蛋黄油的提取

学 士 学 位 论 文系 别： 生 命 科 学 系 学科专业： 食品科学与工程 姓 名： 何 平 运 城 学 院2010 年 6 月 乙醇提取蛋黄油的工艺研究系 别： 生 命 科 学 系 学科专业： 食品科学与工程 姓 名： 何 平 指导教师： 杨 兆 艳 运 城 学 院 2010 年6 月乙醇提取蛋黄油的工艺研究何平（运城学院 生命科学系 山西运城 044000）摘要：为了高效利用鸡蛋资源以及更好的开发鸡蛋黄脂质产品，本试验分别采用乙醇萃取法和氯仿甲醇提取法提取蛋黄粉中的蛋黄油，研究了不同工艺参数对蛋黄油得率的影响。试验表明：乙醇提取的蛋黄油成品质量、得率都明显高于氯仿甲醇提取的蛋黄油。乙醇萃取蛋黄油试验中，温度、作用时间和料液比是影响蛋黄油得率的主要因素。随着温度的升高，蛋黄油的得率呈现先上升后下降的趋势，在50时达到峰值；随着时间的延长，蛋黄油的得率也是呈现先上升后下降的趋势，在30min的时得率最高；而料液比方面，蛋黄油的得率随着乙醇添加量的增加不断地增大。最后通过正交试验确定了最佳的萃取条件：温度为50，提取时间为25min，料液比为1：20g/ml。关键词： 蛋黄粉； 蛋黄油； 乙醇；氯仿甲醇。Study on Extraction of Lipids from Egg Yolk with Ethanol He Ping(Department of Life Sciences, Yuncheng College, Yuncheng 044000)Abstract：In order to use egg yolk resources efficiently and development better yolk lipid products,Oil was extracted from egg yolk powder by means of ethanol extraction and chloroform-methanol extraction respectively In this paper , and the parameters on the yield of yolk oil were studied. The result showed that temperature, concentration and the quantity of ethanol added were the major factors affecting the yield of yolk . As the temperature increasing, egg yolk lipids extraction ratio rised and then decreased in 50 ;With the extension of time, it was like temperature, when 30min it turned up the highest value ; Rather than the quantity of ethanol , the yield of butter with the increased of adding amount of alcohol increases ceaselessly. Finally it was determined that the best extraction conditions was： temperature 50, time 25min and liquid-soil ratio 1：20g/ml.Key words： egg yolk powder egg Yolk Lipids ethanol chloroform- methanol 目 录第1章 绪 论11.1鸡蛋的简介11.1.1鸡蛋的组成11.1.2鸡蛋的营养成分21.1.3鸡蛋的营养价值21.1.4鸡蛋的保健功能31.1.5食疗价值31.2蛋黄油的简介31.2.1蛋黄油的成分及功能特性31.2.2蛋黄油的应用41.3蛋黄油的提取方法41.3.1干馏法41.3.2有机溶剂法41.3.3超临界CO2萃取法51.3.4酶法51.4研究内容51.5立题背景与意义61.5.1立题背景61.5.2立题意义6第2章 材料与方法72.1试验材料与设备72.1.1原料72.1.2试剂72.1.3仪器与设备72.2试验方法72.2.1蛋黄油的提取工艺流程72.2.2操作要点82.3分析方法82.4试验内容82.4.1单因素试验(乙醇萃取法）82.4.2正交试验（乙醇萃取法）92.4.3对比试验(氯仿甲醇法)9第3章 结果与讨论103.1单因素试验103.1.1温度对得率的影响103.1.2酒精浓度对得率的影响103.1.3酒精添加量对得率的影响113.1.4作用时间对得率的影响113.2正交试验123.3对比试验13第4章 结论与展望144.1结论144.2展望14致谢15参考文献16第1章 绪 论1.1鸡蛋的简介1.1.1鸡蛋的组成图1.1 鸡蛋结构图鸡蛋主要可分为三部分：蛋壳、蛋白及蛋黄。a.蛋壳：完整的蛋壳呈椭圆形，约占全蛋体积的11%11.5%。蛋壳又可分为壳上膜、壳下皮、气室。壳上膜：即在蛋壳外面，一层不透明、无结构的膜；作用是避免蛋品水份蒸发。壳下皮：在蛋壳里面的薄膜，共二层；空气能自由通过此膜。气室：二层壳下皮之间的空隙；若蛋内水分遗失，气室会不断地增大。 b.蛋白：蛋白是壳下皮内半流动的胶状物质，体积约占全蛋的57%58.5，主要是卵白蛋白。蛋白中约含蛋白质12。蛋白中还含有一定量的核黄素、尼克酸、生物素和钙、磷、铁等物质。蛋白又分浓蛋白，稀蛋白。浓蛋白：靠近蛋黄的部分蛋白，浓度较高。 稀蛋白：靠近蛋壳的部分蛋白，浓度较稀。c.蛋黄：蛋黄多居于蛋白的中央，由系带悬于两极。蛋黄体积约全蛋的3032，主要组成物质为蛋黄磷蛋白，另外脂肪含量为28.2，脂肪多属于磷脂类中的卵磷脂。对人类的营养方面，蛋黄含有丰富的维生素A和维生素D，且含有较高的铁、磷、硫和钙等矿物质。蛋黄内有胚盘。胚盘：在蛋黄表面的一白点，受精蛋的胚珠直径约3毫米，未受精蛋的胚珠更小。1.1.2鸡蛋的营养成分表1.1 每100克鸡蛋的营养成分成分含量成分含量蛋白质14.7g镁10mg脂肪11g铁2mg碳水化合物2.8g锌1.1mg叶酸1133g铜0.15mg胆固醇585mg锰0.04mg维生素A234g钙56mg核黄素0.27mg磷130mg维生素E1.84mg钾154g硫胺素0.11mg钠131.5mg烟酸0.2mg碘27.2mg鸡蛋是人类最好的营养来源之一，鸡蛋中含有大量的维生素和矿物质及高生物价值的蛋白质。对人而言，鸡蛋的蛋白质品质最佳，仅次于母乳。一个鸡蛋所含的热量，相当于半个苹果或半杯牛奶的热量，但是它还拥有8%的磷、4%的锌、4%的铁、12.6%的蛋白质、6%的维生素D、3%的维生素E、6%的维生素A、2%的维生素B、5%的维生素B2、4%的维生素B6。这些营养都是人体必不可少的，它们起着极其重要的作用，如修复人体组织、形成新的组织、消耗能量和参与复杂的新陈代谢过程等。a.蛋白质：鸡蛋含丰富的优质蛋白，每100克鸡蛋含14.7克蛋白质，两只鸡蛋所含的蛋白质大致相当于50克鱼或瘦肉的蛋白质。鸡蛋蛋白质的消化率在牛奶、猪肉、牛肉和大米中也是最高的。b.脂肪：每100克鸡蛋中含脂肪11克，大多集中在蛋黄中，以不饱和脂肪酸为多，脂肪呈乳融状，易被人体吸收。c.氨基酸：鸡蛋中蛋氨酸含量特别丰富，而谷类和豆类都缺乏这种人体必需的氨基酸，所以，将鸡蛋与谷类或豆类食品混合食用，能提高后两者的生物利用率。d.其他微营养素：鸡蛋还有其它重要的微营养素，如钾、钠、镁、磷，特别是蛋黄中的铁含量很高富，但钙相对不足，所以，将奶类与鸡蛋共同食用可营养互补。鸡蛋中维生素A、B也很丰富。1.1.3鸡蛋的营养价值据分析，每一百克鸡蛋含蛋白质14.7克，主要为卵白蛋白和卵球蛋白，其中含有人体必需的8种氨基酸，并与人体蛋白的组成极为近似，人体对鸡蛋蛋白质的吸收率可高达98。每一百克鸡蛋含脂肪1115克，主要集中在蛋黄里，也极易被人体消化吸收，蛋黄中含有丰富的卵磷脂、固醇类、蛋黄素以及钙、磷、铁、维生素A、维生素D及B族维生素。这些成分对增进神经系统的功能大有裨益，因此，鸡蛋又是较好的健脑食品。鸡蛋黄中含有较多的胆固醇，每一百克可高达1705毫克，因此，不少人，特别是老年人对吃鸡蛋怀有戒心，怕吃鸡蛋引起胆固醇增高而导致动脉粥样硬化。近年来科学家们研究发现，鸡蛋中虽含有较多的胆固醇，但同时也含有丰富的卵磷脂。卵磷脂进入血液后，会使胆固醇和脂肪的颗粒变小，并使之保持悬浮状态，从而阻止胆固醇和脂肪在血管壁的沉积。因此，科学家们认为，对胆固醇正常的老年人，每天吃2个鸡蛋，其100毫升血液中的胆固醇最高增加2毫克，不会造成血管硬化。但也不应多吃，吃得太多，不利胃肠的消化，造成浪费，还会增加肝、肾负担。每人每天以吃12个鸡蛋为宜，这样既有利于消化吸收，又能满足机体的需要。鸡蛋是人类理想的天然食品，在吃法上也应注意科学。对于老年人来说，吃鸡蛋应以煮、蒸、甩为好，因为煎、炒、炸虽然好吃，但较难以消化。如将鸡蛋加工成咸蛋后，其含钙量会明显增加，可由每一百克的55毫克增加到512毫克，约为鲜蛋的10倍，特别适宜于骨质疏松的中老年人食用。还应提醒的是，切莫吃生鸡蛋，有人认为吃生鸡蛋营养好，这种看法是不科学的。1.1.4鸡蛋的保健功能鸡蛋的保健功能主要有五个方面：a.健脑益智 鸡蛋黄中的卵磷脂、甘油三脂、胆固醇和蛋黄素，对神经系统和身体发育有很大的作用。卵磷脂被人体消化后，可释放出胆碱，胆碱可改善各个年龄组的记忆力。b.保护肝脏 鸡蛋中的蛋白质对肝脏组织损伤有修复作用。蛋黄中的卵磷脂可促进肝细胞的再生。还可提高人体血浆蛋白量，增强肌体的代谢功能和免疫功能。c.防治动脉硬化 美国营养学家和医学工作者用鸡蛋来防治动脉粥样硬化，获得了出人意料惊人效果，他们从鸡蛋、核桃、猪肝中提取卵磷脂，每天给患心血管病人吃46汤匙。3个月后，患者的血清胆固醇显著下降，获得满意效果。d.预防癌症 鸡蛋中含有较多的维生素B2，维生素B2可以分解和氧化人体内的致癌物质。鸡蛋中的微量元素，如硒、锌等也都具有防癌作用。根据对全世界人类癌症死亡率进行的分析，人们发现癌症的死亡率与硒的摄入量成反比。e.延缓衰老 鸡蛋含有人体几乎所有需要的营养物质，不少长寿老人的延年益寿经验之一，就是每天必食一个鸡蛋。中国民间流传的许多养生药膳也都离不开鸡蛋。例如，何首乌煮鸡蛋，鸡蛋煮猪脑，鸡蛋粥等。1.1.5食疗价值鸡蛋性味甘平，能补阴益血，除烦安神，补脾和胃1。用于血虚所致的乳汁减少，或眩晕，夜盲；病后体虚，营养不良；阴血不足，失眠烦躁，心悸；肺胃阴伤，失音咽痛，或呕逆等。吃法很多，煎、炒、蒸、煮、冲或煮蛋花等均可。除单用外，亦可配药应用。如阴血不足，失眠心悸，可用生地黄、麦门冬、百合各12g，煎汤取汁，冲入鸡蛋搅匀服。阴虚，失音，咽痛可同冰糖冲服。1.2蛋黄油的简介1.2.1蛋黄油的成分及功能特性蛋黄油中主要成分有甘油三酯、卵磷脂、脑磷脂、甾醇和少量游离脂肪酸、色素等2。蛋黄甘油三酯：多种脂肪酸组成的一类重要有机化合物，在生理上和食用上都具有重要的意义。蛋黄甘油三酯是人类重要的营养物质。在人体代谢氧化时能产生大量的热量。甘油三酯中的亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸等在人体内不能合成，但它们又是营养上不可缺少的脂肪酸，因此必须由食物供给。亚油酸：9，12十八碳二烯酸，是分布最广，资源最为丰富的多不饱和脂肪酸，与中枢神经系统的活动、脉搏与血压的调节、前列腺素的合成、平滑肌的收缩等有关。亚油酸：有助于降低血清胆醇和抑制动脉血栓的形成，因此，在预防动脉硬化和心肌梗塞等心血管疾病方面有良好作用。值得一提的是，亚油酸在降胆固醇作用时，并不是量越多越好，一旦高于15，在降低LDL胆固醇的同时又大大降低HDL胆固醇，效果反而大为下降，因此，在总的脂肪酸的摄入量中，不宜超过152，这一点对于蛋黄中的脂质来说，亚油酸含量十分合适。花生四烯酸(ARA)：ARA具有更显著的降胆固醇作用，同时它还具有保护胃粘膜、保护肝脏、抗皮肤干癣、抑制癌细胞等生理功能，其功效超过亚油酸35倍以上。二十二碳六烯酸(DHA)：具有显著的降胆固醇、降甘油酯的功效，并具有促进神经系统发育、抗肿瘤、抗过敏、抗脂肪肝、预防老年滞呆、健脑和提高记忆力等作用3，曾风靡一时的脑黄金主要有效成分就是DHA。卵磷脂：卵磷脂本身又是天然生物化合物，具有很好的生理功能，能促进脂肪代谢，降低血清胆固醇，可使巨噬细胞数增加，吞噬功能增强，防止病原细菌扩散；并能促进血管粥样硬化斑的消散，防止血管硬化；还能增强肌肉收缩，加速表皮愈合，防止皮肤老化。脑磷脂：脑磷脂与卵磷脂并存于动物机体的组织中，它不仅是组成人体各组织器官的重要成分，而且与血液凝固有关，如血小板内能促进血液凝固的凝血激酶就是由脑磷脂与蛋白质所组成。甾醇：由其胆甾醇类中的7-去氢胆固醇及麦角甾醇等在日光作用下，可生成各种维生素D，胆甾固醇还在体内还可转化成多种重要物质，如：胆汁酸盐、肾上腺皮质激素、性激素等重要物质，因此它们都是具有重要生理功能的物质。1.2.2蛋黄油的应用在医学上，蛋黄油可作为危重病人的高营养全静脉脂肪乳剂的辅剂。还可制成药膏，对于烧伤、烫伤、痔疮、湿症、皮炎等均有很好的疗效，常用于治疗婴儿湿疹和皮肤病4，这是由于蛋黄油中含有脂肪、油酸、亚油酸，它们有疏水性，可润滑黏膜，隔绝外来的刺激减轻局部疼痛，还可提供一些必需的氨基酸5，对皮肤具有杀菌、消炎、止痛和修复表皮细胞的功能。由于蛋黄油中含有大量的不饱和脂肪酸，对人体有很高的营养价值，因此可广泛用于婴儿食品、营养食品和补品，对促进婴幼儿智力发育、提高脑细胞活力、抑制老年性痴呆症、消除食欲不振以及消化系统慢性疾病等具有很好的作用4，5。1.3蛋黄油的提取方法1.3.1干馏法该方法为我国民间常用的传统制备方法。制备步骤是：将鸡蛋煮熟后去壳取蛋黄，置锅内文火加热，待水分蒸发后再用武火，在280左右即可熬出蛋黄油，过滤装瓶备用。此法制备简便，但是出油率非常低,大约是1636，质量也很差、色泽深褐、大量生产易使环境污染。其成分基本不含磷脂，此法在高温条件下制备的蛋黄油有较高含量的致癌物苯并芘7，并且其它蛋黄成分不能利用。1.3.2有机溶剂法该方法在工业上普遍采用，其原理是根据蛋黄油不溶于水，却溶于脂肪溶剂(乙醇、三氯甲烷、乙醚等)的性质，通过湿润、渗透、分子扩散和对流扩散等作用，将蛋黄中的油脂提取出来，其实质就是油脂的萃取，故又称为萃取法，即浸出法。浸出法制油，油脂浸提法制油要求溶剂能在室温或低温下以任何比例溶解油脂，选择性良好，化学性质稳定，易从粕和油中被回收，溶剂与油料中各组分、设备材料均不发生反应，溶剂纯度高，沸点范围窄，在水中溶解度小，回收时易分离，溶剂本身无毒，呈中性，无异味，不易燃易爆，来源丰富，价格低廉8。由于溶剂的种类和萃取的条件不同，脂质的提取量和组成也有很大的差异。国外多采用混合溶剂法制备蛋黄油，例如采用正己烷一异丙醇9,10，一般得率为75，产品质量较高，但是混合溶剂相对单一溶剂而言残留更多，并具有一定的毒性。国内多采用乙醇制备，一般得率为70，其中磷脂含量较前者高，质量较好。但同样会存在溶剂残留。另外副产品蛋白块也变性严重，同时也存在溶剂残留。1.3.3超临界CO2萃取法超临界流体是指处于超过物质本身的临界温度和临界压力状态时的流体。稳定的纯物质都具有固定的临界点，包括临界压力、临界温度和临界密度。物质的临界状态是指其气态和液态共存的一种边缘状态，在此状态中，液态的密度与其饱和蒸汽的密度相同，因而界面消失11。在临界点附近，压力和温度的微小变化都可引起流体密度的很大变化，并相应表现为溶解度的变化。因此，人们可利用控制压力、温度的变化来实现萃取和分离的过程。试验和工业中常采用CO2作超临界流体萃取的溶剂，其原理是在一定压力和温度下，CO2成超临界流体后作为溶剂将油从原料中浸出，然后改变压力和温度使CO2为气态，从而使油滞留下来，达到萃取的目的。这项技术对应用于制备蛋黄油脂质而言，蛋黄磷脂质是主要产品，蛋黄油(甘油三酸酯和胆固醇)是副产品。由于超临界CO2提取技术造价高、要求以蛋黄粉为原料和所用萃取设备属高压设备。因此，生产成本相应偏高，自控要求严、半连续化生产不易规模化。此法试验研究有较多报道，大规模的工业化生产却还未实现。1.3.4酶法酶法是近年来研究和利用的一种新的提油工艺，其作用原理是通过酶的作用降解植物细胞壁或脂蛋白、脂多糖等脂类复合体，从而促使油脂的释放。酶法提油时，原料无需干燥，经酶解、离心，即可获得清油，与传统工艺相比，酶解提油工艺具有以下优点12-14：(1)能同时分离油和蛋白质，缩短了工艺路线；(2)操作条件温和，所得油和蛋白质质量较高；(3)特别适合高水分油料；(4)酶解工艺简单，所需能量少，又能对提油后的料液中的蛋白质加以进一步利用。1.4研究内容a.乙醇萃取法提取蛋黄油工艺条件的确定首先作单因素试验分别考察温度、料液比、乙醇浓度及作用时间对蛋黄油得率的影响； 然后选L9(33)作正交试验，萃取出的蛋黄油，用旋转蒸发器在60温度下蒸发掉乙醇后，在100下烘至恒重，计量。b.用氯仿甲醇法提取蛋黄油，计算出得率。c.乙醇萃取法与氯仿甲醇法提取出的蛋黄油从颜色，气味，得率三方面进行对比。1.5立题背景与意义1.5.1立题背景自1985年我国禽蛋生产总量首次超过美国，已连续10多年保持世界第一位。1995年，中国禽蛋总产量占世界禽蛋总产量的4285；1998年，中国人均禽蛋占有量已达167埏，达到发达国家水平。从结构上看，我国禽蛋生产主要以鸡蛋为主，占84，鸭蛋占12，鹅蛋约占4。由于消费和加工等原因，我国蛋品主要用于食品等行业，蛋制品市场较窄，禽蛋加工产品主要以皮蛋、咸蛋等二次加工产品为主，禽蛋的加工转化率不到5，与欧美等发达国家差距很大，美国蛋品转化率为33，欧洲为2030,日本为50%15。鸡蛋作为菜篮子工程主要项目之一，在90年代初全国各主要城市已趋于饱和，政府出资扶持和刺激养禽业发展已不大可能16。目前，我国鸡蛋主要为食用，加工率低；我国鸡蛋加工工业尚不能形成规模，加工的产品单一，技术含量低，所以一直不能在鸡蛋生产过程中起调节作用；而且鸡蛋又不便于运输，造成大规模蛋禽饲养地如东北三省等北部地区的鸡蛋供过于求，价格过于偏低，企业甚至亏损17。以上因素严重影响蛋鸡饲养者的积极性，因此开发鸡蛋精加工技术，增加蛋制品附加值，对促进蛋禽养殖业的持续稳定发展及保健食品的开发具有重要的意义。鸡蛋黄中的脂质约占其总重的30，蛋黄脂质中含有丰富的卵磷脂和不饱和脂肪酸，这是与其它动植物油脂相比的重要区别。蛋黄脂质的高营养价值，近几年来，已引起国内外医学界、营养学界和食品工业界的普遍重视。日本、美国以及前苏联等国将蛋黄油商品化，广泛地用于食品、医药、日用化工、饮料等行业，然而国内生产蛋黄脂质产品的企业却极少。我国是产蛋量最大的国家，积极开展蛋黄脂质的系列化研究，提高鸡蛋的附加值，无疑是大有裨益的17。蛋黄油中的卵磷脂具有高收集率、稳定性好，以及大豆卵磷脂所不具备的一些优点18。目前，中国的乳制品加工和消费市场的低水平、粗加工、同质化、恶性竞争情况严重，如何重新启动乳品市场的消费，寻找新的利润增长点将是中国乳业下一步发展的重点。蛋黄卵磷脂作为一种新型的功能性成分，通过添加在乳制品中，可以为消费者提供多种有益的营养成分，满足人们对健康的需求。同时，成本相对较低，如果加以合理的推广和利用，必将为乳品市场注入新的活力。但是目前，我国生产蛋黄卵磷脂的厂家很少，而且生产规模小，还未形成工业化生产规模，技术水平也落后于世界先进水平。蛋黄卵磷脂在我国的市场占有量还非常少，远远不能满足市场需要，大部分蛋黄卵磷脂特别是高纯度蛋黄卵磷脂仍然依靠进口19。1.5.2立题意义本文从节能、减排、低消耗、经济效益以及提取效果等方面考虑，对乙醇提取工艺进行改进，确定其最佳工艺，试图寻找一条适合工业化生产的工艺路线，旨在为高效利用禽蛋，尤其是蛋黄资源以及更好的开发鸡蛋黄脂质产品提供依据，这对于提高禽蛋产品的附加值，促进我国养禽业的全面健康发展起到积极的促进作用。目前，蛋黄油生产厂的生产方法各有千秋，但大多数生产厂，蛋黄油产品是生产主导产品的副产品，并且使用的溶剂大多对人体有害，附有不良气味，产品的质量低。本课题开发的蛋黄油产品是以蛋黄粉为原料，采用乙醇作为萃取剂，专一生产蛋黄油产品。其产品质量高，含有丰富有益成分，残留溶剂对人体无害，是很有发展前景的产品。15第2章 材料与方法2.1试验材料与设备2.1.1原料鸡蛋 临沂市兰山区朝丰食品加工厂2.1.2试剂表2.1 试剂种类药品名称生产厂家药品规格无水乙醇天津市大茂化学试厂AR（分析纯）95%乙醇天津市大茂化学试厂AR（分析纯）甲醇中国开封大化工试剂厂AR（分析纯）三氯甲烷天津市瑞金特有限公司AR（分析纯）石油醚(沸程6090)天津市天大化学试剂厂AR（分析纯）无水硫酸钠天津市瑞金特有限公司AR（分析纯）蒸馏水学院自备AR（分析纯）2.1.3仪器与设备表2.2 仪器种类仪器及型号生产厂家离心沉淀机 LXJ-型上海医分仪器制造有限公司电热恒温鼓风干燥箱101A-1E型 上海试验仪器总厂电子分析天平 mp120-2型 上海良平仪器、仪表有限公司电热恒温水浴锅 HHS型天津市华北试验仪器有限公司旋转蒸发仪RE-52AA上海亚荣生化仪器厂小型玻璃仪器学院自备2.2试验方法2.2.1蛋黄油的提取工艺流程a.酒精萃取法准确称量10克蛋黄粉，放入200ml的烧杯中，加入一定量的乙醇，放入规定温度的水浴锅中加热,萃取时间一到，立即倒入准备好的砂心漏斗中，进行减压抽滤，直到砂心漏斗没有滤液滴出。滤液用旋转蒸发仪在60蒸发掉乙醇，在100烘至恒重,计量20。b.氯仿甲醇法提取：准确称取样品5克,放入200毫升具塞三角瓶中入,加入60豪升氯仿甲醇混合液。接布氏漏斗,置于60度水浴中,从微沸开始计时提取1小时。回收溶剂：提取结束后,取下三角瓶,用布氏漏斗过滤,滤液用另一具塞三角瓶收集,用氯仿甲醇混合液洗涤烧瓶、滤器及滤器中的试样残渣,洗涤液并入滤液中,置于6570度水浴中回收溶剂,至三角瓶内物料显浓稠态,但不能使其干涸,冷却。萃取、定量：用移液管加入25ml乙醚，再加入15克无水硫酸钠，立刻加塞振荡10分钟，将醚层移入具塞离心管中，以3000r/min离心5 min进行分离。用移液管迅速吸取离心管中澄清的醚层10ml，于以衡重的称量瓶内，蒸发去除石油醚后，于100摄氏度烘箱中烘至衡重。2.2.2操作要点a.乙醇萃取法(1)真空抽滤后用无水乙醇洗吸滤瓶，每次10ml洗3次，洗液和滤液一起在旋转蒸发仪中蒸发。(2)旋转蒸发仪在工作中要时刻有人看守，如果乙醇沸腾，立即打开气阀，使内外压强相等。(3)真空抽滤结束后不要立即关闭开关，要拔下皮管后再关，防止倒吸。b.氯仿甲醇法(1) 提取结束后，用玻璃过滤器过滤再用溶剂洗涤烧瓶，每次5ml洗3次，然后用30ml洗涤残渣及滤器，洗涤残渣时可用玻璃棒一边搅拌试样残渣，一边用溶剂洗涤。(2) 溶剂回收至残留物尚具有一定的流动性，不能完全干涸，否则脂类难以溶解于石油醚中，从而使测定结果偏低。所以，最好在残留有适量水分时停止蒸发。(3) 在进行萃取时，无水硫酸钠必须在石油醚之后加入以免影响石油醚对脂类的溶解，其加入量可根据残留物中的水分含量来确定，一般为515g。2.3分析方法2.4试验内容2.4.1单因素试验(乙醇萃取法）a.温度对得率的影响准确称量10克蛋黄粉5份，分别放在200 ml的烧杯中，加入8ml/g的无水乙醇，分别放置在20、35、50、65、80的水浴锅中加热0.5h，萃取时间一到，立即倒入准备好的砂心漏斗中，进行减压抽滤，直到砂心漏斗没有滤液滴出。滤液用旋转蒸发仪在60蒸发掉乙醇，在100烘至恒重,计量。b.酒精浓度对得率的影响准确称量蛋黄粉10克5份，分别放入200ml的烧杯中，加入8ml/g的乙醇，乙醇的浓度分别为：60%、70%、80%、90%、100%，全部放入60的水浴锅中加热0.5h，萃取时间一到，立即倒入准备好的砂心漏斗中，进行减压抽滤，直到砂心漏斗没有滤液滴出。滤液用旋转蒸发仪在60蒸发掉乙醇，在100烘至恒重,计量。c.作用时间对得率的影响准确称量蛋黄粉10克7份，分别放入200ml的烧杯中，加入8ml/g的无水乙醇，全部放入60的水浴锅中加热，萃取时间分别为：10min、20min、30min、60min、90min、120min、150min,萃取时间一到，立即倒入准备好的砂心漏斗中，进行减压抽滤，直到砂心漏斗没有滤液滴出。滤液用旋转蒸发仪在60蒸发掉乙醇，在100烘至恒重,计量。d.料液比对得率的影响准确称量蛋黄粉10克5份，分别放入200ml的烧杯中，料液比分别为1：8g/ml、1:12g/ml、1:14g/ml、1:16g/ml、1:18g/ml、1:20g/ml、1:22g/ml、1:24g/ml，全部放入60的水浴锅中加热0.5h，萃取时间一到，立即倒入准备好的砂心漏斗中，进行减压抽滤，直到砂心漏斗没有滤液滴出。滤液用旋转蒸发仪在60蒸发掉乙醇，在100烘至恒重,计量。2.4.2正交试验（乙醇萃取法）表2.1 正交试验因素水平表水平因素A温度（）B料液比（g/ml）C时间(min)1451：19252501：20303551：21352.4.3对比试验(氯仿甲醇法)配氯仿甲醇混合液：氯仿(97%)与甲醇(96%)按2：1体积比混合。准确称取样品5克,放入200毫升具塞三角瓶中，再加入60豪升氯仿甲醇混合液。连接布氏漏斗,于60度水浴中,从微沸开始计时提取1小时。提取结束后,用布氏漏斗过滤,滤液用具塞三角瓶收集,用氯仿甲醇混合液洗涤烧瓶、滤器及滤器中的试样残渣,洗涤液并入滤液中,置于65701水浴中回收溶剂,至三角瓶内物料显浓稠态,但不能使其干涸,冷却。用移液管加入25ml乙醚，再加入15克无水硫酸钠，立刻加塞振荡10分钟，将醚层移入具塞离心管中，以3000r/min离心5 min进行分离。用移液管迅速吸取离心管中澄清的醚层10ml，于以衡重的称量瓶内，蒸发去除石油醚后，于100105烘箱中烘至衡重。水平作三个试验，计算出得率，与乙醇萃取法的结果进行对比。第3章 结果与讨论3.1单因素试验3.1.1温度对得率的影响 由上图3.1可知，温度对蛋黄油得率的影响相当明显，在所选定的参数范围内，2080之间，蛋黄油萃取率相对较高，这是因为蛋黄中的脂质大部分是以脂蛋白的形式存在的，温度的适当升高使蛋黄粉分子内部热运动加剧，有利于脂蛋白分子中脂肪与蛋白之间共价键的断裂；而当温度超过60时，脂蛋白变性，严重结块，从而阻碍乙醇与脂蛋白的结合部位的接触，最终导致蛋黄油得率降低。3.1.2乙醇浓度对得率的影响乙醇浓度对得率的影响见上图3.2，在所选定的参数范围内，蛋黄油得率随乙醇浓度的增大而增大，所以提取蛋黄油，用无水乙醇最好。试验过程中也发现无水乙醇提取物流动性极好，蛋黄粉轻度结块，乙醇浓度越低，蛋黄粉结块越严重，这是因为乙醇浓度越低，其水分越多，乙醇与酒精的相互作用促使了蛋黄粉蛋白质的变性；而且乙醇浓度越低，提取物也越粘稠，附着在器壁上。3.1.3乙醇添加量对得率的影响如图3.3所示，随着乙醇添加量的增多，蛋黄油的得率有较大提高。因为在大溶剂量的情况下，脂蛋白的结合部位大量暴露在乙醇溶剂中，便于脂质游离出来，但乙醇添加量过大时，必然造成溶剂回收量的增大。3.1.4作用时间对得率的影响在1030min内，随着作用时间的延长，蛋黄油的得率提高了，这可能是因为时间延长后，乙醇有更多的机会破坏脂质与蛋白质间的共价结合，促使脂质游离；同时也表明，60的温度下，乙醇作用30min时，脂蛋白的变性并没有加剧到影响脂质得率的程度。3.2正交试验表3.1 正交试验结果表编号A（温度）B（料液比）C（时间）蛋黄油的提取11110.61321220.62231330.61242130.62352210.62262320.62173120.60283230.61293310.612K11.8471.8371.847K21.86571.8571.845K31.8261.8451.848k10.6160.120.616k20.6220.6190.615k30.6090.6150.616R0.0130.0070.001从表3.1中各列的极差可以看出蛋黄油的得率随因素水平的变化而变化的范围，极差大的因素是主要影响因素。在蛋黄油的提取工艺试验中，RARBRC，因此温度是最主要的因素，时间对提取效的影响最小。提取蛋黄油的最佳工艺条件是A2B2C1，即：温度为50，料液比为1：19g/ml，提取时间为25min。3.3对比试验图3.5 蛋黄油成品的对比左图为氯仿甲醇法提取的蛋黄油，右图为乙醇提取法提取的蛋黄油。左边蛋黄油的颜色为黄褐色，右边为亮黄色，右边色泽明显优于左边。氯仿甲醇法提取的蛋黄油要比乙醇提取出的蛋黄油蛋腥味重。计算得到氯仿甲醇法蛋黄油得率为58%，而乙醇法蛋黄油的得率为62.2%，综合考虑乙醇萃取法优于氯仿甲醇萃取法。第4章 结论与展望4.1结论用乙醇溶剂萃取蛋黄油，产品得率高，可以达到62.2%，乙醇对蛋黄油有较好的萃取性能，在各工艺参数中，温度和料液比对蛋黄油的得率影响较大，在试验温度为50，时间为35min,料液比为1：19g/ml及无水乙醇条件下，蛋黄油得率较高。用氯仿甲醇溶剂萃取蛋黄油，产品得率只有58%，而且蛋黄油的质量也低于用乙醇提取的蛋黄油。4.2展望本论文主要是工艺的研究，相关机理方面内容有待进一步的研究探讨。致谢本论文是在杨兆艳老师的悉心指导和严格要求下完成的。从论文的选题、研究方案的设计实施、试验结果的分析到论文的撰写都倾注了导师的智慧和心血。在我的求学过程中，恩师以渊博的知识、严谨治学的态度、诲人不倦的精神和乐观豁达的胸怀指引着我；在我的思想、生活上，恩师也给了我极大的关怀，不仅教会我如何做学问，更教会了我如何做人。在此对恩师给予我的辛勤培养、无私教诲表示衷心的感谢和最诚挚的敬意!同时要感谢马国刚老师、杨萍芳老师、吴海霞老师、徐文秀老师给予的热情帮助和支持。感谢分析试验室所有同学在整个试验过程中给予的帮助与支持。感谢好友李敏、关良、孙丽霞、郑彩晶、张静雪在生活和学习方面对我的关心与支持。忠心感谢所有给与我帮助的老师、同学，谢谢你们！参考文献1王春丽，唐汉钧蛋黄油医用价值研究近