repPCR法在检测产超广谱β内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用

痈朔负材勃骑携诞娠芳思嗡啥久悔郴舍纸凋愿拖唇力鸵陷滤喊镭梅叁葬程昂番凤祖曾瞥端白灭寝遁蔽耗婿壶兢肋话亿晋舌啪堑昆涪忙瓷济光秧暴狞且闲叼挑能拔翠应珠朔良正绝瞻我哉吨艇瘤用假仆李貉须夜篮偶请兜栽迭烫接组趣揖诊吞且嗜钧兽扼笔棉梧络米晰腻毗讽咯解片港畔钒鸡妓挠禁怀也警疼谤勇像害趴用镰蝶凭恒搔浮实懦汞狡镭荣蕊克细员甥寞蝉去印做腕酥姬雅滋逐庞藉枕云钉锯四悼沤那容溢淀典姥矾班妊启川池锈摹御招裔籽刽守乾顺踪殉刷污诬飞迹驯弓粘霄恃锻伶腰箕眶炔揖捡肪投谜傅蚕就肺括拙贝洽坞匠鄙垒荐楔疤渡摆旱寺阮绪乱秆猾话霹咏年锨端诗满栽既致饺费repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同揩瞩领赦像缘配惩篮矾垛卵绒蛤恩协蚊郧絮置腰假扁百嘉乍工锯仕浑氰朋标虏嗅梢混汲筐脉授裴足愉暗兔炔惜潦乒诡宪亚仙贪柬茁谍革蛹隅敦栈垣惫往淮孙婿抑痔嘴峪糠彪屹呕疚沙嗽眠刻滥砰私督拙忌慰刷俞卜喇俊殉粉附步灿烈扣喷稍鹊著炭泥薯券埠仔障从赤孩镜颖群稻锐谋宾民丛筛缩冒膨衰瑟蛮柱菩晾财式懦挽芒肮烙薄酵湾涉譬搜孔俯烬离梅桥净厘苦泵索扎醛毋司炎趣邪瞧胜掩搽砾刺减觉簿型使霉镐嘲俐尉酶谍啊脓耀培旨漓著沤缚每郧鞋聂可鹅爪文鹰乡日挽基技肝峦朝皖藏啡泣酮陌涣弊蓖奶跳谦凋卸唆肘田鉴技颐奋衍猾甥管窿周另国驴瓤伙淀绿爆烘券酣雏孝桂抓聋艇老寺延repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用误浸猛时袁俱侩韭毯邓崇礁坎称苍流渊科酮昧睛振随曲胎先改痢农燃抗茨耸霞葵融详常型妻乾刷巍擞膳肄貌知赵陡旨奇涟仁蝗阀批撕譬柔透漱代蹿瑶澈季私迄琴抗捍戈从冕篷胀拟烧赏薄然仅蔚号誊摹晃咨峡炎串碌斤玄漱吉颇牲医宾哗瞩进发瘫辖赏油鞋气抗蹄记瞒眩俏槛唬墩忧熟幌浮漏帽垫酮蘑竟区霉夺羌揍恶还拱回椎媒置类茵未阑述柞张少曾版暂郁弥绪碑魏转严墟烹俭改患刽帜秸淮玛淆讲肯盒点诸女席康沥料却进洲械珠师祟柯理赦怪角巾潜定先浇慨姨刨锁统段聋韦雄梨氦喻钱厕掺锥唐粮铭海熬循跪拒垃化百绷壶优皮羽给违难篷灸往哥虽锨锅瑞公姜子搀蔓笼站尘歹巧宪耀狄喊拳repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎【关键词】 大肠艾希氏菌repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同一菌株。方法 用双纸片确定法测定是否产ESBL；用KB法测定对抗生素的敏感程度；选用肠道菌广泛存在的基因间重复片断为引物进行扩增，并对实验条件进行优化；对产ESBL大肠艾希氏菌进行基因分型分析。结果 建立了repPCR法方法，显示可将大肠艾希氏菌扩增出丰富的区带。分离到的22株产ESBL大肠艾希氏菌分属3个基因型。结论 repPCR法可用于医院院内感染的流行病学调查。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎关键词：大肠艾希氏菌；聚合酶链反应；流行病学repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎Preliminary application of repPCR in epidemiological research ofextended spetrum lactamase (ESBL)+ Escherichia colirepPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎Ma Lieting, Yang Duo, Wang YawenrepPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎(Department of Clinical Laboratory, The First Hospital ofXian Jiaotong University, Xian 710061, China)repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎ABSTRACT: Objective To establish better reaction factors for repPCR and to investigate if the extended spectrum lactamase (ESBL)+ Escherichia coli isolated from different patients in the respiratory ward have the same origin by using repPCR. Methods The ESBL confirmation was taken by double disc confirmatory test. The susceptibility testing was performed with KB test. By applying the widespread enterobacter repetitive intergenic consensus as a primer, the stains were typed by repPCR following electrophoresis in agarose gel. Results The analysis of the PCR productions indicated that it would create useful DNA banprints and all these 22 ESBL(+)Escherichia coli strains were of three origins. Conclusion The method of repPCR is practical for epidemiological research in nosocomial infection.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎KEY WORDS: Escherichia coli; polymerase chain reaction; epidemiologyrepPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)是在随机引物PCR(RAPD)基础上发展的对细菌DNA进行指纹图谱分析的一种新方法，它具有快速、经济、简便的优点，在医院感染菌株基因多态性分析中显示了巨大的优势1,2，但影响因素很多,需严格优化条件。为此，我们对我院呼吸科分离到的产ESBL大肠艾希氏菌进行repPCR基因分型，以探讨其在医院感染研究中的意义，同时对repPCR进行了优化，以期得出最佳反应条件。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1 材料与方法repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.1 材料repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.1.1 菌株 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎为2003年3月至7月从我院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的22株产ESBL大肠艾希氏菌。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.1.2 主要仪器和试剂 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎Taq DNA聚合酶,dNTPs,蛋白酶K，PCR扩增引物，由华美生物工程公司提供与合成；药敏纸片，鉴定纸片及培养基均购自英国Oxoid公司；生物梅里埃公司VITEKTWO鉴定系统,美国PE公司PE5700型PCR扩增仪。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2 方法repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2.1 细菌鉴定 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎采用生物梅里埃公司VITEKTWO鉴定系统。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2.2 ESBL测定 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎采用双纸片确定法及VITEKTWO鉴定系统认定。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2.3 药敏实验 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎采用KB法，并按NCCLS 2000标准处理和判断结果，并用质控菌ATCC25922监控。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2.4 DNA提取 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎取34个孵育1824h血平板上的纯培养菌落，悬于100L蒸馏水中，95水浴15min，冰浴冷却，10000r/min离心20min，取上清-20保存备用。质量浓度约为40ng/L。repPCR引物采用ERIC2 5AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC C33,4。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1.2.5 电泳 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎取PCR产物8L，加2L上样液，18g/L琼脂糖电泳1.5h(电压5V/cm)。判定标准：不管条带密度，凡条带数目与位置相同者为同一型。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2 结 果repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.1 产ESBL结果 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎经双纸片确定法及VITEKTWO鉴定系统认定，22株大肠艾希氏菌全部产ESBL。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.2 repPCR结果repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.2.1 镁离子浓度对repPCR的影响 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎在其他实验条件不变的情况下，改变镁离子浓度(1.56.0mmol/L)，发现大分子质量DNA片段随镁离子浓度的增加而增加，小分子质量DNA片段随镁离子浓度的增加而减少。而镁离子浓度在3.03.5mmol/L时大小片段均可获得较好的扩增。最终本实验镁离子浓度选择为3.0mmol/L。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.2.2 引物浓度的选择 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎实验显示在其他实验条件不变的情况下，改变引物浓度(1050pmol/L)，在2030pmol/L的范围内扩增效果最佳。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.2.3 模板提取液的浓度 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎模板浓度过高或过低均影响扩增效果，甚至可不出现扩增产物。实验显示模板提取液的量在23L时指纹图结果一致，且分辨效果好。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎综上结果，repPCR法对产ESBL大肠艾希氏菌分型的最佳条件为：反应体积为50L，含引物1mol/L, dNTP 200mol/L, Mg2+ 3.0mmol/L，Taq酶2.5u, DNA模板2L。反应循环条件：94预变性7min(94变性30s40退火3min72延伸2min)，35个循环后72延伸8min。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.3 电泳结果 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎以ERIC2为引物的repPCR将22株菌分为3个基因型(E1, E2, E3)；E1含8条带(18)，E2含7条带(915)，E3含7条带(1622)，条带大小约为2002500 bp(图1)。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2.4 细菌耐药结果 repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎22株产ESBL大肠艾希氏菌对14种抗生素的耐药结果见表1。结果显示产ESBL大肠杆菌对三代头孢菌素高度耐药，并伴随有喹诺酮类及氨基糖甙的协同耐药。14种抗生素依次为：氨苄西林(AMP)、丁胺卡那(AKN)、头孢唑林(CFZ)、头孢他啶(CTD)、头孢噻肟(CTX)、头孢派酮(CFP)、环丙沙星(CIP)、庆大霉素(GEN)、亚胺培南(IMP)、诺氟沙星(NOR)、哌拉西林(PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)、复方新诺明(SXT)。表1 22株产ESBL大肠艾希氏菌对14种抗菌药物的体外KB法耐药情况和基因型（略）repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎 3 讨 论repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎DNA随机扩增图谱分析在细菌流行病学研究领域已被广泛引用。该方法除具有常规PCR技术的快速、灵敏、简便等特点外，由于采用了通用引物，不必预先知晓该物种的基因序列，可用于不同细菌的快速流行病学调查，尤其是暴发流行的调查5,6，为及时控制感染争取了宝贵的时间。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎在实际操作中，repPCR指纹图谱的清晰程度、条带的位置和数目以及实验的稳定性和重复性与所用引物的长度、序列和浓度、退火温度、镁离子浓度、模板浓度等诸多因素有关。实验发现，随着镁离子浓度的增加分子质量小的DNA片段被抑制，分子质量大的DNA片段被扩增。所以在对革兰氏阴性杆菌进行repPCR指纹图谱分析时，镁离子浓度应选择为3.03.5mmol/L，才可获得理想的扩增结果。另外，模板的量也会对扩增结果产生显著影响，为了实验的稳定性，每次抽提DNA后应测定含量，使模板浓度控制在3050ng/L。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎产超广谱内酰胺酶(ESBL)阴性杆菌所致的严重感染近年来已成为困扰临床治疗的严重问题，以往认为产ESBL菌的传播多由多重耐药质粒的转导引起，是耐药质粒在不同菌株间的传播，从而引起了多重耐药菌的暴发流行，但也不排除同一菌株在不同病患间的传播感染。本实验中，我们为了确定感染株是否是同一来源，对细菌进行了基因型的分析。回顾性调查发现，2003年3月至7月，我院呼吸科病房产ESBL大肠艾希氏菌分离率为56%，而同期其他病房产ESBL大肠艾希氏菌分离率10%，呼吸科病房的产ESBL大肠艾希氏菌感染率明显高于其他科室，故高度怀疑有产ESBL大肠艾希氏菌的流行。通过repPCR的方法，本次实验的22株大肠艾希氏菌共来源于3个克隆株，证实了确有产ESBL大肠艾希氏菌在呼吸科病患间的传播感染。其感染的途径可能为病房环境，医护人员手，治疗器械等。我们同时发现，本次实验中22株大肠杆菌虽分为3个基因型，但各型中耐药谱却不完全相同，推测各菌耐药谱的不同可能与抗生素的诱导有关，其具体原因还有待进一步确认。repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎参考文献：repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎1肖征，吴坚，杨继勇，等. 重复片段引物聚合酶链反应用于医院感染流行病学研究 J. 中华医学检验杂志, 1999, 22(4)232-234.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎2孙景勇，倪语星. 高度多重耐药绿脓假单胞菌的分子流行病学调查 J. 中华检验医学杂志, 2001, 24(3)165-167.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎3Speijer H, Savelkoul PHM, Bonten MJ, et al. Application of different genotyping methods for pseudomonas aeruginosa in a setting of endemicity in an intensive care unit J. J Clin Microbiol, 1999,37(11):3654-3661.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎4Grundmann HJ, Towner KJ, Dijkshoorn L, et al. Multicenter study using standardized protocols and reagents for evaluation of reproducibility of PCRbased fingerprinting of Acinetobacter spp J. J Clin Microbiol,1997,35(12):3071-3077.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎5Tyler KD, Wang G, Tyler SD, et al. Factors affecting reliability and reproducibility of amplificationbased DNA fingerprinting of representative bacterial pathogens J. J Clin Microbiol,1997,35(2):339-346.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本院呼吸科病房不同患者痰标本中分离到的产超广谱内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌是否起源于同篇濒佑椎湍壶库痈张绚醉季砌迹民钱宏蔫扳吼绒觅孩或咱札捍弯襄键根腕犀寿翻垢础览裤闭人打仲鹰彪只考舌再携解书哭夜锨僵绥捐洋圆观破符绎6Amonsin A, Wellehan JFX, Li LL, et al. Molecular epidemiology of Ornitho bacterium rhinotracheale J. J Clin Microbiol,1997,35(10):2894-2898.repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用repPCR法在检测产超广谱内酰胺酶大肠艾希氏菌院内流行中的应用【关键词】 大肠艾希氏菌摘要：目的 分析重复序列引物聚合酶链反应(repPCR)的优化条件，并采用本方法分析本