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文档简介
动物细胞工程 动物细胞工程 动物细胞工程技术与植物细胞工程技术的原理基本相同 常用的技术手段 动物细胞培养 核移植 胚胎移植 单克隆抗体 动物细胞融合 一 动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织 器官 胰蛋白酶 分解弹性纤维 胶原蛋白 10代细胞 传代培养 无限传代 遗传物质改变 遗传物质未改变 动物细胞培养的条件 无菌 无毒的环境培养液和所有培养用具进行无菌处理措施 培养液中加抗生素 定期更换培养液营养糖 氨基酸 无机盐 微量元素 促生长因子 维生素 激素等 和动物血清温度和ph36 5 0 5 7 2 7 4气体环境o2co295 空气5 的co2 思考 2 为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料 1 动物细胞培养液的主要成分是什么 较植物组织培养基有何独特之处 3 为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞 4 动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体 主要成分 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素和动物血清等 独特之处有 1 液体培养基2 成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛 分裂能力强 成块组织不利培养 分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能 动物细胞培养只能使细胞数目增多 不能发育成新的动物个体 动物细胞培养技术的应用 1 获得细胞产物 如蛋白质生物制品 病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体等 2 获得烧伤病人植皮所需的细胞 3 获得细胞用于检测有毒物质 二 核移植技术 克隆羊培育过程 另一头绵羊的子宫 体细胞核移植胚胎细胞核移植 供体细胞培养 m 卵母细胞 减数第二次分裂中期 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 受体细胞激活 完成减数分裂 发育 胚胎移植 思考讨论 p49 动物体细胞核移植技术将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中 使其重组并发育成一个新的胚胎 这个新的胚胎最终发育成动物个体用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 体细胞核移植技术的应用前景畜牧业 医药卫生以及其他领域有着广泛应用前景 1加速家畜遗传改良进程 促进优良畜群繁育2保护濒危物种 增加动物的存活数量3可作为生物反应器 生产医用蛋白克隆动物细胞 组织 器官可作为移植的供体了解胚胎发育及衰老过程 做疾病模型等 体细胞核移植技术存在的问题 胚胎移植 动物幼体产出概率 10 克隆动物存在着健康问题克隆动物的食品安全性问题存在争议p50思考与讨论 二 动物细胞融合 细胞杂交 2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 细胞a 细胞b 杂种细胞 灭活的病毒 物理法化学法 仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒 离心振动电激 聚乙二醇 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 动物细胞的融合与植物细胞之间融合 植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较 细胞膜流动性 种间 属间 科间甚至动植物之间细胞融合都已获得成功 读下面一段文字资料 思考以下问题 长期以来 为了获得抗体 采用的是把某种抗原反复注射到动物体内 然后从动物血清中分离出所需抗体的方法 用这种方法获得的抗体 不仅产量低 而且抗体的特异性差 纯度低 反应不够灵敏 人们发现 在动物发生免疫反应的过程中 体内的b细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体 但是每个b细胞只分泌一种化学性质单一 特异性强的抗体 要想获得大量的单一抗体 必须用单个b细胞进行无性繁殖 即克隆 怎样才能获得单克隆抗体 仅用细胞培养技术可行吗 我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的 有什么方法能使b细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢 单克隆抗体制备过程 细胞融合 筛选 足够数量的 能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体 思考 1 本过程利用了哪些原理 免疫原理 细胞融合原理和动物细胞培养原理 2 为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与b细胞融合 这样融合成的杂交瘤细胞 继承了双亲细胞的遗传物质 不仅具有b细胞分泌抗体的能力 而且还有无限增殖的本领 因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比 单克隆抗体产量高 特异性强 灵敏度高 优越性十分明显 1 作为诊断试剂 单克隆抗体的应用 2 用于治疗疾病和运载药物作为载体 运载抗癌药物 形成 生物导弹 治疗肿瘤 资料 目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体 许多缺乏良好诊断手段的传染病 免疫性疾病 血液病 内分泌疾病和遗传病 用单克隆抗体作为诊断手段 是一个必然趋势 另外 用单克隆抗体做体内诊断 借以鉴别和定位体内 病灶 也引起人们的注意 目前 主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个 一 一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒 一个新细胞 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强 灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法 设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案 制备单克隆抗体 b细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 世界上第一只克隆羊 多莉 的培育过程如图所示 请据图回答 乙 甲 a b c d e f 1 图中的甲为苏格兰绵羊 乙为多莉羊 那么 a和b是通过 分裂形成的 其dna含量是体细胞的 c肯定是 细胞 乙的遗传性状与提供 的绵羊一致 减数 一半 体 细胞核 乙 甲 a b c d e f 2 产生甲和乙的过程分别是 和 3 在形成乙是的过程中 需要将d的细胞核取出 将c细胞核移入d细胞内 此技术叫 所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是 4 绵羊的白色对黑色为显色 若甲是白色绵羊 要判断它是否纯合体 选用与它交配的绵羊最好是 有性生殖 克隆 核移植 卵细胞大 易于操作 卵细胞具有继续分化的潜能 黑毛 乙 甲 a b c d e f 5 在产生多莉羊时 需将e细胞形成的早期胚胎移入另一头母羊 f 子宫里 这种技术在细胞工程中叫 6 继植物组织培养后 克隆绵羊的培育成功
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