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第1章 免疫学概论 一、目的要求掌握：免疫的概念及免疫器官与组织的概念和组成熟悉：免疫系统的生理功能，了解：免疫学的发展简史及免疫学技术在临床医学检验中的应用。 第二部分 测 试 题一、选择题：1机体免疫稳定功能低下，可导致（ C ） A免疫缺陷病 B免疫增殖病 C自身免疫病 D恶性肿瘤2免疫监视功能异常可导致（ C ） A超敏反应B自身免疫病C肿瘤D免疫缺陷病3在现代免疫学中，免疫的概念是指机体免疫系统具有（ B ） A发现并排除有毒因子的能力 B识别和排除抗原性异物的能力 C抵抗并清除传染性因子的能力 D发现和消除恶变细胞的能力4免疫防御、免疫稳定和免疫监视是 D A免疫学的三大内容 B免疫细胞的三大功能 C免疫器官的三大功能 D免疫系统的三大功能5最早用人痘接种预防天花的国家是（ A） A中国 B美国 C英国 D俄罗斯 6 免疫自稳功能是指：BA 抑制病原微生物在体内繁殖和扩散 B 防止自身免疫病的发生C 清除体内病原微生物，防止感染 D 清除体内突变细胞，防止肿瘤发生E 防止病毒的持续感染7 人体内最大的免疫器官是：CA 胸腺 B 骨髓 C 脾 D 淋巴结 E 法氏囊8 人类 B细胞分化发育成熟的器官是：AA 骨髓 B 脾 C 淋巴结 D 胸腺 E 腔上囊9 免疫应答反应的过程是：EA 识别阶段 B 活化阶段 C 活化和效应阶段 D 识别和效应阶段 E 识别、活化和效应阶段10 CD4+T 细胞与CD8+T 细胞数的正常比是：BA 22.5 B 1.52 C 2.5 D 0.5 E 0.5111 可非特异直接杀伤靶细胞的是：AA NK 细胞 B TH 细胞 C Ts 细胞 D Tc 细胞 E TCR细胞12 与抗体包被的红细胞相结合形成EAC玫瑰花环的物质是：AA CD32 B CD35 C CD21 D CD40 E CD8013 T 淋巴细胞与绵羊红细胞结合形成E 花环的分子是：BA CD8 B CD2 C CD28 D CD3 E CD414 新生儿从初乳中获得的Ig主要是：EA IgE B IgD C IgG D SIgA E IgM15 具有调理作用的主要Ig是：AA IgA B IgM C IgG D IgD E IgE16 Ig 的生物学功能是：AA 调理作用 B 呈递作用 C 合成分泌细胞因子 D 细胞毒作用E 参与 T淋巴细胞在胸腺内的分化17 介导 ADCC 的主要细胞是：CA T 淋巴细胞 B B 淋巴细胞 C NK 细胞 D 中性粒细胞E 嗜酸性粒细胞18.免疫应答反应的重要特征不包括 EA.识别自己 B.识别异己 C.特异性 D.记忆性 E.遗传性19.特异性免疫效应功能不包括 E A.浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能B.Th细胞分泌细胞因子等效应因子，执行细胞免疫功能 C.CTL细胞杀伤靶细胞 D.产生记忆细胞 E.中性粒细胞吞噬与杀灭细菌 20.人中枢免疫器官包括 EA.胸腺和脾 B.骨髓和淋巴结 C.胸腺和淋巴结 D.骨髓和粘膜淋巴组织 E.骨髓和胸腺 E21.人体周围免疫器官不包括 D A.淋巴结、脾 B.脾、扁桃体 C.粘膜淋巴组织、扁桃体 D.胸腺、骨髓 E.扁桃体、淋巴结22.免疫细胞发育、分化、成熟的场所是 E A.胸腺和淋巴结 B.骨髓和脾 C.淋巴结和脾 D.骨髓和淋巴结 E.骨髓和胸腺23.粘膜伴随的淋巴组织主要的功能是 E A.B、T淋巴细胞栖息和增殖场所 B.各种免疫细胞的发源地C.T细胞分化成熟的场所 D.B细胞分化成熟的场所E.主要产生IgA及分泌性IgA，执行体液免疫与局部特异免疫作用二、填空题：1免疫功能包括( 免疫防御 )、(免疫监视)和(免疫自稳 )。2免疫的三大基本功能是(免疫防御)，(免疫监视)和(免疫自稳 )。其中(免疫监视)功能低下，易发肿瘤。3免疫防御功能异常可导致(感染 )和( 免疫缺陷)疾病。三、名词解释：1. 免疫(immunity)：机体对“自己”或“非己”的识别，并排除“非己”以保持体内环境稳定的一种生理反应。2. 免疫防御：机体防御外来病原生物的抗感染免疫，但异常情况下免疫反应过分强烈可引起超敏反应，或免疫功能过低则表现为易受感染或免疫缺陷病。3. 免疫监视：体内细胞在增殖过程中，总有极少数由于种种原因而发生突变，这种突变的或异常的有害细胞可能成为肿瘤，机体的免疫功能可识别并清除这些有害细胞。4. 免疫自稳：正常情况下机体对自身组织成分不发生免疫反应，处于自身耐受状态。5. 中枢免疫器官（central immune organ）：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，6. 外周免疫器官(peripheral immune organ) ：免疫细胞产生应答的场所。7. 淋巴细胞再循环：外周淋巴器官或淋巴组织中的淋巴细胞经淋淋巴管进入血液循环后，又通过外周淋巴器官或组织中的毛细血管后经内皮小静脉返回到外周淋巴器官或组织中的循环过程。8. 免疫活性细胞：具有特异性抗原识别受体的免疫细胞，如T细胞、B细胞。9. 补体：指存在于正常人和动物血清中辅助抗体溶细胞作用的不耐热具有酶活性的一组糖蛋白。10. 免疫细胞：凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞。按免疫细胞在体内的作用不同分为三大类：第一类为淋巴细胞，第二类为单核巨噬细胞，第三类为参与免疫应答的细胞，它们参与免疫应答中的某一环节。11免疫分子：主要是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的蛋白质及小分子多肽物质组成，它们参与机体的免疫反应或免疫调节。四、问答题1. 免疫应答主要分为哪几个阶段？2. 中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？3. 简述T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么？4. 补体系统的主要激活途径有何不同？5. 简述临床免疫的主要研究方向？6. 根据作用方式及其特点的不同，机体存在两类免疫简述各自的概念和特征？四、问答题1.免疫应答主要分为哪几个阶段？ 1）识别阶段 2）活化和增值阶段 3）免疫效应2.中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？1）中枢免疫器官（central immune organ）：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，如骨髓，胸腺外周免疫器官(peripheral immune organ) ：免疫细胞产生应答的场所。如脾脏，淋巴结，黏膜，扁桃体等。3.T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么？ 1）T细胞： 介导细胞免疫，辅助体液免疫。2）B细胞： 产生体液免疫3）NK细胞：介导天然免疫，发挥细胞毒作用。4.补体系统的主要激活途径有何不同？比较项目经典激活途径MBL激活途径旁路激活途径激活物抗原抗体复合物MBL，C反应蛋白细菌脂多糖参与成份C1C9C1C9C3C9，B因子，D因子，P因子所需离子Ca2+, Mg2+Ca2+, Mg2+Mg2+C3转化酶C4b2bC4b2bC3bBbC5转化酶C4b2b3bC4b2b3bC3bnBb作用参与特异性体液免疫的效应阶段参与非特异性免疫，感染早期发挥作用参与非特异性免疫，感染早期发挥作用5 根据作用方式及其特点的不同，机体存在两类免疫简述各自的概念和特征？1) 先天性免疫或固有性免疫，是个体出生是就具有的天然免疫，可通过遗传获得，是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。其主要特征是反应迅速，针对外来异物的范围较广，不针对某个特定异物抗原，也称非特异性免疫。2) 适应性免疫，是个体出生后，接触到生活环境中的多种异物抗原，并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫，也称获得性免疫。其主要特征是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答，开始的应答过程比较缓慢，一旦建立清除该抗原的效率很高，特异性很强，也称特异性免疫。第二章抗原抗休反应 一、目的要求 掌握：抗原抗体反应的原理和特点，抗原抗体反应的带现象、前带、后带，亲和力、亲和性的概念；熟悉：抗原抗体反应的影响因素；了解：抗原抗体反应的基本类型。第二部分 测 试 题 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1抗原抗体结合力中作用最大的是D A静电引力 B范德华引力 C氢键结合力 D疏水作用力 E分子间结合力 2抗原抗体结合力中作用最小的是B A静电引力 B范德华引力 C氢键结合力 D疏水作用力 E分子间结合力 3抗原自凝现象出现在下列哪种情况A A反应pH达到或接近颗粒抗原的等电点 B反应pH达到或接近抗原的等电点 C反应pH高于颗粒抗原的等电点 D反应pH低于颗粒抗原的等电点 E反应pH高于抗原的等电点 4用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原，是由于抗原抗体反应具有A A特异性 B比例性 C可逆性 D亲和性 E带现象 5外斐试验的原理是利用了B A过量抗原 B共同抗原 C过量抗体 D亲和性 E可逆反应 6免疫血清制备时，下列说法正确的是A A早期获得的抗血清亲和力低，特异性好 B早期获得的抗血清亲和力高，特异性好 C早期获得的抗血清亲和力低，特异性低 D后期获得的抗血清亲和力低，特异性好 E后期获得的抗血清亲和力高，特异性低7抗原抗体反应的特异性是指抗原决定簇和抗体分子什么区结合的特异性D A可变 B恒定区 C高变区 D超变区 E低变区8下列哪种免疫血清与相应抗原结合可形成可见免疫复合物C A人 B马 C家兔 D猴 E牛9抗原抗体反应中，抗体的合适浓度是C A固定的 B规定的 C与抗原相对而言 D随便设定的 E人为规定的10有补体参与的反应最适宜的pH C A6.09.0 B7.09.0 C7.27.4 D 6.0 8.0 E 7.07.5 11在抗原抗体反应中，通常使用什么溶液作抗原抗体稀释液D A0.70% NaCl溶液 B0.60% NaCI溶液 C0.750%NaCl溶液 D0.85% NaCl溶液 E0.95% NaCl溶液12静电引力大小DA和两个电荷的距离成正比 B和两个电荷的距离的平方成比C和两个电荷的距离成反比 D和两个电荷的距离的平方成反比 E和两个电荷的距离平方不成比例关系13抗原抗体反应比例不合适出现的沉淀物减少的现象称为C A前带 B后带 C带现象 D等价带 E等电点14由于抗原过量导致抗原抗体结合物减少的现象为B A前带 B后带 C带现象 D等价带 E等电点15由于抗体过量导致抗原抗体结合物减少的现象为A A前带 B后带 C带现象 D等价带 E等电点16有关交叉反应的描述，正确的是B A为非特异性抗原抗体反应 B由于不同抗原分子上存在共同抗原表位所致 C对免疫学诊断结果判断没影响 D利用交叉反应进行诊断典型例子是肥达试验 E利用交叉反应进行诊断典型例子是库姆试验17抗原抗体结合反应最终出现肉眼可见沉淀现象，其原因是A A从亲水胶体变为疏水胶体 B从疏水胶体变为亲水胶体 C抗原抗体结合反应导致蛋白变性所致 D抗原抗体结合作用和盐析作用共同作用所致 E蛋白质盐析所致18一般抗原抗体反应的最适温度为A A37 B25 C4 D56 E4519 平衡常数K是表示抗原抗体反应的D A特异性 B亲合性 C比例性 D可逆性 E非特异性20抗原抗体反应的最适pH值是C A34 B510 C69 D910 E1012 21下列关于抗原抗体反应的特点表述，正确的是C A抗原抗体反应有交叉反应，故抗原抗体反应特异性不强 B抗原抗体反应必须在抗体量略大于抗原量时，形成的复合物最大 C抗原抗体反应形成的复合物又可解离为游离的抗原与抗体 D抗体与抗原结合牢固，不易被解离 E抗原抗体反应分为两个阶段，两个阶段之间有明显的界限22下列哪类抗体与相应抗原表位的亲和力最强B AIgG类 BIgM类 CIgA类 DIgE EIgD 23利用抗原抗体反应的可逆性原理设计的免疫学技术是E A酶免疫技术 B放射免疫技术 C金免疫技术D荧光免疫技术 E亲合层析技术24影响抗原抗体反应速度的因素是C A电解质 BpH值 C温度 D抗体特异性 E抗原表位的数量25下列哪种不属于抗原抗体反应的影响因素中反应物自身的因素C A抗原的性质 B抗体的亲和力 C电解质 D抗体的浓度 E抗体的特异性二、填空题1抗原抗体反应的特点有（ 特异性）、（ 比例性 ）和（ 可逆性 ）。2抗原抗体反应的温度一般以（ 1540 ）为宜，最适温度为（ 37 ）。3影响抗原抗体反应的环境因素主要有（ 电解质）、（ pH ）与（ 温度 ）。4某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求，如冷凝集素在（ 4 ）左右与红细胞结合最好，（ 20 ）以上反而解离。5抗原抗体的结合分子间的引力包括（ 静电引力 ）、（ 范德华引力 ）、（ 氢键引力 ）和（ 疏水作用力 ） 三、名词解释 1抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。它既可以发生在体内，也可以发生在体外。 2静电引力：是指抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。又称为库伦引力。 3范德华引力：原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时，因两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。又称分子间引力。 4氢键结合力：是供氢体上的氢原子与氢受体原子间的引力。如分子中的氢原子和 电负性大的氮、氧等原子相互吸引的力。当具有亲水基团(如一0H，一NH2及一C00H) 的抗体与相对应的抗原彼此接近时，相互间即可形成氢键，使抗原与抗体相互结合。氢键结合力较范登华引力强。 5疏水作用力：在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子排斥而趋向聚集 而产生的力称为疏水作用力。当抗原表位与抗体超变区靠近时，相互间正、负极性消失， 亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，使抗原抗体进一步相互吸引，从而促进其 相互结合。疏水作用力是这些力中最强的，对维系抗原抗体结合作用最大。 6等价带：抗原抗体反应曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围，称为抗原抗体反应的等价带。在此范围内，抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多。 7带现象：在抗原抗体反应等价带前后，由于抗体或抗原过量，上清液中可测出游离的抗体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反应，这种现象称为带现象。 8前带现象：抗原抗体反应当抗体量过时、不出现可见反应，称为前带现象。 9后带现象：抗原抗体反应当抗原量过剩时、不出现可见反应，称为后带现象。 10抗体亲和力：是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。四、问答题1简述抗原抗体反应的原理。DA抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合。2 简述抗原抗体反应的类型。DA抗原抗体反应分为五种类型：颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；免疫标记的抗原抗体反应等3 什么是带现象?DA在抗原抗体反应等价带前后，由于抗体或抗原过量(形成前带或后带)，上清液中可测出游离的抗体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反应，这种现象在做血清学试验时称为带现象。4影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素? DA环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：电解质：常用O85氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为68时进行；温度：一般以15，40为宜，最佳反应温度为37。第三章 免疫原和抗血清的制备第四章 特异性抗体的制备技术 一、目的要求掌握：抗原和抗体的概念类型、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理；熟悉：常用颗粒性和蛋白质抗原制备的方法、多克隆抗体制备的影响因素，常用佐剂种类；了解：抗血清的鉴定，基因工程抗体的类型。 二、教学内容1常见免疫原的种类和制备及佐剂。2免疫血清的制备，抗血清的鉴定与保存。3单克隆抗体制备技术。4基因工程抗体技术。(一)单项选择题(A型题)1 配制绵羊红细胞免疫原一般细胞浓度为D A102ml B104m1 C 105ml D106ml E108ml2 细菌鞭毛免疫原常规的制备方法A A 05甲醛处理 B100加温2h处理 C1氯化钙处理 D 75乙醇处理 E2氯仿处理3 细菌的菌体免疫原常规的制备方法B A75乙醇处理 B100加温2h处理 C05甲醛处理 D1氯化钙处理 E2氯仿处理4 要从组织和细胞匀浆中粗提某种蛋白抗原，最常用又简便的分离方法A A盐析法 B 凝胶过滤法 C离子交换层析法 D免疫亲和层析法 E免疫电泳法5制备人工抗原时，最常用于偶联半抗原的载体DA免疫球蛋白 B人甲状腺球蛋白 C人血清白蛋白D牛血清白蛋白 E葡萄球菌A蛋白6蛋白质抗原首次免疫接种后，最好间隔多长时间再进行第二次免疫BA710天 B10一20 天 C2030天 D3060天 E3个月7鉴定抗体的效价，常用下列哪一种方法CA间接凝集试验 B单向免疫扩散法 C双向免疫扩散法D免疫亲和层析法 E聚丙烯酰胺凝胶电泳法8纯化特异性抗体时，可采用下列哪种方法除去杂抗体DA盐析法 B凝胶过滤法 C离子交换层析法D免疫亲和层析法 E免疫电泳法9根据抗原分子所带电荷不同进行分离纯化的方法称为CA盐析法 B凝胶过滤法 C离子交换层析法D免疫亲和层析法 E免疫电泳法10单克隆抗体目前效果较好的纯化方法A A亲和层析法 B凝胶过滤法 C离子交换层析法 D超速离心法 E盐析法11完全佐剂的组成E A液体石蜡+羊毛脂 B羊毛脂+氢氧化铝 C液体石蜡+卡介苗+氢氧化铝 D卡介苗+氢氧化铝+羊毛脂 E卡介苗+液体石蜡+羊毛脂12要使半抗原与载体结合具有免疫原性、半抗原分子的数目数至少要达到C A10个以上 B15个以上 C20个以上 D50个以上 E100个以上13颗粒性抗原免疫接种方法一般采用B A淋巴结注射 B静脉注射 C皮内注射 D皮下注射 E肌肉内注射14免疫小鼠采血通常采用D A心脏采血或断尾法 B颈动脉放血或断尾法C颈静脉或摘除眼球采血 D摘除眼球或断尾法 E耳静脉采血或摘除眼球15较长时间(45年)保存抗体，通常采用E A4保存 B一10保存 C一20保存 D一30保存 E真空干燥保存16在HAT选择培养基中可长期存活者是B A细胞多聚体 B融合的脾细胞与瘤细胞 C融合的瘤细胞与瘤细胞 D未融合的瘤细胞 E未融合的脾细胞17属于颗粒性抗原的是EA脂多糖 B球蛋白 C白蛋白DDNA E血小板18属于可溶性抗原的是DA荚膜 B菌毛 C鞭毛DIgG ESRBC19最常用的半抗原载体为AA牛血清白蛋白 B牛甲状腺球蛋白 C人血清白蛋白D人甲状腺球蛋白 E球蛋白20亲合层析支持物最常用的是BAsepharose2B Bsepharose4B Csepharose6BD多孔玻璃球E琼脂粉21破碎组织细胞制备蛋白质抗原最常用的方法为AA反复冻融法B超声破碎法C表面活性剂处理法D自溶法E酶处理法22连接在载体上的半抗原数目应在多少以上,才能有效地产生抗体?EA4 B8 C10D15 E2023制备抗重链血清时,用于裂解免疫球蛋白的酶最好选用AA木瓜蛋白酶B胃蛋白酶C胰蛋白酶D限制性核酸内切酶E胰肽酶24某抗原需制备10ml抗血清,应选择何种动物AA家兔B小白鼠C马D绵羊E猴25可有效激发机体抗肿瘤效应的佐剂为CA福氏佐剂B胞壁肽C细胞因子D羊毛脂E多聚核苷酸26从免疫血清中粗提球蛋白最简便的方法为EA亲合层析B离子交换层析C凝胶过滤D超速离心E硫酸铵盐析27具有免疫原性的佐剂为AA脂多糖B氢氧化铝C石蜡油D羊毛脂E多聚核苷酸28免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为AA福氏完全佐剂B福氏不完全佐剂C细胞因子佐剂D内毒素E多聚核苷酸29制备人血清蛋白与福氏完全佐剂的乳化抗原时,两者比例最好为AA1:1 B2:1 C3:1D4:1 E05:130某免疫原有10g,制备抗血清应选择哪种途径免疫AA淋巴结内注射B皮内注射C腹腔注射D肌肉注射E静脉注射31首次与第二次免疫接种的时间间隔最好为CA1W 内 B710 天C1020 天D2030 天 E30 天以上32第二次免疫接种后,免疫接种的间隔时间最好为BA1W 内 B710 天C1020 天D2030 天 E30 天以上33分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法为AA超速离心法B低速离心法C高速离心法D选择性沉淀法E凝胶过滤法34免疫小鼠的采血方法常为DA静脉采血法B心脏采血法C颈动脉放血法D断眼法或摘除眼球法E股动脉放血法35制备针对伤寒沙门菌H 抗原的抗血清常选用的接种途径为AA静脉注射B淋巴结注射 C腹腔注射D皮内注射E肌肉注射36厂家生产的抗IgG制剂一般的保存方法为CA液体4保存 B液体-20保存C真空干燥保存D25保存E加叠氮钠保存二、填空题1 根据抗体制备的技术方法不同进行区分，人工制备的抗体可分为( 多克隆抗体 ), ( 单克隆抗体 )和( 基因工程抗体 )三大类型。2抗血清鉴定的主要内容包括( 抗体效价 )、( 抗体特异性 )、( 抗体纯度 )、( 抗体亲和力 )等四个方面。3制备特异性免疫血清时，常用( 亲和层析法 )和( 吸附法 )两种方法去除杂抗体。4HAT培养基中三种关键成分是( 次黄嘌呤 )、( 氨基蝶呤 )和( 胸腺嘧啶 )。5单克隆抗体的批量生产方法主要有两种( 小鼠体内诱生法 )和( 体外增殖培养法 )。三、名词解释1单克隆抗体：是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体，具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。2佐剂：是指先于抗原或与抗原一起注入机体，能够增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。3基因工程抗体：是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配，经导人适当的受体细胞后重新表达的抗体，主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。4嵌合抗体：又称人一鼠嵌合抗体，是从杂交瘤细胞中分离出鼠源单抗功能性V区基因，经基因重组与人抗体C区基因连接成嵌合基因后，插入适当的表达载体中，再共同转染宿主细胞，表达人一鼠嵌合抗体分子。嵌合抗体保留了单抗对抗原的特异亲和性，又含有人抗体C区的成分及其功能。5改形抗体：是应用基因工程技术在嵌合抗体基础上用人抗体可变区的骨架区序列取代鼠源单抗CDR以外的骨架区序列，重新构成既有鼠源单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体，该抗体对人体几乎无免疫原性。6双特异性抗体：又称双功能抗体，它不同于天然抗体，其两个抗原结合部位具有不同的特异性，可以同时与两种不同特异性的抗原发生结合。四、问答题1简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。DA单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。2 试述免疫血清应如何进行纯化。DA免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。3叙述杂交瘤技术的基本原理。DA杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。第五章凝集反应 一、目的要求 掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。 二、教学内容 1凝集反应的特点与类型。 2直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。 3间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。 4自身红细胞凝集试验。 5抗球蛋白试验。一、选择题(一)单项选择题(A型题)1_直接抗球蛋白实验用于检测C A血清中结合的抗体 B血清中游离的不完全抗体 C红细胞表面结合的不完全抗体 D红细胞表面结合的完全抗体 E血清中游离的完全抗体2玻片凝集试验B A只能检测抗原，不能检测抗体 B既能检测抗原，又能检测抗体 C只能检测抗体，不能检测抗原 D为半定量实验 E不能用于ABO血型鉴定3下列哪一项不属于玻片凝集试验E A菌种鉴定 B血清学分型 C人类ABO血型鉴定 D受检者未致敏红细胞 E受检者致敏红细胞4试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象CA + B +或+ C + D + E +5间接抗球蛋白实验用于检测B A血清中结合的抗体 B血清中游离的不完全抗体 C红细胞表面结合的不完全抗体 D红细胞表面结合的完全抗体 E血清中游离的完全抗体6协同凝集试验所用的载体是E A新鲜红细胞 B洗涤红细胞 C醛化红细胞 D聚苯乙烯颗粒 E金黄色葡萄球菌7自身红细胞凝集试验红细胞是D A标准新鲜红细胞 B标准洗涤红细胞 C标准醛化红细胞 D受检者未致敏红细胞E受检者致敏红细胞8关于醛化红细胞，说法错误的是CA保存时间较长 B血凝反应效果较新鲜红细胞强 C可反复冻融不易破碎D能耐60加热 E有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力9下列试验不属于凝集试验的是CA外斐试验 B肥达试验 CRPR DTRUST EMHA-TA10关于凝集反应，说法正确的是AAIgM 类抗体的作用比IgG 类抗体要强BIgM 类抗体常出现不完全反应CIgG 类抗体不易出现不完全反应D反应的发生可分为四个阶段E可进行定量检测11在实验时为促使凝集现象的出现，下列措施无效的是DA离心 B增加电解质或蛋白质C加入右旋糖苷或葡聚糖 D胰酶处理 E加入抗原12关于正向间接凝集试验说法错误的是DA抗原致敏载体 B用于检测标本中抗体C出现凝集为阴性 D敏感性高 E特异性强13 关于反向间接凝集试验说法错误的是CA抗体致敏载体 B用于检测标本中抗原C现凝集为阴性 D感性高 E异性强14 关于正向间接凝集抑制试验说法错误的是BA检测标本中抗原 B出现凝集为阳性C抗体为诊断试剂 D原致敏载体E不出现凝集为阳性1关于反向间接凝集抑制试验说法错误的是DA抗体致敏载体 B抗原为诊断试剂C检测抗体 D出现凝集为阳性E不出现凝集为阳性16关于SPA说法错误的是CA为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分 B能与IgG的Fc 段结合C能与IgG的F(ab)2 段结合 D不能与IgG3 结合E与IgG 结合后不影响其活性17 关于间接血凝试验说法错误的是BA 红细胞作为载体 B 不能检测抗原C 可检测抗体 D 可判断阳性反应的强弱E 应用广泛18关于胶乳凝集试验，说法错误的是EA 是一种间接凝集试验 B 敏感性较血凝试验要高C 可进行定性检测 D 可进行半定量检测E 可进行定量检测19关于明胶凝集试验，说法错误的是BA抗原致敏载体检测抗体 B抗体致敏载体检测抗原C是一种间接凝集试验 D凝集为阳性E常常用于检测病毒20间接凝集反应不能检测CA抗体 BAFP 抗原C伤寒沙门菌菌体抗原 D类风湿因子EHCG 抗原21关于自身红细胞凝集试验，说法错误的是AA红细胞为致敏载体 B可检测抗体C可检测抗原 D诊断试剂为抗O 型红细胞的单克隆抗体E检测标本为全血22关于直接Coombs试验，说法错误的是AA检测血清中游离的不完全抗体 B可定性检测C可作半定量分析 D可用于新生儿溶血检测E可用于自身免疫性溶血性贫血的检测23关于间接Coombs试验，说法错误的是AA检测红细胞上的不完全抗体 B出现凝集为阳性C抗原致敏红细胞 D用于检测母体Rh抗体E可检测因红细胞不相容性输血而产生的血型24抗球蛋白试验不能应用于BA配血试验 B立克次体的抗原检查C诊断新生儿溶血性贫血性疾病 D细菌的不完全抗体的检测E抗D 抗体25关于协同凝集试验，说法错误的是EA致敏颗粒为金黄色葡萄球菌 B桥连物为SPAC检测抗原 D是一种反向间接凝集试验E抗体为IgM 类二、填空题1凝集反应的类型分为( 直接凝集反应 )和( 间接凝集反应 )两种类型。2. 间接凝集反应的类型包括( 正向间接凝集反应 )、( 反向间接凝集反应 )、( 间接凝集抑制反应 )和( 协同凝集反应 )四 种类型。3参与凝集反应中的抗原称为( 凝集原 )，抗体称为( 凝集素 ) 试验有( 玻片法 )和( 试管法 )两种方法。4在间接凝集反应中，正向凝集反应是用( 抗原 )致敏载体以检测标本中相应的( 抗体 )；而反向间接凝集反应是用( 抗体 )致敏载体以检测标本中相应的( 抗原 )。5间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的( 不完全抗体 )；可用于输血前的( 交叉配血 )试验。三、名词解释 1滴度(效价)：血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应，以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度(效价)。 2凝集反应：凝集反应是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成凝集的现象。现也指颗粒化抗原或抗体与相应抗体或抗原的反应。 3直接凝集反应：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。 4凝集原：指凝集反应中的抗原。 5凝集素：指凝集反应中的抗体。 6试管凝集试验：是在试管内颗粒性抗原与相应抗体直接结合，在一定条件下，会出现肉眼可见的凝集现象。 7间接凝集反应：将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象称间接凝集反应或被动凝集反应(passive agglutination test)。四、问答题1简述间接血凝试验的基本原理。DA间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验。2简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。DA Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。3抗球蛋白试验主要应用于那些方面？DA输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。血型抗原抗体的检查：主要检查Rh 者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。4什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？DA协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含有A蛋白（SPA），SPA 能与特异性抗体IgG 的Fc段结合（IgG3除外）。抗体的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍保持与相应抗原特异性结合的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的检测。5何谓间接凝集反应？DA将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性的凝集现象，称为间接凝集反应（inderect agglutination）。五、论述题1间接凝集反应如何进行分类？各试验的原理是什么DA间接凝集应有多种分类方法，根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据载体种类，分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与标本中的抗体反应，通过抗体桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块，为阳性反应。反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待检抗原反应，通过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集为阳性。临床上用于检测HbsAg、AFP 等。间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体试剂相反应，然后加入致敏抗原，若出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原，抗体试剂未被结合，仍与载体上的抗原起反应。如未出现凝集现象，则说明待检标本中含有相应抗原，凝集反应被抑制。同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂，检测标本中的抗体，称为反向间接凝集试验。协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似，但所用载体为金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合（IgG3除外），抗体的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验，用已知的抗原或抗体致敏红细胞，然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应，出现红细胞凝集者为阳性。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。第六章沉淀反应一、目的要求掌握：凝胶内沉淀试验、免疫浊度分析、免疫电泳法的原理；熟悉：凝胶内沉淀试验、免疫浊度分析、免疫电泳的应用；了解：液相沉淀试验的原理，各种沉淀反应方法的技术要点和影响因素。二、教学