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3生化教案范文 第二章临床生化检验第一节检验流程及相关重点知识参考书本次培训班教材，教学方式示教、操作、提问、讲解等。 总学时90min 一、分析前（20m）（一）、标本采集与送检（参考书籍检验本科教材临床检验基础） 1、标本管（分离胶）的选择真空采血管一种真空负压的采血管，不同类别根据帽子的颜色不同来进行区分。 真空采血管的选择与用途生化检验尽可能选用质量较好的分离胶管。 分离胶是具有触变性的胶体，气密性好，比重为1.0451.050之间，位于血清与血细胞比重之间（血清比重为1.0261.031，血细胞比重1.0901.095）。 标本离心后分离胶将血清与血细胞分隔开，大大减少了血细胞与血清的接触时间，从而避免了离体后细胞内外一些成分浓度差而相互渗透导致的分析前误差。 其优点是可快速分离血清、防止血细胞内容物释放对生化检验结果的影响，同时可直接上机检测，省去血清分杯的繁琐工作、减少操作错误与检测误差、降低耗材成本等。 一次多管采血顺序 2、及时送检血标本尽可能在采血后一小时内分离血清，否则会引起血糖分解及细胞内成分释放（如K）而影响检测结果。 （二）、标本接受与处理 1、样本条码与双工双工是指通信允许数据在两个方向上同时传输，它在能力上相当于两个单工通信方式的结合。 是通讯传输的一个术语。 相对的单工就是在只允许甲方向乙方传送信息，而乙方不能向甲方传送。 双工的优点是省却手工输入待测项目到生化仪上的麻烦，这对于检验科标本量相对比较多的生化工作来说，可以大大减轻工作量，减少或避免项目输入错误或漏检的麻烦。 采用机器读取试管条码来读取项目的方式，也可让检验项目直接从LIS系统发送到生化仪（同时发送标本编号与仪器架号相对应），仪器结果出来后又会以同样的对应号发送回LIS上，就不需要读取条形码也不存在输错项目或漏检项目的问题。 实际工作中由于机器对于条码的清晰度及粘贴位置的好坏提出很高的要求，很多时候会没法读取条码。 有些条码系统在采血的时候就已经产生了该标本相对应的小组编号，如今天第一个生化病人的标本就自动在条码上产生了类似“生化1号”的字样，LIS的各个小组里也就有了该1号标本的病人信息和检验项目的信息，这样已经采了多少血各检验小组可以实时查看，不会出现标本丢失都不知道的情况。 此外，如果机器有一个结果没有传送回LIS，该标本就无法通过审核并打印，同时发出提示信息，这样就避免了因各种疏忽而导致项目漏检的情况发生，是一种非常高效的方式。 2、标本分离样本量、标本放置时间与孵育、离心转速与时间、高凝标本处理 3、标本拒收对不符合检验要求的样本要及时登记并联系临床科室。 （三）样本保存血清标本一般48可保存7天（加盖），未加盖标本48可保存72小时。 （四）生物安全 二、分析中（30m）（一）电源配备UPS（1小时）（二）仪器清洗用水去离子水（合格标准电阻?10m?.cm）。 （三）分析参数设置（参考书籍城乡对口支援实习指导） 1、方法（EP/RATE） 2、校准（方法、时间） 3、试剂（R 1、R2） 4、波长多采用双波长以去除标本内源性物质（如脂血、溶血、黄疸）等干扰。 5、线性范围与复查 6、反应方向（四）检测系统建立与检测性能评估（参考书籍冯仁丰主编临床检验管理技术基础）（五）校准校准品选择与定值、校准品使用、校准频率，校准方法 1、校准品选择与定值校准物的选择尽可能选择配套仪器/试剂厂家校准品，非配套校准品应选择人血清为基质，其定值应与所选试剂盒检测方法一致（校准品定值随方法而异），最好与标准检测系统进行比对。 2、校准频率校准及校准确认时间至少每6个月一次以及发生以下任一个情况进行了主要的预防性保养、或调换了关键的零部件，可能会影响检测的性能。 更换试剂批号。 除非实验室能核实，试剂批号的改变不影响报告患者检测结果的范围，室内质控也不受试剂批号改变的任何影响。 室内质控出现了不寻常的趋势或漂移；或超出了实验室可接受限。 应注意的是不能由用户校准、以因子校准的检测系统，实验室对校准的核实负有责任。 （六）、室内质控质控品选择与定值、质控品使用、质控频率、质控图分析与失控处理（参考书籍冯仁峰主编临床检验管理技术基础或王治国主编临床检验质量控制技术） 1、质量分析目标的确立一般应根据临床要求、当前检测技术水平、行业要求及实验室条件确定质量分析目标，即总误差（TEa%），可选用卫生部临床检验中心室间质评标准作为分析目标，允许的不精密度（cv%）应小于TEa%/3或采用6（SIigma）规则进行评估。 卫生部临床检验中心室间质评质量标准 2、质控品的使用 3、质控规范IFCC规定实验室对每项测试实验室最少每天使用1个水平质控品检测1次。 如果每天的患者标本数超过25个，至少检测2个水平的质控品。 若每天的患者标本数超过75个，实验室应当做2次质控，每次检测2个水平。 如果实验室有更大的工作量，则每个分析批都必须带一个质控样本。 实验室应当具备一套程序，以减少在失控情况下报告显著差异或异常的患者检测结果的风险。 首先，一旦触犯质控规则，应当拒绝检测结果，并在问题被纠正且性能经确认合格后复检相关患者样本。 实验室还应当对自上次质控在控之后检测的患者样本结果进行评估。 其次，应当定期审核质控数据以发现检测系统中的趋势性变化，后者可能提示检测系统存在问题。 一旦发现这些趋势性变化，应当采取预防性措施并予以记录。 再者，应当尽可能建立统计学方法（如L-J图）和使用过程控制规则以持续监控检测系统的性能 4、室内质控图的绘制（七）失控处理（八）样本检测 三、分析后（20m）（一）报告单格式及要求特别注意样本说明（二）结果审核与报告质控在控，考虑临床诊断、历史结果，异常结果的复查，标本干扰（溶血、脂血、黄疸、药物、输液、输血、抗凝），临床联系沟通 1、标本状态对检验结果的影响（溶血、黄疸、脂血）标本状态（内源性干扰）干扰检测结果原因主要有以下三个方面待测物质在细胞内浓度明显高于细胞外如K、P、LDH、AST等；细胞内释放的成分可作为待测反应的底物或产物如溶血对CK或CKMB测定的影响可因血清ATP、腺苷激酶（AK）、葡萄糖-6-磷酸（G-6-PD）增高干扰其反应进程使得测定结果偏高；HGB（溶血）、BIL（黄疸）、脂蛋白颗粒（脂血）等由于其光吸收而干扰待测物质光吸收性质。 2、药物对检验结果的影响 3、输液对检验结果的影响输液对检验结果的影响主要是标本稀释使得测定结果偏低，补钾、糖盐水会使血钾、血糖测定结果偏高。 4、抗凝对检验结果的影响抗凝对检验结果的影响主要是螯合类抗凝剂如EDTA或枸橼酸钾对电解质测定结果的影响使得CA、MG等测定结果明显偏低或测不出、K的明显升高、ALP下降等。 5、（免疫）比浊测定中HOOK效应对检验结果的影响 6、酶学测定中底物耗尽对检测结果的影响（三）危急值报告及临床要求设置合理，网络报告或电话报告（四）仪器维护与保养: 1、日保养（样本针、搅拌针、试剂针） 2、周保养 3、月保养（孵育盘、废液管道） 4、仪器校准一年一次第二节案例分析（20m）案例113S分析一水平质控超过3S，为随机误差，报告不可发，重做正常。 案例2:22S分析两水平质控超过2S，为系统误差，重新校准后重做质控正常，原因为残留试剂合并，报告不可发。 案例3漂移与趋势分析结果逐渐下降（上图），原因为干粉质控品复溶后一般稳定48H，未分装冷冻保存，经分装冷冻后结果正常（下图）。 出现类似情况项目常见于对保存温度要求较高项目如酶类特别是CK、CKMB及稳定性较差项目如BIL、DBIL、CO2等。 经分装冷冻保存（-20）即可解决。 1、输液对检验结果的影响输液对检验结果的影响主要是标本稀释使得测定结果偏低及GLU测定结果明显升高。 2、抗凝对检验结果的影响抗凝对检验结果的影响主要是螯合类抗凝剂如EDTA或枸橼酸钾对电解质测定结果的影响使得CA、MG等测定结果明显偏低或测不出及K