Agilent-7890-A-5975C气相色谱质谱联用仪操作规程

Agilent 7890 A 5975C 气相色谱质谱联用仪操作规程气相色谱质谱联用仪操作规程 1 开机开机 1 打开载气钢瓶控制阀 设置分压阀压力至 0 5Mpa 2 打开计算机 登录进入 Windows XP 系统 初次开机时使用 5975C 的小键盘 LCP 输入 IP 地址和子网掩码 并使用新地址重起 否则安装并运行 Bootp Service 3 依次打开 7890AGC 5975MSD 电源 若 MSD 真空腔内已无负压则应在打开 MSD 电源 的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢 等待仪器自检完毕 4 桌面双击 GC MS 图标 进入 MSD 化学工作站 5 在上图仪器控制界面下 单击视图菜单 选择调谐及真空控制调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面 在真空真空菜单中选择真空状态真空状态 观察真空泵运行状态 此仪器真空泵配置为分子涡轮泵 状 态显示涡轮泵转速涡轮泵转速应很快达到 100 否则 说明系统有漏气 应检查侧板是否 压正 放空阀是否拧紧 柱子是否接好 2 调谐调谐 调谐应在仪器至少开机 2 个小时后方可进行 若仪器长时间未开机为得到好的调谐结果将 时间延长至 4 小时 1 首先确认打印机已连好并处于联机状态 2 在操作系统桌面双击 GC MS 图标进入工作站系统 3 在上图仪器控制界面下 单击视图菜单 选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面 4 单击调谐菜单 选择自动调谐调谐 MSD 进行自动调谐 调谐结果自动打印 5 如果要手动保存或另存调谐参数 将调谐文件保存到 atune u 中 6 然后点击视图然后选择仪器控制返回到仪器控制界面 注意 自动调谐文件名为 ATUNE U 标准谱图调谐文件名为 STUNE U 其余调谐方式有各自的文件名 3 样品测定样品测定 3 1 方法建立方法建立 1 7890A 配置编辑 点击仪器仪器菜单 选择编辑 GC 配置配置进入画面 在连接画面下 输入 GC Name GC 7890A 可在 Notes 处输入 7890A 的配置 写 7890A GC with 5975C MSD 点击获得获得 GC 配置配置按钮获取 7890A 的配置 2 柱模式设定 点击图标 进入柱模式设定画面 在画面中 点击鼠标右键 选择从从 GC 下载方法下载方法 再用同样的方法选择从从 GC 上传方法上传方法 点击 1 处进行柱 1 设定 然后选中 On 左边方框 选 择控制模式 流速流速或压力压力 3 分流不分流进样口参数设定 点击图标 进入进样口设定画面 点击 SSL 后按钮进入毛细柱进样口设定画面 点击模式模式右方的下拉式箭头 选择进样方式为不分流方式不分流方式 分流比为 50 1 在空白框内输 入进样口的温度为 220 然后选中左边的所有方框 选择隔垫吹扫流量模式标准标准 输入隔垫吹扫流量为 3ml min 对于特殊应用亦可选择可切可切 换换的 进行关闭 4 柱温箱温度参数设定 点击图标 进入柱温参数设定 选中柱箱温度为开柱箱温度为开左边的方框 输入柱子的平衡时间 为 0 25 分钟 5 数据采集方法编辑 从方法方法菜单中选择编辑完整方法编辑完整方法项 选中除数据分析外数据分析外的三项 点击确定确定 编辑关于该方 法的注释 然后点击确定 确定 3 1 2 编辑扫描方式质谱参数编辑扫描方式质谱参数 1 点击图标编辑溶剂延迟时间以保护灯丝 调整倍增器电压模式 此仪器选用增益 系数 选择要使用的数据采集模式 如全扫描 选择离子扫描等 2 编辑 SIM 方式参数点击参数参数编辑选择离子参数 驻留时间和分辨率参数适用于组里的 每一个离子 在驻留列中输入的时间是消耗在选择离子的采样时间 它的缺省值是 100 毫 秒 它适用于在一般毛细管 GC 峰中选择 2 3 个离子的情况 如果多于 3 个离子 使用短一 点的时间 如 30 或 50 毫秒 加入所选离子后点击添加新组 编辑完 SIM 参数后关闭 3 2 采集数据采集数据 1 点击 GC MS 图标 在方法方法文件夹中选择所要的方法 2 选好方法后 点击图标 依次输入文件名 操作者 样品名等相关信息 完成 后按确定确定键 待仪器准备好后进样的同时按 GC 面板上的 Start 键 以完成数据的采集 3 当工作站询问是否取消溶剂延迟时 回答 NO 或不选择 如果回答 YES 则质谱开始采集 容易损坏灯丝 3 3 数据分析数据分析 1 点击 GC MS 数据分析数据分析图标 点击下图中文件文件调入数据文件 2 在全扫描方法中要得到某化合物的名称 先右键双击此峰的峰高 然后在右键双击峰附 近基线的位置得到本底的质谱图 然后在菜单文件文件下选择背景扣除背景扣除即可得到扣除本底后该 化合物的质谱图 最后右键双击该质谱图 便得到此化合物的名称 3 用鼠标右键在目标化合物 TIC 谱图区域内拖拽可得到该化合物在所选时间范围内的平均 质谱图 右键双击则得到单点的质谱图 4 在选择离子扫描方法中不需要背景扣除背景扣除操作 3 3 定量定量 定量是通过将来自未知量化合物的响应与已测定化合物的响应进行比较来进行的 手动设置定量数据库 1 选择校正 设置定量访问定量数据库全局设置页 2 手动检查由测定样品数据文件生成的色谱图 3 通过单击色谱图中化合物的峰来分别选择每种化合物 4 在显示的谱图中选择目标离子 5 选择此化合物的限定离子 6 给化合物命名 如果此化合物是内标 则应标识 7 将此化合物的谱图保存至定量数据库中 8 对希望添加到定量数据库的每种化合物重复步骤 2 至 7 9 如果已添加完需要的所有化合物 则选择校正选择校正 编辑化合物编辑化合物以查看完整列表 4 关机关机 在操作系统桌面双击 GC MS 图标进入工作站系统进入调谐和真空控制界面调谐和真空控制界面选择放空 放空 在跳 出的画面中点击确定确定进入放空程序 本仪器采用的是涡轮泵系统 需要等到涡轮泵转速降至 10 以下 同时离子源和四极杆温 度降至 100 以下 大概 40 分钟后退出工作站软件 并依次关闭 MSD GC 电源 最后关 掉载气 高效液相色谱仪操作步骤高效液相色谱仪操作步骤 1 过滤流动相 根据需要选择不同的滤膜 2 对抽滤后的流动相进行超声脱气 10 20 分钟 3 打开 HPLC 工作站 包括计算机软件和色谱仪 连接好流动相管道 连接检测系统 4 进入 HPLC 控制界面主菜单 点击 manual 进入手动菜单 5 有一段时间没用 或者换了新的流动相 需要先冲洗泵和进样阀 冲洗泵 直接在泵 的出水口 用针头抽取 冲洗进样阀 需要在 manual 菜单下 先点击 purge 再点击 start 冲洗时速度不要超过 10 ml min 6 调节流量 初次使用新的流动相 可以先试一下压力 流速越大 压力越大 一般不 要超过 2000 点击 injure 选用合适的流速 点击 on 走基线 观察基线的情况 7 设计走样方法 点击 file 选取 select users and methods 可以选取现有的各种走样方 法 若需建立一个新的方法 点击 new method 选取需要的配件 包括进样阀 泵 检测 器等 根据需要而不同 选完后 点击 protocol 一个完整的走样方法需要包括 a 进样前 的稳流 一般 2 5 分钟 b 基线归零 c 进样阀的 loading inject 转换 d 走样时间 随不同 的样品而不同 8 进样和进样后操作 选定走样方法 点击 start 进样 所有的样品均需过滤 方法走 完后 点击 postrun 可记录数据和做标记等 全部样品走完后 再用上面的方法走一段基 线 洗掉剩余物 9 关机时 先关计算机 再关液相色谱 10 填写登记本 由负责人签字 注意事项 注意事项 1 泵正常工作时 在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的 当然在换流动相时压 力变化是正常的 正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的 只有 更换色谱柱 如果正常情况下压力突然降低有可能是 1 接头处有漏液的地方 采取的 方法是有滤纸检查 如有漏液的地方用扳手拧紧即可 如果没有漏液则可能是 2 白色的 管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去 采取的方法是排气泡排气时 先 STOP 停泵 打开排气阀 按 PURGE 快冲 键 等气泡排完后先 STOP 停泵 拧紧排气阀 其 先后步骤不要搞反了 2 泵正常工作时最高压力最好不要超过 200KG 所以打开泵以后可以将泵的最大压力调到 200KG 这样如果压力超过上限则会自动报警停机 流速最好不用超过 1ML MIN 如果使 用时压力超过 200KG 建议将流速调低点以降低压力 在色谱柱正常的情况下 如果是因 为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换色谱柱 因为色谱属于耗材长时间使用就需 要更换 更换的主要依据色谱柱出峰不正常或者柱压力过高 3 泵正常工作时平均每 15 天左右向注油孔加润滑油 2 3 滴 4 流动相里面如果有盐或酸类 做完实验后要先用 95 二次蒸馏水与 5 甲醇洗色谱柱 40 分钟左右 然后用纯甲醇洗 30 分钟左右才可以关机 第二天如果继续做实验流动相里面仍 旧有盐或酸类 最好先用 95 二次蒸馏水与 5 甲醇过度 20 分钟 再用流动相 如果流动 相里面只有甲醇 水 乙腈 做完实验后就不用 95 二次蒸馏水 5 甲醇冲洗 可直接用纯 甲醇洗 30 分钟即可关机 5 C18 色谱柱的耐酸 PH 值范围 3