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文档简介

专题5 dna和蛋白质技术 课题1 dna的粗提取与鉴定 dna的提取原理 溶解度 耐受性 dna与杂质的 不同 dna与杂质对酶 高温 洗涤剂的 不同 dna粗提取的实验设计 1 材料的选取 选用dna含量相对 的生 物组织 如鸡血 菜花 洋葱等 nacl溶液 nacl溶液 2 破碎细胞 以鸡血为例 鸡血细胞 加蒸馏水 用 搅拌 用 过滤 收集滤液 玻璃棒 纱布 3 去除杂质 利用dna在不同浓度的 中溶解度不同 通过控制 的浓度去除杂质 4 dna的析出 将处理后溶液过滤 加入与滤液体积相等 的 冷却的 体积分数为95 酒精溶液 较高 dna的鉴定 二苯胺试剂 蓝色 dna溶解在2mol l的nacl溶液中 加入4ml的 沸水中加热5min 溶液变成 dna提取材料和实验用具的选择 1 实验材料的选择原则是选用dna含量高的生物组织 有些材料不宜选用 如哺乳动物成熟红细胞 猪 牛 羊的血细胞 无细胞核 无法提取dna 实验一般选用鸡血或菜花作为实验材料 2 鸡血细胞破碎以后释放出的dna 容易被玻璃容器吸附 由于细胞内dna的含量本来就比较少 再被玻璃容器吸附去一部分 提取到的dna就会更少 因此 实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管 这样可以减少提取过程中dna的损失 dna的粗提取与鉴定实验中涉及的原理 实验步骤分析 续表 目的 防止血凝 加速血细胞破裂 溶解dna 使2mol l的nacl溶液稀释至0 14mol l 促使dna最大限度地析出 使含dna的黏稠物被留在纱布上 使含dna的黏稠物尽可能多地溶于溶液中 除去含dna的滤液中的杂质 提取dna 鉴定dna的存在 a 出现蓝色 b 无变化 提取dna的原材料 例1 做dna提取与鉴定实验时 用鸡血而不用猪血的 原因是 a 鸡血的价格低b 猪的红细胞没有细胞核 不易提取dnac 鸡血不凝固 猪血容易凝固d 用鸡血提取dna更简便 名师点拨 dna提取实验材料选取的原则是dna含量高 便于提取 猪为哺乳动物 成熟的红细胞没有细胞核 不含dna 答案 b 配对练习1 能作为提取dna的最佳材料的是 a 鸡的全血c 鸽子的血细胞液 b 老鼠的红细胞d 菠菜绿叶 解析 鸡的全血 血浆太多 应该除去血浆 老鼠作为哺乳动物 红细胞没有细胞核 没有dna 不适合作材料 菠菜绿叶由于有色素 影响实验观察的效果 鸽子的血细胞液最为适合 能够获得较多的dna 答案 c dna提取的实验操作 例2 在dna的提取过程中下列操作的生成物可以丢弃 的是 第一 放入2mol l的nacl溶液中 搅拌后过滤 得到黏稠物 和过滤液 第二 放入0 14mol l的nacl溶液中 搅拌后过滤 得到黏稠物 和过滤液 第三 放入冷却的95 酒精溶液中 搅拌后过滤 得到黏稠物 和过滤液 a c b d 名师点拨 不同浓度的nacl溶液中dna的溶解度不同 0 14mol l的nacl溶液中dna的溶解度最小 dna析出 过滤后 存在于黏稠物中 在2mol l的nacl溶液中 dna的溶解度大 过滤后 dna存在于滤液中 酒精可以溶解蛋白质等杂质 而dna不溶于酒精 这正是dna提取和进一步提纯的原理 答案 d 配对练习2 在dna的粗提取中 两次有dna的析出 其依据的原理是 dna在0 14mol l的nacl溶液中溶解度最小 dna析 出 酒精可以溶解蛋白质等杂质 而dna不溶于酒精a 两次都是 b 两次都是 c 第一次是 第二次是 d 第一次是 第二次是 解析 在dna的粗提取中 第一次0 14mol l的nacl溶液中溶解度最小 dna析出 第二次酒精可以溶解蛋白质等杂质 而dna不溶于酒精而析出 两次都有dna的析出 答案 c 影响dna提取质量的因素 例3 在dna提取过程中 最好使用塑料试管和烧杯 目的是 a 不易破碎b 减少提取过程中dna的损失c 增加dna的含量d 容易洗刷 名师点拨 dna容易被玻璃容器吸附 为减少提取过程中dna的损失 最好用塑料试管和烧杯 答案 b 配对练习3 下列操作中 对dna的提取量影响最小的 是 a 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂 放出dna等核物质b 搅拌时 要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌c 在 析出dna黏稠物 时 要缓缓加蒸馏水 直至溶液中黏稠物不再增加d

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