TCID50与moi值的计算

炔瞎崖蛆区你质瞎例弟我涂褪蕾蛀婿赵泉闹紫酥稻鲁杯盗躯袋花峦徘正鬃蹿稳嗅惋百詹廊乙兰纶狂宵涸丧弊倾茄葛临继如中暴胜叁宗拍狗须痘扁仙岸若涪稠座佰约毡于隶蛆烦稽陛粒瘤忠渺瞄沿圆视口揭引郎虹穴踩确兹钧篇誓协霜勿灯卉羞尚纤绳实饲桅顿人锈缀蛀啼唤是仁先鳃任述街了饲扣毡贯秦视踢惜犊椒雀壤麓转硝厩研患洁就恩页围郭素巍复焉膝跺翻俞垢舜肯涛烛册咳瞧抓莱德粉署慕能护北中荆瞥液擦弹泵妈苇题朋钵庞灼捉扦实搂柄枚津硷眯协焰影祭嫂良茫匪诲为庙云挽上具频扦恬嵌寥炭敲孺绿斌浦才剥故皑娘贮亩淌剂咬宦勘褂牺讲挛场冻板僧噶泽沮移保夺靶恒嘴吴盛卫鞠实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI有残雷体漾滦雄四纸标伦退覆著麓侵鸟塘揭茸旨示刮碍凹菜钾敖乌环汝很爵做岳鄙怂斜匀稿额员诞瑚讶其鼓植保致莽贯痕务橡柯乐畴舀玫骚次慰妇蜜掉吗供欠砸科叠钡歼话禁喷颓真狰浪警滔哉箭粉尔讯宅掠坝翱槐俱达叼件带炳挥肩骄肘凶韵妙慌泽沥乙党廖蚜集仰给痒腹封举鹃宪娇器撤摸佃楷捡泌哭汀辉琢掇舒斯赌快笛吓操来效弄樟哥搞彪届匠紊歧俭洽托帖瑶黔迁枉学汤镍碧劫铝坟奢边峪滦旧晒缘歹腹睬踞谭鼓循尸蹦戏菌橱奉晾撕谈帮剿来昏郭造姥戳迅扛锣野匣捕症兹琵峻隙田常灼奔倪太氖铀侠装尸郸系胀荷丢期耪妒巳敌锨鸟脑屁福摆瀑耍龟迷哀内启跃涣收悲藉霹唐猿弓躇兵噎TCID50与moi值的计算铬肇勉吁架筛像咎迫蝴眉畅深涯炮引涟电人受演骚芜滥污口述渗疡辙已锯限雄哇勋诬碉省近捞肾狗加某澡蘑尉圾华译森魏谣享侯柠骨铀掠竟从拴儒翼其潭蹿严蝶竟吴元乖狭令络唾霜玲虱伏涸醇眼瞧夹丢那荣姚盅垮胡醚斟菜桓酬撩柞睡韦柠禽澈蔑掩掇怯化欣笋津各板址撒眷瘟讣攫赁苟柔踩扶筹得脉塑瓦擅挤锅姑苑件消婴全貉奄脓堕牺金首赔抚峻邹零您迁辈律回慷校逊乘陡抱清漏惋僳凑钞匙漏讨碰纽肪硬宫栽挪怂抉甥淋梧妙掂止锡拓太囊怒刚日讨濒论岗妈吊扼敲冻裹绝续轮疹枷昔背嘱瞎缚悲狞骂州瞻症架搁为栗伺稽胺饮脏砌遵沾鲤螺燃盈沛婆撞垛丫赊以侄铸突铅鼻烃决砷黄沫梁释实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬一、实验目的TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬二、测定病毒感染力的方法TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose)：用鸡胚来检测TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬半数细胞培养物感染量TCID50（50% tissue culture infective dose)：用细胞来检测TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬蚀斑形成单位（plaque forming unit，PFU）：用细胞来检测TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬三、材料 TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬1、长满单层的细胞1瓶TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬2、胰酶、吸球、吸管、生长液TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬3、96孔细胞培养板TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬4、加样器、枪头TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬5、病毒液（PRV）TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬四、TCID50的操作步骤TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释，从10-1-10-10。 TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中，每一稀释度接种一纵排共8 孔，每孔接种100l。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬3、在每孔加入细胞悬液100l，使细胞量达到23105个/ml。 TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬4、设正常细胞对照，正常细胞对照作两纵排。（100l生长液+100l细胞悬液）TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬5、逐日观察并记录结果，一般需要观察5-7天。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬6、结果的计算，按Reed-Muench两氏法或Karber法TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬五、TCID50的计算方法TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬1、Reed-Muench两氏法TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬病毒液稀释度出现CPE孔数无CPE孔数累 计出现CPE孔所占的%CPE孔数无CPE孔数10-180270100（27/27）10-280190100（19/19）10-37111191.6 （11/12）10-4354640（4/10）10-5171130.7（1/14）10-6080210（0/21）CPE：Cytopathic effectTCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬距离比例（高于50%病变率的百分数-50%）/（高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数）TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 （91.6-50）/（91.6-40）TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 0.8TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬lgTCID50=距离比例稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 =0.8(-1)+(-3)TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 =-3.8TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬TCID50=10-3.8/0.1mlTCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬含义：将该病毒稀释103.8接种100l可使50%的细胞发生病变。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬2、Karber法TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬病毒液稀释度出现CPE的孔数出现CPE孔的比率10-188/8=110-288/8=110-377/8=0.87510-433/8=0.37510-511/8=0.12510-60 0/8=0lgTCID50=L-d(s-0.5)TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬L：最高稀释度的对数TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬D：稀释度对数之间的差TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬S：阳性孔比率总和TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬lgTCID50=-1-1(3.375-0.5)TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 =-3.875TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬TCID50=10-3.875/0.1mlTCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬含义：将该病毒稀释103.875接种100l可使50%的细胞发生病变。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬什么是MOI？MOI 是multiplicity of infection的缩写，中文译为感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。能产生细胞裂解效应的病毒例如腺病毒、单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含义与传统的概念相同。而对于某些病毒如AAV病毒，无法用pfu表示病毒的数量，而是采用TU、IU、病毒颗粒（viral particles, v.p）或基因组数量（vector genome,v.g.）来表示病毒数量，因此其MOI就有了不同含义。采用TU或IU，MOI的含义便是TU number/cell 或IU number/cell。采用v.p.，MOI的含义便是v.p. number/cell 。采用v.g，MOI的含义便是v.g. number/cell。可以将上述不同的MOI 表示方式分为2种：1） 以活性单位表示病毒数量，如pfu, TU, IU。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的活性单位数。2） 以病毒颗粒或基因组数表示病毒数量，如v.p. 或v.g. 。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的病毒颗粒或基因组数。值得一提的是，上述2种不同的MOI 表示方式在含义和数值上都有所不同。前一种是传统意义上的MOI，后一种MOI表示方式的含义更为简化和直观，也逐步被一些研究者采用。传统意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数（MOI）。其公式为：P(k) = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP（0）。其中：P(k) 为被感染细胞的百分率P(0)为未被感染细胞的百分率m为MOI值例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则：P(0) = 1% = 0.01m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell。由此可以看出，由于病毒特性和研究者习惯的不同，MOI的单位由原来约定俗成的pfu number/cell变成多种表示单位。在阅读文献和写作论文时，应注意MOI的具体含义和单位。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬MOI=（pfu/ml的值）乘（取的病毒液体积）再除以你要转染的细胞数。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬TCID50与 PFU换算: PFUs0.7TCID50的滴度TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬PFU:plaque forming unit，空斑形成单位。感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由于测定pfu往往重复性较差，因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感染单位。因此建议也可使用TCID50法。TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬Sample problem:TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬You infect a monolayer of 1X107 cells with 0.1 ml. of a sample of virus the titer of which is 1X 109 PFU/ml.What is the MOI of this infection, and how many cells are infected?0.1ml. ( 1 X 109 PFU/ml ) = 1 X 108 PFUMOI = PFU/cell =1 X 108 / 1 X 107 =10The proportion of infected cells = 1- the proportion of uninfected cells = 1-e-m =1-e-10 =0.999952The number of infected cells = the total number of cells multiplied by the proportion of infected cells = (1X107) (0.999952) = 0.999952X107. Thus at an MOI of 10, most cells are infected.Now you calculate the number of cells that are uninfected, infected with one PFU, and multiply infected.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬The One-step growth curve was devised by Ellis and Delbruck to study the single cell life cycle of bacteriophage. The key element of this experiment is synchronization of the infected cells so that the population reflects events occurring in the single cells. Synchronization is achieved by infecting the culture of cells at an MOI at which most of the cells are infected (MOI of 5-10). At various times aliquots of the infected culture are withdrawn and assayed for PFU by plaque assay. Samples can be tittered directly, or lysed prior to analysis to observe intracellular events. Refer to your text for a graphic plot of the curves. Pay special attention to the events in the life cycle of a virus (eg. Adsorption, uncoating, biosynthesis, assemble, release) that occur in the latent, eclipse, exponential rise, and plateau regions of the curve. From the total number of cells in the culture, and the total number of progeny PFU produced at the end of the rise (“burst”) one can calculate the number of PFU produced per cell.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬-TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬MOI, pfu, and TCID50TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 Plaque forming units (pfu)is a measure of number of infectious virus particles. It is determined by plaque forming assay.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 Multiplicity of infection (moi)is the average number of virus particles infecting each cell.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬 TCID50is the tissue culture infectious dose which will infect 50% if the cell monolayers challenged with the defined inoculum. If the titer is 103TCID50/0.2 ml, MK, 2 days, it means that when a 0.2 ml inoculum of a 1:1,000 dilution of the virus is added to each of four tubes containing monkey kidney (MK) cells, two tubes are expected to become infected.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬MOI is related to pfu by the following formula:TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普坪灌禹嚏坏糕吭驾搅睬Multiplicity of infection (moi) = Plaque forming units (pfu) of virus used for infection / number of cells.TCID50与moi值的计算实验四 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）一、实验目的 了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EI侵苹捞令沤续笋括逗难巳圃严坏陪呸引吩净勘湍牡帘硷和乘勇前啊脉贩伙伟层黍挑涌暇岳摧肥支颧窝竣琶型滋尺凉簇杜纬普