中护微生物-实验2细菌的人工培养ppt课件.ppt

实验二 细菌的人工培养 1 实验目的 了解人工培养基的制作 了解细菌的接种方法分离培养方法 平板划线法 混合菌液 了解细菌的生长现象与代谢产物液体 固体 半固体培养基乳糖发酵实验硫化氢实验 2 实验内容 琼脂平板的制作紫外线杀菌实验咽拭实验分组实验皮肤消毒实验空气中细菌计数实验药敏实验常用消毒器械的介绍 3 一 人工培养基的制备和种类 1 制备原则2 制备程序3 常用培养基的分类 4 1 制备原则 1 适当的营养成分 2 合适的酸碱度 3 配制后经灭菌使之无菌 方可应用 5 2 制备程序 配料 熔化 测定及矫正PH 滤过 分装 灭菌 备用 6 3 常用培养基的分类 一 按物理性状分 液体培养基固体培养基 1 5 2 5 琼脂半固体培养基 0 3 0 5 琼脂 二 按用途不同可分 基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基 7 二 细菌接种法 1 平板培养基接种法 操作 2 斜面培养基接种法 示教 3 液体培养基接种法 示教 4 半固体培养基接种法 示教 8 1 平板培养基接种法 操作 密集划线法分区划线法 9 班级 姓名 学号 大肠枯草 uv30 培养箱 10 11 培养基的用途菌落液体 增菌 纯培养 半固体 动力 保存菌种 固体平板 用于分离培养 12 三 细菌生长现象及代谢产物观察 示教 1 细菌在培养基中的生长现象 1 液体培养基 混浊 菌膜和沉淀 2 固体培养基 菌落和菌苔 3 半固体培养基 沿穿刺线生长 穿刺线清晰 周围培养基仍为透明 动力阴性 穿刺线向周围扩散生长 穿刺线模糊 整个培养基变成混浊 动力阳性 2 细菌的代谢产物观察 1 细菌对糖分解产物观察 2 细菌对氨基酸分解产物观察 13 1 液体培养基 均匀混浊生长 葡萄球菌 菌膜形成 枯草芽孢杆菌 沉淀生长 链球菌 14 2 固体培养基 形成菌落和菌苔 观察菌落的大小 形态 透明度 颜色 表面和边缘情况及菌落周围有无溶血环等 15 3 半固体培养基 可用于观察细菌有无动力 痢疾志贺菌沿穿刺线生长 穿刺线清晰 周围培养基仍为透明 动力阴性 大肠埃希菌沿穿刺线向周围扩散生长 穿刺线模糊 整个培养基变成混浊 动力阳性 16 2 细菌的代谢产物观察 1 细菌对糖分解产物观察方法 将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于葡萄糖 乳糖发酵培养基中 置37度24小时培养后观察结果 结果 大肠埃希菌分解葡萄糖 乳糖 产酸产气 伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气 不分解乳糖 17 糖发酵试验 18 2 细菌的代谢产物观察 2 细菌对氨基酸分解产物观察靛基质试验 分别接种大肠埃希菌和伤寒沙门菌于蛋白胨水培养基 含色氨酸 内 置37度24小时培养后 然后沿管壁徐徐加入靛基质试剂 对二甲基醛 数滴 静置片刻 在两液界面出现红色环者为靛基质试验阳性 大肠埃希菌 无红色环者为阴性 伤寒沙门菌 19 Indol实验 生化反应 Indol实验 20 2 细菌的代谢产物观察 2 细菌对氨基酸分解产物观察硫化氢试验 将细菌接种于含有硫酸亚铁或醋酸铅的培养基 如双糖培养基 中 若细菌分解培养基中含硫的氨基酸产生硫化氢 硫化氢可与硫酸亚铁或醋酸铅反应 生成黑色的硫化铁或硫化铅沉淀 为硫化氢试验阳性 乙型副伤寒沙门菌 若细菌不能分解含硫的氨基酸则无黑色沉淀形成 为硫化氢试验