合理药物设计综述

精品文档 1欢迎下载 合理药物设计合理药物设计 杨敏 2010113201 摘要 合理药物设计合理药物设计包括基于靶点合理药物设计基于靶点合理药物设计 基于性质的基于性质的 合理药物设计合理药物设计和基于结构的合理药物设计基于结构的合理药物设计 通过对药物结构和 体内靶点的研究 使药物达到需要的目的 抑制酶的活性 促 进某种物质的释放 阻碍通道等 本文主要对基于结构的合理基于结构的合理 药物设计药物设计进行综述 基于靶点的合理药物设计基于靶点的合理药物设计 基于靶点的合理药物设计就是通过对药物作用的靶点进行 研究 找到新的 合适的药物来治疗某些疾病 发现一个的靶 点往往就能设计出一类新药 在新药研究领域也是极受重视的 药物的靶点一般可分为以下几类 细胞膜受体酶细胞膜受体酶 细胞因子细胞因子和 激素激素 核酸 核受体 离子通道 酶等 核酸 核受体 离子通道 酶等 以酶酶为靶点的合理药物设计 血管平滑肌细胞异常的增殖 和迁移在动脉硬化和血管损伤后再狭窄中起着重要的作用 表 皮生长因子 epithelia l growth factor EGF 是已知重要的 血管平滑肌细胞异常增殖与迁移的刺激因子 EGF和EGF受体 EGFR 接到的信号通路在血管重塑和血管损伤后新生内膜形成 中起着极其重要的作用 因此 在病变形成过程中 它常被作 为一个药物治疗战略的靶点 藤黄树产自中国及东南亚地区 中医药文献报道藤黄树脂具有较强的止血 抗炎 抗氧化和抗 精品文档 2欢迎下载 感染作用 藤黄酸 gambogic acid GA 是藤黄树脂中提取的有 效成分 既往研究报道藤黄酸可通过抑制 AKT ERK c2Src FAK 和VEG2FR2等起到较强的抗癌 抗炎和 抑制血管新生的作用 tyrosinekinaseinhibitor TKI 以 其高选择性和低毒性的优势在肿瘤临床治疗中令人目 蛋白质 酪氨酸激酶 PTK 包括四大家族 表皮生长因子家族 胰岛素 家族 血小板家族 纤维细胞生长因子家族 表皮生长因子受 体酪氨酸激酶抑制许多肿瘤组织同时表达表皮生长因子受体 epidermalgrowth factor receptor EGFR 及其配体 EGFR 及其配体网络已经明确为肿瘤治疗的重要靶点 通过对酪氨酸 激酶的研究 可研发出一类抗多种癌症的药物 以离子通道离子通道为靶点的药物设计 钾离子通道开放剂 钾离 子通道复杂 多样及分布广泛 在介导多种生理生化反应中扮 演着重要角色 在动脉平滑肌中存在的四种主要的钾离子通道 中 研究的最为广泛的是ATP酶激活的钾离子通道 其开放和关 闭将直接影响血管平滑肌的功能 IkATP的开放概率与ATP以及 ADP GDP以及GTP有关 IkATP也是某些扩血管物质以及某些抗高血 压物质的作用靶点 一些内源性的扩血管物质如神经肽 降钙 素基因相关肽等可通过激活IkATP而发挥松弛血管的作用 其中应 用较为广泛的药物有吡那地尔 吡那地尔通过开放平滑肌细胞 中的钾离子通道 使钾流出和精细膜电位负偏移 静止细胞超 极化 平滑肌松弛而产生降压作用 精品文档 3欢迎下载 基于性质的合理药物设计基于性质的合理药物设计 基于性质的合理药物设计 近年来 组合化学技术和高通 量筛选的发展为我们提供了大量多样性化合物 药物先导化合 物以及药物候选物 然而 每年上市的新化合物数量却没有增 加 甚至有下降的趋势 究其原因 除了现代药物研究面临许 多新困难 如多药耐药 长期使用 疾病越来越复杂等因素外 药物候选物的药代动力学性质和生物利用度 F 不能够满足各 种适应症治疗方案的要求 进而导致体内药物蓄积 并P或产生 无法耐受的毒副作用是一大主要原因 由于药物候选物的这些 性质只在研发的后期 如临床研究阶段 有时甚至在二期临床或 更晚的时段 才能表现出来 如果药物的继续研发和应用在此阶 段被迫终止 往往直接导致新药研发费用的大量增加以及资源 严重浪费 为了能在早期对合成化合物的药代动力学性质及其 生物利用度进行预测 药物化学家们提出了类药性的概念 类药性是指与良好的临床疗效相关联的物理化学性质 如 溶解性 稳定性等 及生物学特性 即吸收 分布 代谢 排 泄和毒性 ADME Tox 给药途径不同 对药物的药代动力 学性质和生物利用度要求也不同 其中 口服药物具有使用方 便 无痛苦感的优点 而且一旦上市将具有最大的市场 因此 研究药物的类药性主要针对口服药 口服药物的研究较其他给 药途径的药物更加复杂 因为它们在到达治疗靶点之前需要经 过很长的生物环境 如胃中的强酸性环境 肠内的吸收环境和 精品文档 4欢迎下载 肝器官的代谢环境等 化合物必须具有优良的药代动力学特性 及毒理性质 即类药性 才能被有效地输送到靶器官和靶细胞 因此 类药性是与生物活性同等重要的性质 早期准确评价化 合物的类药性将有助于设计与合成优秀的化合物或者化合物化 学库 提高药物候选物甚至药物的命中率 药物的一些典型的结构包括类药5倍率 药物的分子量小于 500 计算脂水分配系数小于5 氢键受体个数小于10 氢键供 体小于5 和lipinski扩充规则 分子内可旋转的键数RB小于或 等于8或分子中环的数目小于等于4 化合物极性分子表面积PSA 小于等于120A2 当一个分子不具备上述六项中的三项时或者以 上时 认为该分子不具备类药性 通过对分子的这些性质的研 究 可以判别分子是不是有作为药物的潜力 这样也可以避免 在二期 三期临床试验上造成较大的损失 基于结构的合理药物设计基于结构的合理药物设计 基于结构的合理药物设计根据研究的对象可分为基于配体的合 理药物设计 间接合理药物设计 和基于受体的合理药物设计 直接合理药物设计 基于配体的合理药物设计基于配体的合理药物设计 基于配体结构的药物设计是从研究一系列药物分子对同一 受体的活性出发 比较他们的结构变化与生物活性之间的关系 找到对该受体能发生结合并产生活性的最普遍的结构因素 并 根据此结构特征设计新的药物分子 目前基于配体结构的药物 精品文档 5欢迎下载 设计方法可以分为两大类 即定量构效关系定量构效关系 QSAR 和药效团药效团 构建构建 pharmacophore modeling 定量构效关系定量构效关系是一种借助 分子的理化性质参数或结构参数 以数学和统计学手段定量研 究有机小分子与生物大分子相互作用 以及有机小分子在生物 体内吸收 分布 代谢 排泄等生理相关性质的方法 定量构定量构 效关系效关系研究是人类最早的合理药物设计方法之一 广泛应用于 药物 农药 化学毒剂等生物活性分子的设计 具有计算量小 预测能力好等优点 在受体结构未知的情况下 定量构效关系 方法是最准确和有效地进行药物设计的方法 根据QSAR 计算结 果的指导药物化学家可以更有目的性地对生理活性物质进行结 构改造 比如在对ar肾上腺素能受体拮抗剂进行结构修饰和改 造上 QSAR 发挥着重要的作用 在研究青藤碱衍生物的消炎镇 痛机理时 以青藤碱为先导化合物 在其A 环4 位酚羟基进行 酰化 醚化合成了七种青藤碱衍生物 通过小鼠扭体和大鼠足 跖肿胀模型分别考察这些衍生物的镇痛和抗炎作用 并用Log it 法计算ED50 采用Hansch 模型对实验结果进行数学处理 拟合QSAR 方程 结果 青藤碱衍生物的结构经红外 质谱及氢 谱得以证实 所得镇痛作用定量构效关系方程为lg1 ED50 0 152 0 832P n 8 R2 0 692 F 13 502 而青藤碱衍 生物抗炎活性与取代基的疏水参数和范德华体积均无显著的相 关性 得到结论 在青藤碱的酚羟基上引入亲脂性基团时有利 于增强其镇痛活性 但对其抗炎活性无显著影响 精品文档 6欢迎下载 药效团药效团是指药物分子与受体结合时起重要作用的特征原子 氧 原子 氮原子等 或基团 疏水基团 芳环 氢键给体 氢键 受体等 这些原子或基团与他们之间的空间距离限制便构成 了药效团 在得到药效团模型后 即可以此为提问结构的模板 搜寻现有的小分子数据库 虚拟筛选出符合药效团要求的其它 分子 进行药理测试 在受体生物大分子三维结果未知的情况 下 有了药效团 即可以比较活性分子和无活性分子的构象和 体积 从而获得受体与药物结合时的结构信息 以便进行必要 的合理药物分子设计 在对ar肾上腺素能受体拮抗剂的药效团 进行了构建 采用Catalyst HypoGen 对他们自己设计合成14 个ar肾上腺素能受体拮抗剂分子及其活性进行研究 得出如图1 药效团假设 此药效团模型由1 个氢键受体 HBA 1 个正电 中心 PI 和3 个疏水基团 HY 组成 药效团特性PI 到HBA 之间的距离为56 2nm 到3 个疏水基团之间的距离分别为 66 9nm 61 7nm 98 7nm 精品文档 7欢迎下载 然后他们用此药效团模型对NCI MayBridge 等化合物库进行虚 拟筛选 从中筛选出486 个化合物 然后将这些化合物进行药 理实验筛选 结果表明其中绝大部分化合物具有ar肾上腺素能 受体拮抗活性 而且有4 个化合物的肾上腺素能受体拮抗活性 达到微mol 级别 基于受体的合理药物设计基于受体的合理药物设计 基于受体的合理药物设计是指一般应用由X 射线衍射 核磁共 振或分子模拟 同源蛋白建模法等 提供的受体三维结构信息 来辅助寻找 设计能够与它发生相互作用并调节其功能的小分 子化合物的过程 随着人类基因组计划的完成 蛋白组学迅猛 发展 大量的疾病相关基因被发现 使得药物作用的受体生物 大分子急剧增加 越来越多的三维结构被测定 有些具有重要 药理作用的药物靶点的三维结构虽然目前还没有被测定 但他 们的一级结构已被阐明 这时可以采用同源蛋白建模的方法建 立其三维结构模型 从而进行直接药物设计 由于计算机技术 精品文档 8欢迎下载 发展日新月异 计算能力空前提高 使得从前由于计算资源不 足而无法开展的药物分子设计变得可行 因此 在诸多因素的 推动下 基于受体的合理药物设计技术已经日趋完善 在药物 分子设计中 基于受体的合理药物设计占有极其重要的地位 一般来说 在通过X 单晶衍射技术或多维NMR 获得受体生物大 分子结合部位的结构后 就可以采用分子模拟软件分析结合部 位的结构性质 特别是静电场 疏水场 氢键作用位点等分布 信息 然后再运用数据库搜寻或运用全新药物分子设计技术 识别得到分子形状和理化性质与受体作用位点相匹配的分子结 构 合成并测试这些分子的生物活性 经过几轮循环 可发现 新的先导化合物 目前基于受体结构的药物设计可分为两大类 一类是根据受体活性位置来构建配体 也就是全新药物设计全新药物设计 de novodrug design 另一类是以受体结构来搜寻配体 也 就是分子对接分子对接 moleculardocking 全新药物设计全新药物设计是指根据受体结合区域的分子表面性质 如空间性 电性 疏水性及氢键等 搜索分子碎片库 让计算机自动构建 出与受体结合区域性质互补的虚拟分子片断 然后对产生的系 列虚拟分子片断按与受体相互作用能和结构匹配情况来生长虚 拟分子 所得到的虚拟分子可以直接当作配体作为数据库搜索 的模板或是配合组合化学方法以减少需要合成化合物的数目 这种方法的优势在于有可能构造出全新结构的先导化合物 局 限性在于设计的化合物在化学合成上可能存在困难 分子设计 精品文档 9欢迎下载 的成功率较低 志贺氏腹泻主要是因感染志贺氏菌所致 转运 RNA 鸟苷糖基转移酶 t RNA guanosine transglycosylase TGT 在该病进程中起着重要作用 故研究 人员利用LUDI 程序对该酶的三维结构进行分析和设计 从中得 到活性较高的化合物 Von Itzstein 等用GRID 程序对感冒病 毒蛋白质唾液酶晶体结构进行分析 发现了Neu5AC2en 上重要 的亲正电位点 以此进行抑制剂的修饰设计 所设计的抑制剂 在体内和体外实验中都有较好的抗病毒活性 并已进入临床研 究 本课题组的季海涛等基于羊毛甾醇14A 去甲基化酶模建晶 体结构 通过MCSS 和LUDI 程序联用的方法设计并合成出具有 全新结构的抗真菌先导化合物 进行的抑酶活性测试表明该类 化合物具有 显著抑酶活性 而分子对接法分子对接法则是比较现实的做法 利用分子对接可自动地将 化合物分子放置于受体的活性结合区域 并寻找其合理的取向 和构象 使得配体与受体的形状和相互作用的匹配最佳 然后 利用打分函数 scoring function 对这种分子对接的优劣进 行打分 从而选择与受体结合区域结合最佳的一组化合物进行 生物活性测试 分子对接法的主要优点是 化合物分子基本上 来自已知化合物数据库 合成路线或分离技术比较成熟 并且 很多化合物可以直接在市场购买 从而大大节省了新药开发的 资金和时间 目前 分子对接法已广泛应用于基于结构的药物 精品文档 10欢迎下载 设计中的数据库搜索及虚拟组合库的设计和筛选中 并且为探 讨相关蛋白分子间的相互作用提供了一个形象而有效的研究手 段 5 用分子对接法探讨扶正抑瘤复方制剂的抑瘤作用机制 扶正抑瘤复方制剂的主要成分为灵芝 女贞子 山药 黄芪 通过查找有关灵芝 女贞子 山药 黄芪的化学成分的国内外 研究文献及北京大学中草药三维结构库 在Sili con Graphics O2 图形工作站上建立该复方可能存在的化合物三维结构谱库 共计230 个结构 为了确定蛋白质3D结构数据库中哪些蛋白质 是与治疗肿瘤免疫作用有 关的靶标 查询了有关药理及药化等方面的资料 给出许多临 床及处于试验阶段的药物的疗效靶标蛋白质 利用这些信息可 以确定有关的蛋白质 由于中药有效成分多为小分子物质 多作用于蛋白质的洞穴中 所以寻找蛋白质复合体 确定活性位点 如图1 阴影部分所示 供ligandfit 模块中完成对接使用 对接具体过程 分子构建 能量优化和对接研究均采用Accel rys 公司Cerius2 分子模拟