移液器(枪)使用-实验报告-XIANG

Quantitative Biochemical Analysis 一 目的 學習使用 pipetman 的正確方法并瞭解如何校正 可使實驗結果準確性提高 Pipetman 是最常用於 biochemistry 及 molecular biology 實驗的基本必須工具 一 般有 p2 p10 P20 p100 P200 P1000 P5000 P10mL 等規格 不同規格 型號的 pipetman 所及取的體積各有不同 在記錄結果時需注意單位變化 二 原理 Pipetman 是一種取樣量連續可調的精密取液儀器 基本原理是依靠活塞的上下 移動 其活塞移動的距離是由調節輪控制螺杆機構來實現的 推動按鈕帶動推 杆使活塞向下移動 排除了活塞腔內的氣體 鬆手後 活塞在復位彈簧的作用 下恢復其復位 從而完成一次吸液過程 三 材料 藥品 Pipetman tube tip 蒸餾水 蒸餾水 燒杯 精密電子秤 四 步驟 1 分別進行 P20 P200 P1000 的吸取動作和讀取方式 1 将一个 tip 装在 pipetman 上 推到套紧位置以保证气密性 2 转动调节轮 使读数显示为所要取液体的体积 图 1 移液器的使用 3 轻轻按下推动按钮 将推动按钮由位置 0 推到位置 l 4 手握移液器 将吸液尖垂直浸入待取液体中 浸入深度为 2 4mm 5 经 2 3s 后缓慢松开推动按钮 即从推动按钮位置 1 复位到 0 位 完成 吸液过程 停留 1 2s 后将 pipetman 移出液面 6 用纱布或滤纸将粘在 tip 外表面的液体擦掉 注意不要接触到吸液尖头部 的孔表面 7 将 tip 头部放入被分配的容器中 使尖贴着容器的内壁 然后慢慢按下推 动按钮至位置 1 继续按至位置 2 此时液体应全部排净 8 将 tip 口部沿着容器内壁滑动几次 然后移走 pipetman 松开推动按钮 按卸尖按钮推掉 tip 即完成一个完全的操作过程 2 再分別進行校正 先拿取一個 tube 稱重后 將電子秤歸零 3 pipetman P20 P200 P1000 吸取蒸餾水至 tube 中 再放置於電子秤稱重 4 將此時 tube 的重量記錄下來 差值即為稱取的水的體積 可換算 pipetman 所吸取的水的體積 5 重複上述步驟三次 得到三組數據 6 將此三組說句平均后所得的數值對照此款 pipetman 的 Maximum permissible errors 表中的 Gilson 確定此次操作是否在可接受誤差範圍內 7 若超過了誤差範圍 則需進行校正 五 實驗結果 P20 tube 重 g 蒸餾水 tube 重 g 蒸餾水重 g 蒸餾水體積 L 1st1 10431 12430 020 02 2nd1 10671 12720 02050 0205 3rd 1 10891 12870 01980 0198 平 均 1 10663331 1267333330 02010 0201 P200 tube 重 g 蒸餾水 tube 重 g 蒸餾水重 g 蒸餾水體積 L 1st1 10921 31220 2030 203 2nd1 111 31350 20350 2035 3rd1 10441 30780 20340 2034 平 均 1 10786671 3111666670 20330 2033 P1000 tube 重 g 蒸餾水 tube 重 g 蒸餾水重 g 蒸餾水體積 L 1st1 10582 11141 00561 0056 2nd1 11022 11381 00361 0036 3rd1 11672 12331 00661 0066 平 均 1 11092 1161666671 0052666671 005266667 Reference Extent ModelVolume L Maximum Permissible Errors Gilson Accuracy Precision Systematic error L Random error L Min 2 0 10 0 03 5 0 10 0 04 P2010 0 10 0 05 Max20 0 20 0 06 Min 50 0 50 0 20 P200100 0 80 0 25 Max200 1 60 0 30 Min 200 3 0 6 P1000500 4 1 0 Max1000 8 1 5 誤差值與參考範圍對比 Model Reference Extent L Average Error L Conclusion P20 0 200 1accpect P200 1 603 3refuse P1000 85 27accpect 本次實驗的目的是學習 pipetman 使用方法和判斷 pipetman 是否需要校正 我們 通過 tube 裝水前後的質量之差 以差量法為手段 得出 pipetman 吸取最大量程 時候的體積與理論吸取體積的誤差是否在可接受的參考量程之內 來判定此 pipetman 的可用性 1 P20 為例 其平均的誤差值為 0 1 L 小於其可接受誤差為 0 20 L 說明 此 pipetman 不需要校正 2 而 P200 的平均的誤差值為 3 3 L 而可接受誤差為 1 60 L 超過了可接 受誤差的範圍 說明此 pipetman 需要校正 3 P1000 其平均的誤差值為 0 1 L 而可接受誤差為 0 20 L 說明此 pipetman 不需要校正 六 討論 在本次實驗中出現 pipetman 需要校正的結論有一下可能 1 pipetman 確實是自身存在缺陷 需要調節維護 由於使用時間長 使用不 當 或者自身彈簧 密封圈老化的問題的出現 使其準確性下降 2 由於 tip 的質量問題 其密封性 表面材質粗糙度 流線性 口徑大小等 可能影響 pipetman 的取液準確性 3 精密電子秤是未經過準確度驗證的 其可能存在自身的測量誤差 導致差 量法的準確性下降 因為本次實驗是用重量與體積的關係來確定 pipetman 誤差 的 4 個人的操作規範也會對實驗結果造成很大的影響 改進和注意事項 在下次做相同的實驗之前 可先對 tip 精密電子秤進行校準 另外嚴格要求個人操作技術 操作时要慢和稳 吸嘴浸入液体深度要