第8章杂环类药物分析2

第五节苯并二氮杂卓类药物的分析 环庚三烯 卓 硝西泮 氯硝西泮 奥沙西泮 盐酸氟西泮 艾司唑仑 阿普唑仑 一 结构与性质1 苯并二氮杂卓母核弱碱性 UV2 结构中的环一般比较稳定 但在酸性溶液中可水解 形成相应的二苯甲酮衍生物 二 鉴别试验 一 化学鉴别1 沉淀反应氯氮卓或阿普唑仑的盐酸溶液遇碘化铋钾成色 氯氮卓ChP 2000 鉴别 2 取本品约10mg 加盐酸溶液 9 1000 10ml溶解后 加碘化铋钾试液1滴 即生成橙红色沉淀 阿普唑仑ChP 2000 鉴别 1 取本品约5mg 加盐酸溶液 9 1000 2ml溶解后 分为两份 一份加硅钨酸试液1滴 即生成白色沉淀 另一份加碘化铋钾试液1滴 即生成橙红色沉淀 2 水解后重氮化 偶合反应水解后成芳伯胺的反应氯氮卓 艾司唑仑 奥沙西泮氯氮卓ChP 2000 鉴别 1 取本品约10mg 加盐酸溶液 1 2 15ml 缓缓煮沸15分钟 放冷 加亚硝酸钠和碱性 奈酚 溶液显芳香第一胺类 芳伯胺 的鉴别反应 成橙红色沉淀 附录 3 硫酸 荧光反应地西泮ChP 2000 鉴别 1 取本品约10mg 加硫酸3ml 振摇使溶解 在紫外灯 365nm 下检视 显黄绿色荧光 氯氮卓 黄色艾司唑仑 亮绿色硝西泮 淡蓝色 4 分解产物的反应氯 地西泮与三唑仑ChP 2000 鉴别 2 取本品20mg 用氧瓶燃烧法 附录 C 进行有机破坏 以5 氢氧化钠溶液5ml为吸收液 燃烧完全后 用稀硝酸酸化 并缓缓煮沸2分钟 溶液显氯化物的鉴别反应 附录 二 UV和IR 三 TLC药物发展快 品种不断增多 TLC方法比较适合 1常用5种 稀硫酸喷雾 紫外灯检视荧光 2酸水解产物的TLC法此类药物有的经酸水解可产生二苯甲酮衍生物 有的不产生 可鉴别 二苯甲酮衍生物对照品的制备 取本类药物25mg 溶于盐酸 置沸水中1h 用氢氧化钠调pH10 氯仿提 水洗 无水硫酸钠干燥 蒸去溶剂 TLC法此类药物溶于甲醇 点样 加点硫酸液 盖上玻璃烘 水解 滴加氨水 空气吹干 紫外光检测 三 特殊杂质的检查 一 有关物质的检查1 地西泮中有关物质的检查地西泮的原料及片剂中可能引入N 去甲基苯甲二氮卓 TLC高低浓度对比法 供试品溶液 取本品 加丙酮100mg ml溶液 对照品 0 3mg ml乙酸乙酯 己烷展开 供试品的杂质斑点与主斑点比较不得更深 2 氯氮卓中有关物质的检查USP 24 TLC杂质对照品法 高低浓度对比法分解产物氨基物 2 氨基 5 氯 二苯甲酮 结构式参考P186图 含量不得超过0 01 中间体氧化物 7 氯 1 3 二氢 5 苯基 2H 1 4 苯并二氮卓 2 酮 4 氧化物 结构式参考P186图 含量不得超过0 1 检查方法 加丙酮振摇 取上清 TLC 与对照品比对 斑点不得更大更深 3 氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法 二 降解产物的检查地西泮注射液分解产生2 甲氨基 5 氯二苯甲酮HPLC主成分自身对照法 第六节 含量测定一非水溶液滴定法特别是对弱碱性药物及其盐的含量测定 由于多为弱减 在水溶液中用标准酸直接滴定没有明显的突跃 而冰醋酸可以使碱性增强 使滴定顺利进行 应用实力之一硫酸盐类药物测定 P191 二元酸 再水溶液中完成二次解离 但在非水溶液中只作一次解离 在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定只到硫酸氢盐为止 硫酸阿托品的测定 只举一个例子 阿托品是碱性较强的一元碱 测定方法 0 5g 称定 加冰醋酸与醋酐各10ml溶解 加结晶紫1 2滴 用高氯酸滴定液 0 1mol l 至溶液显纯蓝 空白校正 1ml相当于67 68mg的硫酸阿托品 二铈量法是常用的氧化还原的方法之一 硝苯地平和吩噻嗪类可采用 利用这些药物的还原性 在酸性介质中用硫酸铈滴定 硝苯地平用邻二氮菲指示终点 吩噻嗪类用药物的自身变化指示终点 自身指示终点或电位法 永停法指示终点 一 硝苯地平的测定方法 取本品0 4g 称定 加无水乙醇50ml 微热溶解 加高氯酸溶液 邻二氮菲指示液3滴 用硫酸铈滴定 至橙红色消失 每1ml硫酸铈相当于17 32mg的硝苯地平 二 吩噻嗪类药物的测定原理 滴定开始 先失去一个电子形成红色自由离子 达到化学计量点时 再失去一个 红色消退 方法 取本品0 2g 称定 加水20ml与稀硫酸10ml溶解 用硫酸铈滴定 至红色消失 每1ml硫酸铈相当于17 77mg 方法 盐酸氯丙嗪片的测定取本品20片 称定 严细 称出适量 相当于盐酸氯丙嗪0 2g 加水20ml与稀硫酸10ml溶解 按上述方法测定 优点 硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位 且为一价还原 不存在对环取代基的副反应 专属性高 本法既可用于原料 亦可用于片剂的测定 二 钯离子比色法 反应在pH2 0 1的缓冲液中进行 测定方法 盐酸氯丙嗪含量测定 取氯化钯溶液 光比色 优点 钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定 四紫外分光光度法 一 直接分光光度法不需提取分离 溶于适当溶剂中即可测定 1奥沙西泮测定取本品15mg 精密称定 置200ml量瓶中 加乙醇溶后 温热 定溶 取5ml 稀释至100ml 299nm 测 另取对照品15ml 测定 计算 2盐酸异丙嗪片剂测定盐酸异丙嗪片剂10片 去糖衣 称定严细 称取适量 相当于盐酸异丙嗪12 5g 在200ml量瓶中 加盐酸适量 溶解后至刻度 片剂测定波长为249nm 吸收系数为910 3盐酸异丙嗪注射液测定 1 测定波长选择为了消除抗氧剂维生素C max243nm 对测定的干扰 测定波长由249改为299nm吸收系数为108 同理 盐酸氯丙嗪片剂测定波长为254nm 吸收系数为915 注射液测定波长改为306nm 吸收系数为115 2 测定方法 取本品2ml 100ml容量瓶稀释 精取10ml 100ml容量瓶稀释 299下测 按标准吸收系数为108计算 二 萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液的含量测定 除上述采用选择299nm波长 直接法消除处方中维生素C的干扰外 还可用萃取后测定法 2 测定方法 取本品适量 相当于盐酸氯丙嗪100ml 盐酸稀释至500ml 加氨水 用乙醚提取 再用盐酸液提乙醚 并测定 254nm 按标准吸收系数为915计算 三 萃取 双波长分光光度法 1 原理在待测组分 a 的最大吸收波长 测定波长 1 处测定待测组分和干扰组分 b 吸收度的总和 另选一适当波长 参比波长 2 测定吸收度 并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等 即 而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大 2 定量依据样品在二波长下吸收度差值 A 即 吸收度差值 A 仅与待测组分的浓度有关 而与干扰组分无关 干扰组分的干扰被消除 3 必要条件 干扰组分在两个波长处吸收度相等 待测组分在两个波长处吸收度相差足够大 4 应用 萃取除去抗氧剂的干扰 双波长分光光度法测定排除氧化产物的干扰测定波长254nm参比波长277nm对照法定量 2 测定方法 取本品适量 相当于盐酸氯丙嗪100ml 盐酸稀释至500ml 加氨水 用乙醚提取 再用盐酸液提乙醚 并测定 254nm 按标准吸收系数为915计算 四 二阶导数分光光度法盐酸氯丙嗪注射液抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线 不干扰盐酸氯丙嗪的测定P197 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266nm 谷254nm距离 标准曲线法定量 五气相色谱法 六液相色谱法 HPLC 1 地西泮注射液的HPLC法内标法加校正因子定量2 三唑仑的HPLC法内标法加校正因子定量 复习题 盐酸氯丙嗪的含量测定方法有A 中和法B 非水滴定法C 紫外法D 旋光法E 铈量法 中国药典 1995年版 对盐酸异丙嗪注射液的含量测定 选用299nm波长处测定 其原因是A 299nm处是它的最大吸收波长B 为了排除其氧化产物的干扰C 为了排除抗氧剂的干扰D 在299nm处 它的吸收系数最大E 在其他波长处 因其无明显吸收 有氧化产物存在时 吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为A 非水溶液滴定法B 紫外分光光度法C 荧光分光光度法D 钯离子比色法E pH指示剂吸收度比值法 中国药典 2000年版 中地西泮原料药中2 甲氨基 5 氯二苯酮的检查法为A TLCB HPLCC GCD 沉淀法E 显色法 检查盐酸氯丙嗪中 有关物质 时 采用的对照溶液为A 杂质的标准溶液B 标准 有关物质 溶液C 供试品溶液D 供试液的稀释溶液E 对照溶液 某药物于酸性溶液中 加硫酸铈试液则产生红色 继续滴加硫酸铈试液 红色由浅变深 继由深又变浅直至红色消失 该药物应为A 雌二醇B 氯丙嗪C 诺氟沙星D 硫酸镁E 苯巴比妥钠 吩噻嗪类药物与钯离子反应 需在以下哪种酸性条件下进行A pH4B pH3 3 5C pH2 0 1D pH1E pH5 B 某药物经酸水解后呈茚三酮反应 溶液显紫色 该药为A 氯氮卓B 地西泮C 盐酸普鲁卡因D 阿司匹林E 尼可刹米 某药物经酸水解后可用重氮化 偶合反应鉴别 此药物是A 盐酸氯丙嗪B 氯氮卓C 地西泮D 醋酸氢化可的松E 维生素C 能和硫酸铜及硫氰酸铵反应 生成草绿色沉淀的药物为A 对乙酰氨基酚B 异烟肼C 尼可刹米D 地西泮E 维生素E 经高锰酸钾或溴水氧化后 可发生开环形成戊烯二醛反应的药物为A 葡萄糖B 皮质酮C 维生素CD 土酶素E 异烟肼 溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是A 属于氧化还原滴定法B lmol溴酸钾相当于3 2mol的异烟肼C 采用永停滴定法指示终点D 在HCl酸性条件下进行滴定E 还可以用于异烟肼制剂的含量测定 异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的降解反应而引入哪种杂质A 间氨基酚B 水杨酸C 对氨基苯甲酸D 游离肼E 其他甾体 可用于异烟肼鉴别的反应有A 与氨制硝酸银的反应B 戊烯二醛反应C 坂口反应D 硫色素反应E 二硝基氯苯反应 下列药物中 哪一个药物加氨制硝酸银能产生银镜反应A 地西泮B 阿司匹林C 异烟肼D 苯佐卡因E 苯巴比妥 用于吡啶类药物鉴别的开环反应有A 茚三酮反应B 戊烯二醛反应C 坂口反应D 硫色素反应E 二硝基氯苯反应 ChP 2000 异烟肼的测定方法为A 溴酸钾滴定法B 溴量法C TLCD NaNO2E 比色法 能和2 4一二硝基氯苯发生呈色反应的药物是A 异烟腙B 硫酸奎宁C 阿莫西林D 四环素E 炔孕酮 参考素材 比色法 一 酸性染料比色法 三 比色法1 地西泮经水解后氯仿提取液的比色测定法 2 地西泮水解产物甘氨酸与茚三酮反应后比色测定法 3 氯氮卓经酸水解后的重氮化偶合比色测定法 2 弱酸性非水酸量法鉴别或氧化还原滴定法含量测定鉴别或比色法含量测定酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼 可用于吡啶类药物的鉴别 3 丙硫异烟胺 位上硫代甲酰胺基易水解 加酸水解后 释放出硫化氢 能使湿润的醋酸铅试纸显黑色 故可以此进行鉴别 3 UV和IR 1 峰面积归一化法 取一定量供试品溶液进样 测定各杂质及药物的峰面积 计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率 不能超过限量 注意溶剂峰不应计算在总峰面积内 优点 不需杂质对照品 简便易行 缺点 检测波长处 各杂质和药物的吸收强度可能有差异 控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量 准确度差 2 主成分自身对照法 杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用 方法 分别进样 测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和 与对照溶液主成分峰面积比较 控制供试品中杂质的量 缺点 检测波长处 各杂质和药物的吸收强度可能有差异 准确度差 优点 不需杂质对照品 可同时控制各个杂质及其总量限度 3 内标法测定供试品中杂质的总量限度 方法 供试品 供试品溶液1图1供试品 内标 供试品溶液2图2 判断 若图1无与内标峰保留时间相同的杂质峰 则图2中各杂质峰面积之和应小于内标物质峰面积 溶剂峰不计在内 若图1有与内标峰保留时间相同的杂质峰 则将图2上的内标峰面积减去图1中此杂质峰面积 得内标物质峰的校正面积 图2中各杂质峰面积加上图1此杂质峰面积 得各杂质峰的校正总面积 各杂质峰校正总面积应小于内标物质峰的校正面积 4 内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量 准确测定杂质含量 方法 内标 杂质对照品 溶液 进样 测定 计算校正因子 供试品 内标 供试品溶液 进样 测定杂质和内标峰面积或峰高 计算杂质量 5 外标法测定供试品中某个杂质的量 供试品 供试品溶液 杂质对照品 对照品溶液进样 测定 计算杂质的含量 缺点 不易准确控制进样量 宜用定量环进样 3 水解后呈茚三酮反应地西泮 2 丙硫异烟胺ChP 2000 鉴别 1 取本品约50mg 加盐酸溶液 9 100 3ml 缓缓加热 发生的气体可使湿润的醋酸铅试纸显黑色 四 含量测定 一 异烟肼的含量测定 1 氧化还原滴定法 1 溴酸钾法ChP 2000 原料及制剂 反应摩尔比3 2 取本品约0 2g 精密称定 置100ml量瓶中 加水使溶解并稀释至刻度 摇匀 精密量取25m1 加水50m1 盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴 用溴酸钾滴定液 0 01667mo1 L 缓缓滴定 温度保持在18 25 至粉红色消失 每1ml的溴酸钾滴定液 0 01667mol L 相当于3 429mg的C6H7N3O 2 溴量法反应摩尔比1 4 3 剩余碘量法反应摩尔比1 4 2 非水溶液滴定法 1 非水酸量法 2 非水