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阶段复习课专题1 答案速填 限制酶 载体 基因表达载体的构建 目的基因的检测与鉴定 转基因植物 基因工程药物 对基因改造 一 dna重组技术的基本工具1 与dna分子有关的酶 1 几种酶的比较 2 dna连接酶和dna聚合酶的区别 dna聚合酶的作用对象是游离的脱氧核苷酸 能够将游离的脱氧核苷酸连接到已存在的dna片段上 dna连接酶是连接两个已存在的dna片段成为一个整体 dna连接酶不需要模板 dna聚合酶发挥作用需要模板 dna连接酶应用于将目的基因与载体连接起来形成重组dna dna聚合酶可用于获取目的基因 2 载体 1 作用 作为运载工具 将目的基因转移到受体细胞内 利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制 2 具备的条件 能在受体细胞内稳定保存并大量复制 有多个限制酶切割位点 以便与外源基因连接 具有特殊的标记基因 以便进行筛选 3 种类 质粒 一种裸露的 结构简单 独立于细菌拟核dna之外 能够自我复制的很小的双链环状dna分子 噬菌体的衍生物 动植物病毒 特别提醒 限制酶使用的四个易错点提醒 1 限制酶断裂的是磷酸二酯键 而不是两个碱基之间的氢键 2 获取目的基因和切割载体时一般使用相同的限制酶 目的是产生相同的黏性末端以便于连接 3 获取一个目的基因需限制酶剪切两次 分别在目的基因的两端 共产生4个黏性末端或平末端 4 限制酶切割位点的选择必须保证至少一个标记基因的完整性 以便于进行筛选 训练1 下列关于各种酶作用的叙述 不正确的是 a dna连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接b rna聚合酶能与基因的特定位点结合 催化遗传信息的转录c 一种dna限制酶能识别多种核苷酸序列 切割出多种目的基因d 反转录酶可以用于获得目的基因 解析 选c dna连接酶的作用是形成磷酸二酯键 rna聚合酶能以dna的一条链为模板转录形成相应的mrna 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 并断裂特定两个核苷酸之间的磷酸二酯键 在反转录法获取目的基因时要用到反转录酶 二 基因工程的基本操作程序1 pcr技术和dna复制的比较 2 基因表达载体的构建 3 将目的基因导入受体细胞 4 目的基因的检测与鉴定 训练2 2015 汕头高二检测 在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值 下图是获得转基因莴苣的技术流程 请据图回答下列问题 1 获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和 2 过程需要的酶有 3 重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外 还必须含有启动子 终止子和 这样才能构成一个完整的基因表达载体 4 如果受体细胞c1是土壤农杆菌 则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的 使目的基因进入受体细胞c2 并将其插入到受体细胞c2中的上 使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达 形成转基因莴苣 经 过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达 在分子水平上可用法进行检测 如果出现杂交带 说明目的基因已经表达蛋白质产品 转基因莴苣培育成功 解析 1 获取目的基因的主要途径有从自然界已有的物种中分离和人工合成 2 过程为基因表达载体的构建过程 需要用到限制酶和dna连接酶 3 一个完整的基因表达载体包括目的基因 启动子 终止子和标记基因等 4 农杆菌转化法利用的是农杆菌的转化作用 将目的基因整合到受体细胞的染色体dna上 进而使目的基因能够稳定遗传和表达 在分子水平上检测目的基因是
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