真空采血管及采血处理

真空采血管在国内外的历史发展以及现状 本世纪40年代初 真空采血技术被发明 它省略了抽拉针管和推血入试管 等不必要的步骤 利用真空管中预先制造的真空自动吸血入管 很大程度上减 少了溶血的可能 40年代美国BD公司率先推出商品真空型采血系统 其它医疗 器械公司也先后推出自己的真空采血产品 至80年代 一种称为安全管盖 HEMOGARDTM 的全新管盖问世 安全管盖由套在真空管外的特殊塑料罩 和新设计的橡胶管塞组成 二者结合在一起 减少了医疗工作者与管中内容物 接触的可能 也减少了管盖拔出后内容物外溅的机会 塑料罩形成一个双井形 凹陷结构 防止手指与管塞顶端及尾端残留血液的接触 这种带有安全管盖的 真空采血管极大地减少了医疗工作者从采血到血样处理的全过程中沾染血样的 可能 当年安全管盖荣获全美最佳工业设计大奖 真空采血系统由于其干净安 全 简单可靠的特点已在世界范围内被广泛采用 并被NCCLS推荐 成为采血 的标准器械 真空采血管90年代中期开始在我国部分医院使用 目前 大多数大中城市 中型以上的医院已普遍接受了真空采血方式 作为临床血液采集和检测的新方 式 真空采血器是对传统采血 储血方式的一场革命 1 真空采血系统主要由三部分构成 1 双向无菌针头 一端连接真空管 另一端进行皮肤穿刺 由于双向无菌 针头专为采血特别设计而成 与注射用针头不同 针尖斜面成15度 表面特殊 润滑 更锋利 进针方便 一次静脉穿刺后 可以抽取单个或多个血样 2 持针器 持针器内径13 mm 配合规格统一的采血管使用 一端连接双 向针头 另一端接真空管 持针器可以重复使用 3 真空管 真空采血管标准直径13 mm 长75 mm或100 mm 由高质量玻 璃或塑料制成 虽然大小恒定 但由于管内真空度不同 可以抽取不同体积 管内含各种添加剂 抗凝剂和促凝剂等 无需自己配制 添加 减少了工序 方便 快捷 避免了自行配备添加剂的不准确 并且可以满足各种检验对血样 的要求 新型PET材质的真空采血管避免了玻璃试管破损后血液外溢的不安全 2 真空采血管分类和制作原理 目前医院使用的真空采血管主要有以下几个类别 1 无添加剂的干燥空管 白头管 采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂 硅酮 避免血细胞附壁 防止离心时细胞破碎 释放细胞内物质至细胞外 影响试验结果 它利用血液自然凝固的原理使血液凝固 等血清自然析出后 离心使用 主要用于血清生化 肝功 肾功 心肌酶 淀粉酶等 电解质 血清钾 钠 氯 钙 磷等 甲状腺功能 药物检测 艾滋病检测 肿瘤 标志物 血清免疫学 2 促凝管 红头管 采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅酮 同时添加了 促凝剂 如凝血酶 蛇毒 硅石粉 硅碳素 纤维蛋白酶等 可使血液在 10 30 min 凝固 促凝剂能激活纤维蛋白酶 使可溶性纤维蛋白变成不可溶性 的纤维蛋白聚体 进而形成稳定的纤维蛋白凝块 如果想快点出结果时 可采 用促凝管 一般用于急诊生化 3 含有分离胶及促凝剂的采血管 黄头管 管壁经过硅化处理 并涂有 促凝剂可加速血液的凝固 缩短检验时间 管内加有惰性分离胶 惰性分离胶 是一种聚合高分子材料 不溶于水 具有抗氧化 耐高温 抗低温 高稳定性 之特性 比重约在1 04 1 05 血清的比重在1 026 1 031 之间 红细胞的比重 在1 092 1 095 之间 离心时 分离胶液化移到管中央 介于血清或血浆与血 液有形成分之间 离心完毕后 固化形成屏障 使血清或血浆与细胞完全分离 保证了血清化学成分的稳定 冷藏下48 h 无明显改变 惰性分离胶管内可加有 肝素 可达到快速分离血浆的目的 样本又可较长时间保存 分离胶与PET管 具有很好的亲和性 确实起到隔离作用 高品质分离胶在离心后血清中不产生 油滴 因此不会堵塞机器 主要用于血清生化 肝功 肾功 心肌酶 淀粉酶 等 电解质 血清钾 钠 氯 钙 磷等 甲状腺功能 药物检测 艾滋 病检测 肿瘤标志物 血清免疫学 4 管内含有抗凝剂的采血管 1 含有肝素钠或肝素锂的采血管 绿头管 肝素是一种含有硫酸基团的 粘多糖 分子量15000 因有硫酸基团 带有强大的负电荷 具有加强抗凝血 酶灭活丝氨酸蛋白酶的作用 从而阻止凝血酶的形成 并有阻止血小板聚集等 多种抗凝作用 肝素是一种极佳的抗凝剂 对血液成分干扰少 不影响红细胞 体积 不引起溶血 适用于做红细胞渗透脆性试验 血气 血浆渗透量 红细 胞压积 血沉及普通生化测定 因肝素具有抗凝血酶的作用 不适于做血凝试 验 过量的肝素会引起白细胞的聚集 不能用于白细胞计数 因其可使血片染 色后背景呈淡蓝色 故不适于做白细胞分类 由于肝素不能使离体后的血小板 离散 成为单个颗粒或细胞通过微孔 可造成血小板计数减低 白细胞计数及 淋巴细胞计数偏高 商品肝素常含有磷酸盐 可使无机磷测定偏高 肝素抗凝 血应于短时间内使用 否则搁置过久血液又可凝固 2 含有乙二胺四乙酸 EDTA 以及其盐的采血管 紫头管 乙二胺四 乙酸是一种氨基多羧基酸 可以有效地鳌合血液中的钙离子 鳌合钙会将钙从 反应点移走将阻止和终止内源性或外源性凝血过程 从而防止血液凝固 与其 他抗凝剂比较而言 其对血球的凝集及血细胞的形态影响较小 并且可以抑制 血小板的聚集 适用于一般血液学检验 EDTA 溶液pH 与盐类关系较大 低 pH 可使细胞膨胀 EDTA2K2 可使红细胞体积轻度胀大 采血后短时间内平 均血小板体积 MPV 非常不稳定 半小时后趋于稳定 EDTA2K2 使钙 镁 下降 同时使肌酸激酶 CK 碱性磷酸酶 ALP 减低 因这些酶测定需 要这些金属离子 EDTA2K3 的最佳浓度是1 5 mg ml 如果血少 EDTA 浓 度增高 中性粒细胞会肿胀分叶消失 血小板会肿胀 崩解 产生正常血小板 大小的碎片 使分析结果产生错误 EDTA由于螯合钙的作用强 使二磷酸腺 苷 ADP 不能引起血小板聚集 另外EDTA 能抑制或干涉纤维蛋白凝块形 成时纤维蛋白单体聚合 不适用于血凝及血小板功能检查 亦不适用于钙 钾 钠及含氮物质测定 国际血液学标准化委员会 ICSH 推荐使用的抗凝剂是 EDTA2K2 EDTA2Na2 与EDTA2K2 比较结果无明显变化 但其溶解度低 抗凝速度慢 不适合末梢血的抗凝 EDTA 抗凝的末梢血也宜15 min 后测定 否则血小板有暂时聚集使血小板假性减少 白细胞假性升高 直方图异常 3 含有柠檬酸钠抗凝剂浓度为3 2 0 109mol L 的采血管 蓝头管 柠檬酸钠通过作用于血样中钙离子鳌合而起抗凝作用 大部分凝血试验都可用 枸橼酸钠抗凝 它有助于 因子和 因子的稳定 另外 用枸橼酸钠抗凝的血 浆做活化部分凝血活酶时间 APTT 试验 其对肝素的敏感性远远高于草酸 盐抗凝血浆 当APTT试验用于监控接受肝素治疗的患者时 这一点显得非常 重要 枸橼酸钠6 mg 才能抗凝1ml血 碱性强 不适于血液化验 亦不适于做 生化检测 枸橼酸钠对MPV 及其他凝血因子影响极小 可用于血小板功能分 析 血小板的聚集作用随血浆中枸橼酸钠的浓度降低而增高 因此在贫血患者 应加入较正常人为多的抗凝剂 对于血液凝固试验来讲 如果血液比例过低 APTT 时间会延长 凝血酶原时间 PT 结果亦会有显著改变 PT 测定 3 8 的 抗凝剂比3 2 的国际标准化比值 INR 值高 其差别变化一般在0 7 2 7个 INR 单位之间 由于枸橼酸钠毒性小 也用于血液保存 同时枸橼酸钠在水中 溶解慢 故只能配成水剂而不能用粉剂 抗凝剂与血比例为1 9时 主要用于 纤溶系统 凝血酶原时间 凝血酶时间 活化部分凝血酶时间 纤维蛋白原 采血时应注意采足血量 以保证检验结果的准确性 采血后应立即颠倒混匀5 8 次 4 含有柠檬酸钠抗凝剂浓度为3 8 的采血管 黑头管 其抗凝剂与血 液的体积比为1 4 一般用于血沉检测 抗凝剂比例过于偏高时 血液被稀释 可使血沉加快 5 管内含有草酸钾 氟化钠 1份氟化钠3份草酸钾 灰头管 草酸钾 是最常用的抗凝剂 优点是溶解度大 与血液混合后可迅速与血中的钙离子结 合 形成不溶解的草酸钙 使血液不凝固 常配成10 溶液 0 1ml 10 mg 可使5ml 血液不凝固 常用于血液生化测定 但不适于钾 钙的测定 草酸钾 还抑制乳酸脱氢酶 LDH ALP 淀粉酶 AMY 的活性 由于生成不溶 性的草酸钙沉淀 红细胞会出现锯齿状 白细胞出现空泡 淋巴及单核会变形 不易做血片检查 草酸可影响血液中某些成分的活性及与钙形成的不溶性沉淀 物可影响自动凝血仪测定时光电终点的观察 所以草酸钾很少用于血液学分析 及血凝测定 而氟化钠是一种弱效抗凝剂 浓度达6 10 mg ml 血液才有抗凝 作用 但它是血糖测定的优良保存剂 使用时应注意缓慢颠倒混匀 2 mg ml 血液即能抑制糖分解 一般常同草酸钾合并使用 其比例为氟化钠1份 草酸钾 3份 此混合物4 mg可使1 ml 血液在2 3 d内不凝固和抑制糖分解 一般用于血 糖检测 不能用于尿素酶法测定尿素 也不能用于检测碱性磷酸酶和淀粉酶的 检测 因氟化物可激活尿素酶 淀粉酶 氟化钠用量大时可造成溶血 自动化仪器的大量使用及血液的保存对血样原始性状稳定性提出了更高的 要求 使真空采血技术突破了仅仅只为安全的要求 而准确性 标本的原始性 状 维持时间及管机配合 试管强度等性能指标都不能忽视 如何正确使用真 空采血管以及真空采血管本身的优劣都将影响标本原始性状及检测的准确性 3 真空采血管的正确使用 1 将瓶塞穿刺针 不要将乳胶护套拔下 从采血管中心垂直刺入真空管内 管中预设的真空将使所需要的血液流入管中 应按管壁上的刻度值控制采血量 2 当第一管采完后 拔出瓶塞穿刺针再刺入另一真空管 如此重复操作 可实现一针多管采血 3 保证血液与管内附加剂正确混合 采样后立即轻轻倒置真空管五至八次 当最后一管采样完毕 将针头抽离静脉 管中的负压可将管中残存的约0 4ml的 血吸入管内 4 多管采血顺序 先抽普通 血清管 再抽速凝管 最后抽抗凝管 4 真空采血管本身的优劣 4 1 相关材料的性能指标 1 空采血管的材质 现在采血管多为玻璃材料 普通玻璃的pH相差甚远 溶血 的可能性大大增加 而拉管工艺制作的玻璃试管线性沟密布 深浅粗细无常导 致细胞的挂壁 相比较中性玻璃 药用玻璃 的优势很明显 中性玻璃具有耐 压 溶出物少 分子排列紧密 拉伸时沟槽少等优点 但仍有表面负电荷过强 pb2 Zn2 K Fe2 的相对溶出等缺点 这些都可能改变血液标本的原始性状 因此玻璃试管在使用前应进行无菌和内壁处理 传统的内壁处理就是硅化 即 将硅油分散在乙醚与乙醇中 涂覆管壁晾干或烘烤即成 由于硅油是一种惰性 极强的混合物 不可能与玻璃表面发生任何性质的化学作用 只是粘附在试管 内壁 牢度较低 另外硅油对预先加入的抗凝剂的有机酸根具有包覆作用 使 试剂的络合能力丧失 造成凝血 目前最好的处理方法为钴60照射 去离子水 冲洗 确保无菌 光滑 无异物 有效防止溶血 对无添加剂的采血管内壁涂 有硅酮 避免血细胞附壁 防止离心时细胞破碎 但从环保和安全性去考虑 塑料材料的真空采血管 质轻便于运输 破损率小 用后可直接高压灭菌或焚 烧销毁 将会是真空采血管材质选择的一个很大的趋势 2 密封胶塞 密封胶塞的质量直接影响到试管的真空性能及血液样本的原 始状态 推荐使用丁基橡胶而不用天然橡胶 天然橡胶填料外渗严重 是一种 可致溶血的材料 许多有机填料和助剂 包括石蜡油 硅油 柔软剂 着色剂 等 在真空状态下会沿玻璃管壁往下爬 这类物质尤其影响真空干燥的肝素类 物质的水溶性而导致凝血 另外其气透性及水透性也不符合真空管的技术要求 真空丢失严重 管塞结合部可见塞屑粘壁严重 而丁基橡胶具有良好的塞封性 能 溶出物大大减少 使得采血管即便是在101 3 kPa 的负压时仍能在24 个月 内保持真空恒定 真空恒定使采血对象即使有血压及血液粘度的差别 以及采 血环境温度的变化仍能保持采血量的相对准确 实际采血量误差可控制在 5 以内 误差的来源主要是血液粘度的变化和操作偶然误差 另一方面则是试管 口径的细微差别 现代采血管多采用双层管帽设计 在内层涂有润滑剂的橡胶 软塞外面套有纹面塑料管盖 使开启极为轻松 其侧滑式的开启方式可防止血 液的飞溅 胶塞脊形的设计 使盖更加牢固 盖子顶部凹下部分可保证防止接 触血液标本 减少对操作人员的血源污染 采用国际通用的头盖颜色标记采血 管用途 鲜明夺目 极易分辨 避免采血时用错添加剂以及送检样本与检测项 目不符 3 试管的直径 国标试管的直径是11 6 12 0 mm 而现代医学检验中 的自动生化分析仪以及血液分析仪 大多为美国 日本产品 其样品架内卡直 径为13 mm 国标管显然过小 直接上机后无法固定而程度不同的倾斜 偏离 探针运作时的轴心 探针被击伤的可能性大大增加 而真空采血管多采用13 16 mm 75 mm 13 16 mm 100 mm 的规格 适用于日立 贝克曼2 库尔特 东芝 奥林巴斯 岛津 雅培 拜尔 罗氏 Dade2Bering 法玛西亚 等仪器直接上机使用 4 双向采血针以及持针器 即静脉穿刺针和管塞针 中间软管连接 形成 采血系统 一次进针 多管采血 针头切割边缘 长度及角度采用电脑设计 专门应用于静脉穿刺 切割边缘极为平滑 新型硅胶外膜 使患者的不适及采 样后遗留的疼痛感大大减轻 针管内表面极度光滑 管壁最薄 采血速度快 细胞破损少 管塞针的止血护套在脱离胶塞时能永久封住针头 护套回弹毋需 时间积累 效率极高 护套防止疲劳时限应超过24 个月 该时限内连续冲击30 次 回弹复位率应达100 持针器的设计多为静脉穿刺和管塞穿刺针双向直通式 采样时只需换双向 针头 可反复使用 BD公司的pronto 持针器 采用卡环设计 采样后只需轻按 绿色卡环 即可卸下双向采血针 快速简便 与其配套的设计还有废针丢弃盒 避免采血者被污染针头所伤 北京创格公司的上插式 直角式 持针器 回血 清晰 采血量易观察不易穿透静脉 奥地利greiner 的偏心嘴管的持针架Holdex 刺入静脉角度好 使用方便 4 2 添加剂的正确使用 由于血液分析的多样性 添加剂包括多种成分 如抗凝剂 促凝剂 缓冲 剂 保护剂 分离胶等 其品种 性能 浓度直接影响血样的性状和检测结果 真空采血技术则在品种 浓度方面做到规范一致 并能长期维持其有效性 使 添加剂对检测结果的影响降到最小 虽然真空采血管由于其操作简便 干净安全 准确可靠 正为各医院普遍 应用 但在临床使用过程中 时有各种问题发生 影响了标本的顺利采集 以 下几点是真空采血管使用中应注意的几个问题 1 取血时患者应松弛 环境温暖 防止静脉挛缩 束膊时间不可过长 禁 止拍打手臂 否则可造成局部血液浓缩或激活凝血系统 握拳2 min 后可使钾 的血清浓度增加1 0 1 5 mmol L 血液采集应一针见血 以防止组织损伤 外源性凝血因子进入试管 影响试验结果 2 样本采集血量要充足 真空的存在易使血球破裂 若使用不足血样 采 血后应开启瓶塞片刻 血液与抗凝剂的比例必须精确 抗凝剂在血标本中的绝 对含量可改变血浆中钙离子浓度进而影响实验结果 钙的绝对浓度越高 PT APTT凝固时间越短 3 使用含促凝剂或分离胶的采血管时 一定要等血液凝固后再离心 否则 血清中易出现凝块而造成仪器堵孔 血清管 红 一般要等0 5 1h 含促凝 剂的要等10 30 min 肝素管 绿 混匀后充分抗凝后即可离心分离血浆 分离胶管 黄 5 10 min 后离心 4 推荐的采血顺序为凝血管 血清管 枸橼酸钠管 肝素或EDTA 管 草酸钾2氟化钠管 血沉管 主要原因是第一管内往往含有组织液 易造成凝 血 不适于做血凝测定 5 采血完毕后 先将最后一支试管抽离持针器 然后将针头由静脉拔出 如有漏血 除针头安装不严外 多见于止血保护套剥下或止血护套回弹过慢或 不能回弹到位所致 6 由于真空管的负压相对较大 采血初始 血液流入管底速度快 红细胞 相互撞击可致破裂 临床偶见溶血 对此在采集血标本时 倾斜双向采血针采 血管侧针头 使其靠近采血管侧壁 血液沿管壁缓缓流下 避免红细胞直接撞 击造成破裂 形成溶血 7 由于双向采血针采血管端乳胶护套松动或针头刺出乳胶护套 至使双向 采血针密封不严 静脉穿刺时 血液沿双向采血针采血管端漏出 对此在采血 前检查并安紧乳胶护套 遇有针头刺出则重新套好针头 以保持其密闭性 8 由于穿刺针头贴于血管壁或采血管内无负压 而形成的血液流入不畅现 象 可以在保证静脉穿刺成功的前提下 调节针头方向至血液流入采血管 若 无效则更换采血管 9 由于采血管内负压不足 而导致的采血量不足 可以将注射器针头自采 血管胶塞处刺入 抽吸采血管内空气使之形成负压至采足血标本 原有血容量 较少时也可直接更换采血管 4 3 真空采血管的好坏对分析过程中起到如何重要的作用 预置真空度 严格控制采血量 多数情况下 静脉血样的质量取决于血液和抗凝剂的比例 但是使用针头 注射器 试管采血 抗凝剂的配制 添加 采血的多少都很难严格控制 所以血 液和抗凝剂的比例也很难准确 血液和抗凝剂的比例过高或过低都会影响血样 的质量 血液比例过高时 由于抗凝剂相对不足 血浆中出现微凝血块的可能 性增加 微凝血块可能阻塞检验仪器 影响一些检验指标 采血相对过多时 试管里剩余空间少 采血后混匀血液和抗凝剂变得更加困难 而充分混匀血样 使之达到均匀一致是得到准确血液学检验结果的前提 传统采血无法保证混匀 血液和抗凝剂及其比例 血液比例过低 抗凝剂相对过剩 对很多检验会造成 严重影响 对于血液凝固试验来说 当血液和0 129 mol L或0 105 mol L枸橼酸 钠的比例由9 1降至7 1时 部分活化凝血酶时间测定试验的结果就会有显著 的延长 降至4 5 1时 凝血酶原时间试验的结果就会有显著改变 用含有K3 EDTA的管子采血后 白细胞的形态会发生改变 这种改变和时间及EDTA浓度 有关 K3 EDTA的最佳浓度是1 5 mg ml 如果血少 EDTA的浓度增高中性粒 细胞会肿胀 分叶消失 血小板会肿胀 崩解 产生正常血小板大小的碎片 这些改变都会使血常规检验和血细胞计数得出错误结果 这一点在使用自动血 细胞分析仪时尤为重要 5 安全 有效 保证血液标本的运输 存储及预处理 1 标本的采集 真空采血技术为带盖封闭系统 采血后管中尚有充分空间 可颠倒混匀 确保血液和抗凝剂混合充分 由于静脉穿刺必然会对皮肤 组织 和静脉造成一定程度的损伤 严格讲 为了减少组织促凝血酶原激活酶的影响 最初采集的2 4ml血应该弃之 然后再采实验用血 使用真空采血系统 一次 静脉穿刺后 其所采集的第一管血可以用于血生化等其它检验 第二管用于血 栓和止血实验 同时取血量可根据检测需要而定 如 常用抗凝剂为0 109 mol L枸橼酸钠 它能有效地阻止因子 的降解 并可稀释血浆和血液 但需