力单位定义为:在标准的测定条件下,1分钟内生成1摩尔产物所需的酶量。 则此酶的比活力为:5010-91010=510-10活力单位/ mg蛋白质(注意要先根据题意定义酶的活力单位或说明使用国际单位)2. 焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,它的分子量为120000,由6个相同的亚基组成,纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。一个活力单位规定为:在标准的测定条件下,37,15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量。问:(1)毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物?(2)毫克酶中有多少摩尔的活性中心(假定每个亚基上有一个活性中心)(3)酶的转换数为多少?1)根据Vmax为2800单位/毫克酶以及活力单位的规定可得:280010(1560)=31.1mol= 3.110-5mol2)根据酶的分子量为120000,由6个相同的亚基组成,并假定每个亚基上有一个活性中心,可得:6(1120000) = 0.00005mmol= 510-8mol3)转换数定义为:每秒钟每摩尔酶(活性中心)催化中心转换底物的摩尔数。则: Kcat = (3.110-5 )(510-8)=622 S-1生化测试四 核酸化学一、填空题1碱基 和 核糖 构成核苷,核苷和 磷酸 构成核苷酸,核苷酸残基之间以 3-5磷酸二酯 键相连。 2tRNA的二级结构呈 三叶草型 ,三级结构呈 倒L 型。3稳定DNA双螺旋结构的作用力有 碱基堆积力、氢键 和 静电作用力(盐键)。4 DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度,可使其物化性质发生很大改变,如 紫外吸收增加 和 黏度降低,这种现象叫做 变性。其原因是由于 由于DNA的空间结构被破,内部碱基暴露。5WatsonCrick提出的双螺旋结构中,核糖和磷酸 处于分子外边,碱基 处于分子中央,螺旋每上升一圈bp数为10 。6mRNA 分子指导蛋白质合成,tRNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 7核酸可分为DNA 和RNA 两大类,其中DNA 主要存在于 细胞核中,而 RNA 主要存在于 细胞质中。8双链DNA中若 G、C 含量多,则Tm值高。9双链DNA螺距为3.4nm,每匝螺旋的碱基数目为10,这是 B型的DNA。10DNA双螺旋的熔解温度Tm与GC含量、均一性 和 离子强度 有关。 11变性DNA的复性和许多因素有关,包括 DNA浓度,DNA长度,均一性,GC含量和 离子强度等。 12核酸在260nm附近有强吸收,这是由于 碱基环的共轭双键具有紫外吸收的能力。二、选择题1DNA和RNA两类核酸分类的主要化学依据是(D)A.空间结构不同B.所含碱基不同C.核苷酸之间连接方式不同D.所含戊糖不同E.在细胞存在的部位不同2m G的中文名称是(C) A. N2,N2 二甲基鸟嘌呤B. N2,N2 二甲基鸟苷 C. C2,C2 二甲基鸟苷D. 2 甲基鸟苷E. C2,C2 二甲基鸟苷3DNA受热变性,下列叙述正确的是(D)A. 在260nm波长处的吸光度下降B. 多核苷酸键断裂成寡核苷酸键C. 碱基对可形成共价连接D. 加入互补RNA链并复性,可形成DNA-RNA杂交分子4在一个DNA分子中,若A占摩尔比为32.8%,则G摩尔比为(C)A. 67.2% B.32.8%C. 17.2%D.65.6%E. 16.4%5tRNA在发挥其功能时的两个重要部位是(E)A.反密码子臂和反密码子环B.氨基酸臂和D环C.TC环和可变环 D. TC环和反密码子环E. 氨基酸臂和反密码子环6对于tRNA的叙述,下列哪一项是错误的?(D)A.细胞内有多种TrnaB. tRNA通常由7080个核苷酸组成 C.参与蛋白质的生物合成D.相对分子质量一般比mRNA小E. 每种氨基酸都只有一种tRNA与之对应7RNA经NaOH水解,其产物是(E)A. 5-核苷酸B. 2-核苷酸C. 3-核苷酸D. 2和3-核苷酸E. 2,3和5 -核苷酸8对DNA片段作物理图谱分析,需要用(E)A.核酸外切酶B.Dnase IC.DNA连接酶D.DNA聚合酶 IE.限制性内切酶9下列哪一股RNA能够形成局部双螺旋?(B)A. AACCGACGUACACGACUGAAB. AACCGUCCAGCACUGGACGC C. GUCCAGUCCAGUCCAGUCCAD. UGGACUGGACUGGACUGGACE. AACCGUCCAAAACCGUCAAC10Western bootting是用于下列杂交技术中的哪一个(D)A. DNA-DNAB. RNA-RNAC. DNA-RNAD. 抗体-抗原结合11下列关于核酸结构的叙述,那一项是错误的?(B)A.在双螺旋中,碱基对形成一种近似平面的结构B.G和C是两个氢键相连 C. 双螺旋中每10对碱基对可使螺旋上升一圈D. 双螺旋中大多数为右手螺旋,但也有左手螺旋 E. 双螺旋中碱基的连接是非共价结合12下列几种不同碱基组成比例的DNA分子,哪一种DNA分子的Tm值最高?(A) A. A+T=15%B. G+C=25%C. G+C= 40%D. A+T=80%E. G+C= 35%13单链DNA:5pCpGpGpTpA 3,能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交?(C)A. 5-pGpCpCpTpA- 3B. 5-pGpCpCpApU-3C. 5-pUpApCpCpG- 3 D. 5-pTpApGpGpC- 3E. 5-pTpUpCpCpG- 314核酶(ribozgme)的底物是 (B)A. DNA B. RNA C. 核糖体 D. 细胞核膜 E. 核蛋白 15有关PCR的描述下列哪项不正确:(D)A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.扩增的产量按Y=m(1+X)n D.扩增的对象是氨基酸序列E.扩增的对象是DNA序列16.原核生物和真核生物核糖体上都有(B)A.18S rRNA B. 5S rRNA C. 5.8S rRNA D. 30S rRNA E. 28S rRNA三、是非题1生物信息的流向只能由DNARNA,而决不能由RNADNA。()2在生物体内存在的DNA分子多为负超螺旋。()3若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC,则另一条链的顺序为pGpApCpCpTpG。()4用碱水解核酸,可以得到2与3-核苷酸的混合物。()5tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要标志。()6导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2-OH。()7核酸内切酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。()8核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C糖苷键。()9双链DNA在纯水中会自动变性解链。()10限制性内切酶特制核酸碱基序列专一性水解酶。()11DNA中碱基摩尔比规律(A=T;G=C)仅适用于双链DNA,而不适用于单链DNA。()12在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先熔解分开。()13RNA的局部螺旋区中,两条链之间的方向也是反向平行的。()14双链DNA中,每条单链的(G+C)百分含量与双链的(G+C)百分含量相等。()15不同来源DNA单链,在一定条件下能进行分子杂交是由于它们有共同的碱基组成。()16DNA是生物界中唯一的遗传物质。()17在体内存在的DNA都是以WatsonCrick提出的双螺旋结构形式存在的。()18在一个生物体不同组织中的DNA,其碱基组成不同。()19用3H-胸苷嘧啶只能标记DNA,而不能标记RNA。()20多核苷酸链内共价键的断裂叫变性。()21tRNA分子中含有较多的稀有碱基。()22mRNA是人体细胞中RNA中含量最高的一种,因为它与遗传有关。()23DNA双螺旋中A、T之间有3个氢键,G、C之间有2个氢键。()24RNA的分子组成中,通常A不等于U,G不等于C。()25在酸性条件下,DNA分子上的嘌呤碱基不稳定,易被水解下来。()四、名词解释1. 分子杂交:两条来源不同但有碱基互补关系的DNA单链分子,或DNA单链分子与RNA分子,去掉变性条件后互补的区段能够退火复性形成双链DNA分子或DNA/RNA杂交双链分子的过程。2. 增色效应:天然DNA分子在热变性条件下,双螺旋结构破坏,碱基暴露,在260nm波长处的吸收明显增加,此现象称为增色效应。3. Tm值:当50% 的DNA变性时的温度称为该DNA的解链温度,即增色效应达到一半时的温度。4. DNA的变性与复性:DNA的变性是指核酸双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂,变 成单链结构的过程。DNA复性是指变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构,其物理性质和生物活性随之恢复的过程。5. HDNA:又称三股螺旋DNA或铰链DNA,是由部分未缠绕的复合DNA中的一个富嘧啶链,经回折同复合体中伸展的富嘌呤链间形成Hoogsteen氢键而形成的分子内三股螺旋结构,即DNA的双链所形成的三链螺旋。由于形成过程中发生CC+ 的转化,故称H-DNA。常出现在基因调控区。 6. 超螺旋:超螺旋是指双螺旋进一步扭曲或再螺旋的构象。包括正超螺旋(变紧,过旋)和负超螺旋(变松,欠旋)。五、问答题1. 写出cAMP,ATP,DHU,的结构式。2. 比较DNA与RNA在结构上的异同点。DNA和RNA分子中都含有磷酸、戊糖和碱基。其中戊糖的种类不同,组成DNA的戊糖为D-2-脱氧核糖,而RNA分子中的戊糖为D-核糖;另外,在所含碱基中除共同含有A、C、G三种外,T存在于DNA中,而U出现在RNA中。两者均以单核苷酸作为基本组成单位,通过3-5磷酸二酯键连接成核苷酸链,所不同的是构成DNA的基本单位是dNMP,核苷酸残基的数目由几千至几千万个,而构成RNA的基本单位是NMP,核苷酸残基的数目仅有几十到几千个。另外在DNA分子中A=T,G=C,而在RNA分子中AU,GC。它们的一级机构都是多核苷酸链中核苷酸的连接方式、数量和排列顺序。在空间结构上DNA和RNA有显著的差别。DNA分子的二级结构为双股螺旋,三级结构为超螺旋。RNA分子的二级结构是以单链为主,也有少部分卷曲或局部双螺旋结构,进而形成发夹结构。在分子中都存在着碱基互补配对关系:在DNA和RNA中都是G与C配对,并且形成3个氢键,而不同的是DNA中A与T配对,RNA中A与U配对,它们之间都形成2个氢键。3. DNA双螺旋结构模型的要点有哪些?此模型如何能恰当地解释DNA的生物学功能?4. 两条反向平行的互补多核苷酸链围绕中心轴成右手双螺旋结构。碱基间形成氢键,使两条链相连,A=T,GC,碱基堆积力和氢键是维系DNA二级结构稳定的重要因素。每10个核苷酸使螺旋上升一圈,螺距为3.4 nm,螺旋直径为2 nm。磷酸和脱氧核糖构成骨架,位于螺旋外侧,碱基位于内侧,碱基平面与中心轴垂直。双螺旋表面形成大小两个凹槽,分别称为大沟和小沟,二者交替出现。DNA双螺旋中两股链中碱基互补的特点,逻辑地预示了DNA复制过程是先将DNA分子中的两股链分离开,然后以每一股链为模板(亲本),通过碱基互补原则合成相应的互补链(子代),形成两个完全相同的DNA分子,这种复制方式称为DNA的半保留复制。后来证明,半保留复制是生物体遗传信息传递的最基本方式。生化测试五 DNA的复制与修复一、填空题1DNA复制时,连续合成的链称为 前导 链;不连续合成的链称为 滞后 链。2DNA合成的原料是 dNTP ;复制中所需要的引物是 一小段RNA 。3DNA复制时,子链DNA合成的方向是 5 3 。催化DNA链合成的酶是 DNA聚合酶。4DNA复制时,亲代模板链与子代合成链的碱基配对原则是:A与 T 配对;G与 C 配对。5DNA的半保留复制是指复制生成两个子代DNA分子中,其中一条链是来 自亲本,另有一条链是 新合成的 。二、选择题(在备选答案中只有一个是正确的)1DNA复制时,下列哪一种酶是不需要的?EADNA指导的DNA聚合酶BDNA连接酶C拓朴异构酶D解链酶E限制性内切酶2下列关于DNA复制的叙述,哪一项是错误的?BA半保留复制B两条子链均连续合成C合成方向53D以四种dNTP为原料E有DNA连接酶参加3DNA复制时,模板序列5TAGA3,将合成下列哪种互补结构?AA5TCTA3 B5ATCA3C5UCUA3D5GCGA3E5TCTA34遗传信息传递的中心法则是:AADNARNA蛋白质BRNADNA蛋白质C蛋白质DNARNADDNA蛋白质RNAERNA蛋白质DNA5DNA复制中的引物是:CA由DNA为模板合成的DNA片段B由RNA为模板合成的RNA片段C由DNA为模板合成的RNA片段D由RNA为模板合成的RNA片段 E引物仍存在于复制完成的DNA链中6DNA复制时,子链的合成是:CA一条链53,另一条链35 B两条链均为35C两条链均为53D两条链均为连续合成E两条链均为不连续合成7冈崎片段是指:CADNA模板上的DNA片段B引物酶催化合成的RNA片段 C随从链上合成的DNA片段D前导链上合成的DNA片段E由DNA连接酶合成的DNA8合成DNA的原料是:BAdAMP dGMP dCMP dTMPBdATP dGTP dCTP dTTPCdADP dGDP dCDP dTDPDATP GTP CTP UTPEAMP GMP CMP UMP9逆转录过程中需要的酶是:EADNA指导的DNA聚合酶B核酸酶CRNA指导的RNA聚合酶 DDNA指导的RNA聚合酶ERNA指导的DNA聚合酶10.逆转录酶是一类:CA. DNA指导的DNA聚合酶B. DNA指导的RNA聚合酶C. RNA指导的DNA聚合酶D. RNA指导的RNA聚合酶11. 大肠杆菌有三种DNA聚合酶,其中参予DNA损伤修复的是BA. DNA聚合酶 B. DNA聚合酶 C. DNA聚合酶12. DNA复制需要:(1)DNA聚合酶;(2)解链蛋白;(3)DNA聚合酶;(4)DNA指导的RNA聚合酶;(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是:DA. (4)(3)(1)(2)(5) B.(4)(2)(1)(3)(5) C. (2)(3)(4)(1)(5) D. (2)(4)(1)(3)(5)13. 下列有关大肠杆菌DNA聚合酶的描述哪个是不正确的?BA. 其功能之一是切掉RNA引物,并填补其留下的空隙B. 是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶C. 具有35核酸外切酶活力D. 具有53核酸外切酶活力14. 1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?CA. DNA能被复制B. DNA的基因可以被转录为mRNAC. DNA的半保留复制机制D. DNA全保留复制机制三、名词解释;1. 中心法则:是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程,以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制(如烟草花叶病毒等)和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充。2. 半保留复制:DNA复制的一种方式。每
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