马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制

实验一马铃薯葡萄糖琼脂 PDA 培养基配制 一 食用菌菌种种类人工培育的菌种有母种 原种和栽培种之分 1 母种 一级菌种 用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种 2 原种 二级菌种 把母种扩大到木屑 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种 3 栽培种 三级菌种 由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种 4 菌种 实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体 二 食用菌的制种程序 组织分离 接种 母种 一级 接种 原种 二级 接种 栽培种 三级 种菇 孢子分离 经过这样三级培养 食用菌菌丝数量大大增加 一般1支试管菌种可繁殖4 6瓶原种 每瓶原种又可扩大繁殖60 100瓶栽培种 培养 培养 母种 原种和栽培种 三 菌种生产常用的设备和用具 1 接种设备 接种室 接种箱 超净工作台 超净工作台 2 灭菌设备 1 手提式 容量小 适于斜面试管及玻璃器皿等 2 立式 容量大 投资大 3 卧式 容量大 投资大 4 家用24或26cm压力锅 母种 原种培养基 高压蒸气灭菌锅 优点 省时 省燃料 效果好 2 3 一般在菌种场或研究所应用 三 菌种生产常用的设备和用具 灭菌设备 高压蒸气灭菌锅 2 灭菌设备 常压灭菌锅 目前农村生产栽培种的必备设备 实际上是一种大型蒸笼式煮灶 底部为铸铁大锅 上部为圆形木桶 桶内装数层供放培养基的格架 桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈 由于锅内温度最高是100 所以灭菌时间需维持10 12h 才能达到灭菌效果 三 菌种生产常用的设备和用具 培养室 生化培养箱 3 培养设备 三 菌种生产常用的设备和用具 4 培养菌种的容器 母种 试管 常用规格20 180 200mm 18 180mm等 规格有 12 15 30 35cm 17 35 45cm 三 菌种生产常用的设备和用具 菌种瓶 5 接种工具 移植菌种于培养基上的工具称接种工具 主要有以下几种 接种针 环 刀 钩 铲 锄 枪等 三 菌种生产常用的设备和用具 70 酒精 一般用于手 种菇表面消毒 0 1 升汞 常用于玻璃器皿 非金属器械及种菇表面消毒 0 1 KMnO4 一般用于用具 器皿消毒 6 常用的消毒药品 三 菌种生产常用的设备和用具 5 石炭酸 喷洒墙壁 地面及擦洗桌面等 也可用来苏尔代替 2 来苏尔 新洁尔灭 用法同上 甲醛 福尔马林 用于菇房和接种箱等空气消毒 方法 关闭门窗消毒 自行气化 用量 10ml甲醛 5gKMnO4 立方米 6 常用的消毒药品 三 菌种生产常用的设备和用具 四 母种生产技术 食用菌母种培养基的种类繁多 由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同 所以 在培养不同食用菌母种时 应选择适宜该菌种的培养基 母种培养基要求营养丰富 完全 氮源 维生素的比例应高 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 一 母种培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 PDA 马铃薯20g 葡萄糖 或蔗糖 2g 琼脂2g H2O100mL pH6 5 适用于一般食用菌母种分离与培养 但草菇 猴头菌等在此培养基上生长不良 四 母种生产技术 综合马铃薯培养基马铃薯200g 葡萄糖 或蔗糖 20g KH2PO42g MgSO40 5g 维生素B110mg 琼脂20g H2O1000ml pH自然 适合培养草菇 猴头菌 灵芝及各种食用菌菌种分离 保藏 四 母种生产技术 胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g 葡萄糖 或蔗糖 18 20g 琼脂20g H2O1000ml pH自然 四 母种生产技术 PDA培养基配制方法马铃薯 去皮 去芽眼 切成片 玉米大小 称取20g 70mLH2O 煮沸15 20min 双层纱布过滤 取滤液并补足100mL 琼脂2g 熔化 葡萄糖2g 分装试管 不要倒到试管壁上 塞上棉塞 捆扎 灭菌 高压蒸气灭菌15 30min 制成斜面 检查灭菌效果 即28 30 培养2 3