人教版选修1 5.1 DNA的粗提取与鉴定 课件（26张）.pptx

课题一dna的粗提取与鉴定 专题五nda和蛋白质技术 基础知识 一 提取dna的方法提取生物大分子的基本思路是什么 dna主要与哪些生物大分子分离 方法1 根据dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同 提取dna 1 dna在0 14mol lnacl溶液中溶解度最低而此时蛋白质的溶解度最高 dna形成沉淀析出 2 dna不溶于酒精 某些蛋白质溶于酒精 将dna与蛋白质进一步分离 小结 粗提取dna的方法 dna溶解性 3 蛋白酶水解蛋白质 对dna没有影响 4 大多数蛋白质不能忍受60 80 c的高温 dna在80 c以上才会变性 蛋白质变性后溶解度降低而产生沉淀 5 洗涤剂瓦解细胞膜 脂质 对dna没有影响 在植物材料中提取dna使用 dna耐受性 二 鉴定提取物 dna的方法 1 dna遇二苯胺 沸水浴 呈蓝色2 甲基绿与dna结合 呈绿色 自主学习 实验思路 一 dna从哪提取 用什么方法破碎细胞而dna不受破坏 二 怎样将dna与细胞中其他生物大分子分离 三 怎样鉴定我们提取的dna dna的粗提取与鉴定的实验设计 1 实验材料的选取 材料 新鲜的鸡血 原则上只要含dna的生物材料都可以 但是选取dna含量相对较高的生物组织 成功率更大 人血红细胞 原因 鸡血细胞核的dna含量丰富 材料易得 鸡血细胞极易吸水胀破 一 dna从哪提取 从鸡血中获取鸡血细胞 2 破碎细胞 获取含dna的滤液 1 破碎动物细胞的方法 2 破碎植物细胞的方法 渗透吸水胀破 洗涤剂 食盐搅拌研磨 洗涤剂 离子去污剂 能溶解细胞膜 利于dna释放食盐 nacl 利于dna的溶解于研磨液中研磨不充分 使细胞核内的dna释放不完全 提取的dna量变少 破碎细胞 获取含dna的滤液 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分 可能有核蛋白 多糖和rna等杂质 二 怎样将dna与细胞中其他生物大分子分离 方案一 调节nacl的浓度 反复地溶解与析出dna 能够除去杂质 原理 高浓度的盐溶液除去高盐中不能溶解的杂质 用低盐浓度使dna析出 除去低盐溶液中的杂质 因此 反复溶解与析出dna 就能除去与dna溶解度不同的多种杂质 去除滤液中的杂质 获取dna的粗提取物 方案二 直接在滤液中加入嫰肉粉 图5 3 反应10 15min 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质 方案三 将滤液放在60 75 的恒温水浴箱中保温10 15min 注意严格控制温度范围 讨论 方案二与方案三的原理有什么不同 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白 从而使提取的dna与蛋白质分开 方案二利用了酶的专一性 方案三利用的是dna和蛋白质对高温耐受性的不同 从而使蛋白质变性 与dna分离 方案三利用了dna的稳定性 白色丝状物 2mol lnacl 4ml二苯胺 实验组 水浴加热 蓝色 等量2mol lnacl 4ml二苯胺 水浴加热 对照组 无蓝色 三 怎样鉴定我们提取的dna 答 整个实验共 两次蒸馏水 三次过滤 两次析出 六次搅拌 讨论 两次蒸馏水 第一次 细胞吸水胀破第二次 使dna黏稠物析出 1 此实验过程中有几次使用蒸馏水 几次过滤 几次析出 几次搅拌 分别在哪一步 三次过滤 第一次 dna存在于滤液里第二次 dna被留在纱布上第三次 dna存在于滤液里 两次析出 第一次 用0 14mol l的naci溶 第二次 用冷却的95 的酒精 六次搅拌 朝一个方向搅拌 搅动轻缓 1 在制备鸡血细胞液的过程中 加入柠檬酸钠的目的是 a 防止凝血b 加快dna析出c 加快dna溶解d 加速凝血 随堂练习 2 dna的溶解度最低时 nacl的物质的量浓度为 a 2mol lb 0 1mol lc 0 14mol ld 0 015mol l 3 在向溶解dna的nacl溶液中 不断加入蒸馏水的目的是 a 加快dna溶解的速度b 加快溶解杂质的速度c 减小dna的溶解度 加快dna析出d 减小杂质的溶解度 加快杂质的析出 4 向溶有dna的2mol l的nacl溶液中不断加入蒸馏水 在这个过程中dna的溶解度变化情况分别是 a 减