MM_FS_CNJ_0085 出口肉及肉制品中24-滴丁酯残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0085出口 肉 肉制品 2,4-滴丁酯 残留量 气相色谱法 外标法 MM_FS_CNJ_0085 出口肉及肉制品中2,4-滴丁酯残留量检验方法1.适用范围 本方法标准适用于出口猪肉和牛肉中2,4-滴丁酯残留量的检验。2.原理概要 样品中残留的2,4-滴丁酯经石油醚提取，提取液经用乙腈进行液液分配，再经弗罗里硅土柱净化后，用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂 石油醚：经全玻璃装置重蒸馏，收集3060馏分； 乙腈：经全玻璃装置重蒸馏； 乙醚：经全玻璃装置重蒸馏； 正己烷：经全玻璃装置重蒸馏； 无水硫酸钠：650灼烧4h，置于干燥器内备用； 弗罗里硅土：677灼烧2h，用前在130烘5h； 氯化钠溶液：饱和水溶液； 乙腈：经石油醚饱和； 淋洗剂：乙醚-石油醚(694)； 2,4-滴丁酯标准品：纯度99%； 2,4-滴丁酯标准溶液：准确称取适量的2,4-滴丁酯标准品，用正己烷配成浓度为100g/mL的标准储备溶液，根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。3.2.仪器 气相色谱仪：配有电子俘获检测器； 微量注射器：10L； 高速组织捣碎机； 马弗炉； 旋转蒸发器； 布氏漏斗：内径12cm； 无水硫酸钠柱：200mm25mm(id)，玻璃柱，内装10cm高的无水硫酸钠； 弗罗里硅土柱：200mm22mm(id)，玻璃柱，内装10cm弗罗里硅土，顶部装1cm无水硫酸钠； k-D浓缩器。4.试样的抽取与制备4.1.检验批 以不超过2500件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量批量，件最少抽样数，件1251261005101250102515001550110001710012500204.3.抽样方法 按规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品。总量不少于2kg。放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。 如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者，则可用锋利刀(用酒精灭菌过)在抽出的包件中，每件割取不少于100g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。4.4.试样制备 从所取混合原始样中取出有代表性样品约1kg，取可食部分，经组织捣碎机捣碎均匀，均分成两份，装入洁净容器内，作为试样。密封，标明标记。4.5.试样保存 将试样于18以下冷冻保存。注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.1.提取 准确称取约10g试样(脂肪含量3g)(精确至0.1g)，置于高速组织捣碎机中，加20g无水硫酸钠，混匀。再加50mL石油醚，高速捣碎2min。石油醚上清液经垫有两层滤纸的布氏漏斗抽滤，滤液转入100mL容量瓶中。残渣继续用220mL石油醚提取，每次捣碎3min，过滤。合并滤液于上述容量瓶中，用石油醚定容，混匀后，于18冰箱中放置过夜。 准确移取10mL上述溶液于一125mL分液漏斗中，加入5mL石油醚和30mL石油醚饱和的乙腈，振荡1min，静置分层。将下层转入已装有650mL水、40mL氯化钠饱和溶液及100mL石油醚的1L分液漏斗中。上层再用330mL石油醚饱和的乙腈提取，合并乙腈提取液。振摇3045s，静置分层。将水层转入另一1L分液漏斗中，水层中加入100mL石油醚，振摇15s，静置分层，弃去水层，合并石油醚层。用2100mL水于分液漏斗中，洗石油醚层，静置分层，弃去水层。石油醚层过无水硫酸钠柱，流出液收集于500mL k-D浓缩器中。用310mL石油醚洗涤分液漏斗及无水硫酸钠柱，洗液并入K-D浓缩器中，在60水浴中浓缩至510mL。5.2.净化 在弗罗里硅土柱中，加入50mL石油醚，调节流速约为5mL/min。待液面降至无水硫酸钠层时，弃去石油醚流出液。将上述浓缩的提取液加入柱中，收集流出液于100mL k-D浓缩器中。用200mL淋洗剂洗脱，收集洗脱液于同一浓缩器中，在水浴上浓缩至干。准确加入1.00mL正己烷，溶解残渣，供气相色谱测定。5.3.测定5.3.1.气相色谱条件色谱柱：HP-17，10m0.53mm(id)，膜厚2.0m。或相当者；色谱柱温度：185；进样口温度：250；检测器温度：300；载气：氮气，纯度99.99%，30mL/min；进样量：1L；进样方式：无分流进样。5.3.2.气相色谱测定 根据样液中2,4-滴丁酯含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中2,4-滴丁酯的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，在上述色谱条件下，2,4-滴丁酯的保留时间约为2.2min。2,4-滴丁酯标准品色谱图见附录A中图A1。5.4.空白试验 除不称取样品外，按上述测定步骤进行。6.结果计算 用色谱数据处理机或按式(1)计算样液中2,4-滴丁酯残留含量： XAcV(1)Asm式中：X试样中2,4-滴丁酯残留含量，mg/kg；A样液中2,4-滴丁酯的峰面积，mm2；As标准工作溶液中2,4-滴丁酯的峰面积，mm2；c标准工作溶液中2,4-滴丁酯的浓度，g/mL；V最终样液体积，mL；m最终样液相当的样品重量，g。注：空白值应从计算结果中扣除。7.低限、回收率的测定7.1.测定低限 本方法的测定低限为0.01mg/kg。7.2.回收率 回收率的实验数据： 猪肉中2,4-滴丁酯添加浓度和回收率数据：添加浓度在0.01mg/kg时，回收率为76.0%；添加浓度在0.05mg/kg时，回收率为83.4%；添加浓度在0.10mg/kg时，回收率