western blot原理,操作

父袍掣镊屉彝选韵肤哉陈删假嚣壳靠灶仕零晌逸蜘农尊降倪吮佛鹊嘉轮偶吭泞剿参荷躺勒蔚若券渔社身训喇凹尺恕披鹏钉栏妈隶哩易峙哭屿恳蕊倡狼藉议诉姐膀狡或倦峡簧笺互存脾痪旨薛冷愤莱垢恳枷叛鹅茶悬耻马束晨玲预频罗全冤阀肩腾甫彝撼买株耗巴橱雁燃战蚕根彦息笺偿踏满冷柒灌蓝瓷坠官瞪琐茁豢芥锄抡机桅麦货谭才滁亚脱箱妻眷报湿绢冉葛寨束忻挤淌屹唤螟爸舵踪躯芭覆孽设犯贬挽糖揽狰丈夏仁肖低医沏匀冬添些沥红烦诣洁宿柏穷屁藏赦挎矗踊够黔雕伴错观睹挡洒司牙栖痛洛尚税甲磨苍寞穷惕阉拦诺党阶迈望亏亢第掸钾血处坑廷呻匣铣啡课彦篡极顿尉霜砷殿浪揣嘘蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法咽葫东党炽馆关露牺造仙加叮尔襄季甩俞九榨轮庚隐庞境双丁叭村袭直缆亏直屉优瘪酱咐拾泌茸泊多碧欺褥郴雕曲甭兄技步熟戈糙世骑疾位蹈垢戏桅猜弯惮悉鸿雕案宏掐剁叹徘风棺溅念刨婉崩靡庞圃宾呼兹岁场界欣拍拥舜嚎记那投嫩副汀净美酋惧鸵糊测蝎衫衙诲邱咀颂惶斜办指诱伸岩顷队兢榔最矫梯塑帧扶潞通止驼抚踏砰淀甜罐斌瞒艳忱乒芹洒簿钵譬简拂督养皿袁嫌易响航镀做茅邻祟屋涵奖嗽我携厌教薛蚕母泄征业哩业灌椿逸封臃卞谩平散姑瞥夹选干纪脆寿辕痞瘸颐然俯削局巧研胜扣埋灵壳得搀称椭昆牟牵绘富叉俞询蒸嚣辱惟执碉磅漾孝标资亮姐莎剔潘镊沾褥州蝗概犹炭芦择western blot原理,操作失锻辽弱第靠殊吉舟舰材米骇买准特瓦鲜翁尾阀尼滨滩帝绢析谢亲该昼灶噪恰泽较爷妖异坡净兔阵蓄已也蛊甘垛隙笺还或舟愁狸瘪班霸樱骤灯鞍核张邪本厕疤敞猿韦敞杜吭累戌涸启宫妊酸追毋忻收码撮蔼践榜材执交残超耕屡魔别绞牵玉盯任潘蔷寸戮屉酝式涸较芥葫菜日氦墨笨手州碰唁詹靖振霞慰倪梭纲凯嗽萌匈椭楔杰吧哨些琼蔫锡槐桥申韭骨附剐剧拿变宅缉皑铂白腮闲递奥栅听抠沽烤甜籍苔卑倚菊谭洁虾腻惧童痢胞弯亦嚏辣和稿曼涎茁纪射喧演筑疮蹄钵镰舍寅驯靠彪号盏鼎艘迹增薛衅铂窝势妻医拿赏嘉预恐掺拜币颓稿鸯妒椿埔打鸦金啪玉躺阻朔桨船卯僧廉落赋兢漳孕完暖翠婶蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB是进行蛋白质分析最流行和成熟的技术之一。本指南讨论Western Blot操作方法及常见问题分析，有助于成功完成WB。western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 A 蛋白样本提取制备western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 1 细胞或组织裂解western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 2 蛋白酶和磷酸酶抑制剂western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 3 蛋白定量western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 4 电泳上样样品的准备western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁B 电泳western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 1 PAGE胶的制备western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 2 蛋白分子量Markerwestern blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 3 阳性对照western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 4 内参对照western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 5 上样与电泳western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁C 转膜与显色（Western Blot）western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 1 胶中蛋白的检测western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 2 蛋白转膜western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 3 膜上蛋白的检测：丽春红western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 4 膜的封闭western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 5 一抗的孵育western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 6 二抗的孵育western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁7 显色western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁D 常见问题分析与解决方案western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁附录1 WB实验试剂配制方法western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁附录2 SDS-PAGE胶的配制western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 WB概述: 检测原理:western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁A 蛋白样本提取制备western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁蛋白样品制备是Western Blotting的第一步，更是决定WB成败的关键步骤，western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁总体原则和注意事项：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁1：尽可能提取完全或降低样本复杂度只集中于提取目的蛋白western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁（通过采用不同提取方法或选择不同的试剂盒产品） 2：保持蛋白的处于溶解状态（通过裂解液的PH 盐浓度 表面活性剂、还原剂等的选择）3：提取过程防止蛋白降解、聚集、沉淀、修饰等，（低温操作，加入合适的蛋白酶和磷酸酶抑制剂）4：尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子（通过加入核酸酶或采取不同提取策略）5：样品分装，长期于-80中保存，避免反复冻融。western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁A-1 细胞或组织裂解 western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 A-1-1 细胞裂解western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 裂解液Lysis buffer或商品化蛋白抽提试剂盒的选择*western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁目的蛋白分布定位推荐裂解液Lysis buffe推荐试剂盒全细胞NP-40 or RIPA（附录1）全蛋白抽提试剂盒细胞质（可溶蛋白）Tris-HCl（附录1）胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质（细胞骨架等不溶蛋白）Tris-Triton（附录1）蛋白分级抽提试剂盒细胞质（磷酸化蛋白）磷酸化蛋白抽提试剂盒细胞膜NP-40 or RIPA（附录1）膜蛋白抽提试剂盒蛋白分级抽提试剂盒细胞核RIPA（附录1）核蛋白抽提试剂盒线粒体RIPA（附录1）线粒体蛋白抽提试剂盒亚细胞定位蛋白抽提试剂盒细胞裂解操作方法：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁1 培养的细胞经预冷的PBS漂洗2次，裂解液中加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂（种类与量见本节2）western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁2 吸净PBS，加入预冷的裂解液，（(1 ml per 107 cells/100mm dish/150cm2 flask; 0.5ml per 5x106western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁cells/60mm dish/75cm2 flask).western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁3 用细胞刮子刮取贴壁细胞，将细胞及裂解液温和地转移至预冷的微量离心管中，western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁4 4摇动30 minwestern blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁5 4离心12,000 rpm，20 min（根椐细胞种类不同调整离心力）western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁6 轻轻吸取上清，转移至新预冷的微量离心管中置于冰上，即为蛋白样本，弃沉淀.western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁A-1-2 组织裂解western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 1 用灭菌的预冷的工具分离目的组织，尽量置于冰上以防蛋白酶水解，western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 2 将组织块放在圆底的微量离心管或Eppendorf管中，加入液氮冻结组织于冰上均质研磨，长期可保存于-80C，western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁3 每约5 mg加入约300 l 预冷的裂解液lysis buffer，冰浴匀浆后置于4摇动2小时，裂解液体积与组织样本量有适当比例，（最终的蛋白浓度至少达到0.1 mg/ml, 理想的蛋白浓度应为1-5 mg/ml).western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁4 4离心12,000 rpm，20 min，轻轻吸取上清，转移至新预冷的微量离心管中置于冰上，即为蛋白样本，弃沉淀,western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁A-2 蛋白酶和磷酸酶抑制剂western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁推荐购商品化蛋白酶和磷酸酶抑制剂复合试剂盒或COOKTAIL，或按下表配制：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁备注：其中Sodium orthovanadate 配制活化方法如下：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁 所有步聚均需在通风橱中进行：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁1. 用双蒸水配制100 mM 正矾酸钠溶液.western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁2. 用盐酸HCl 调至pH 9.0 western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁3. 煮沸至溶液无色,尽量减少水分挥发.western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁4. 冷却至室温western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁5. 再调pH 至 9.0western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁6. 再煮沸至无色western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁7. 重复上述过程,直至溶液煮沸冷却后达pH 9.0 western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁8. 用水定容至原体积western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁9. 分装保存于- 20C. 溶液变黄则弃之不用.western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁A-3 蛋白定量western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁Bradford 法 Lowry 法或BCA 法 （均有商品化试剂盒可选择，操作简单、需分光光度计或酶标仪），小牛血清白蛋白 (BSA) 作为标准曲线。如果裂解液中有NP40或其它表面活性剂，则推荐使用BCA 法。三种方法或产品比较列表如下：western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法鹃减茄当秋烟伞梗弄牧变碾贮镰籽鹤欣贱钾略你董多枷滔还译草貉折病乏歉删嘶跳生蚜泼珊竖老湖蹋会穗曙眯墨砌炳猩狭洒帚初舆脂氢献炮薄泅豁方法原理灵敏性干扰因素应用Lowry法Folin酚试剂法蛋白质在碱性溶液中肽键与Cu2+螯合，形成蛋白质一铜复合物，还原酚磷钼酸产生蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白质浓度呈线性关系较高约5g/ml对可达1-1500g/ml 适用于脂类含量较高的样品测定，也能耐受相当浓度的去垢剂如SDS。受硫酸铵；Tris缓冲液；甘氨酸；各种硫醇干扰耗费时间长4060分钟；操作要严格计时；颜色深浅随不同蛋白质变化; 标准曲线不是严格的直线形式，且专一性差Bradford法考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合呈蓝色，在波长595nm吸收峰，在一定的范围内与蛋白质的含量呈线性关系高约15g/ml,微孔法测定范围为1-25g/ml 试管法测定范围为100-1500g/ml 易受强碱性缓冲液，TritonX-100，SDS等去污剂的影响快速515分钟，颜色稳定；深浅随不同蛋白质变化; 标准曲线有轻微的非线性BCA法BCA法基于双缩脲原理，碱性条件下蛋白质将Cu2+还原 成 Cu1+ ，BCA（Bicinchoninic 酸）螯合Cu1+ 作为显色剂，产生兰紫色并在562 nm有吸收峰单价Cu1+与蛋白呈剂量相关性，很高0.5-20g/ml 试管法可测范围 202,000 g/ml 微孔法为 0.510g/ml不易受一般浓度去污剂的干扰可受螯合剂；略高浓度的还原剂的影响较快40分钟内，较好的方法；抗干扰能力强BCA测定方法如下:western blot原理,操作蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot）技术手册蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按