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1、 名词解释 愈伤组织(callus):原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。在组织培养中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 继代培养：对来自于外植体所增殖的培养物(包括细胞、组织或其切段)通过更换新鲜培养基及不断切割或分离，进行连续多代的培养，就称为继代培养 玻璃化苗：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。其苗称为玻璃化苗。 花粉胚：用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚，发育成的植株就只有正常胚一半的染色体组，所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子。 生理隔离：植物传粉后或动物交配后，由于生理上的不协调而不能完成受精作用的现象。 种植保存：指利用天然或人工创造的适宜环境保存种植资源，使个体中所包含的遗传物质保持其遗传完整性和活力，并能通过繁殖将其遗传特性传递下去。 脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,失去原有分化状态的过程叫做脱分化。 全能性：是指干细胞具有的分化成机体所有类型细胞和形成完全胚胎的能力。 人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。 炼苗：是在保护地育苗的情况下，采取放风、降温、适当控水等措施对幼苗强行锻炼的过程，使其定植后能够迅速适应陆地的不良环境条件，缩短缓苗时间，增强对低温、大风等的抵抗能力。 再分化：已经脱分化的愈伤组织在一定条件下，再分化出胚状体，形成完整植株，这一过程叫作再分化。 褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 脱毒培养：利用组织培养技术，脱除植物细胞中的病毒，生产健康的无毒繁殖材料的过程。 胚状体：亦称体细胞胚。指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。 细胞培养：是指从体内组织取出细胞模拟体内出现环境，在无菌，适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。 原生质体培养：指已除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。 外植体：凡是用于离体培养的细胞、组织或器官。 花药培养：是用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，并连续进行有丝分裂，形成细胞团，进而形成一团无分化的薄壁组织愈伤组织，或分化成胚状体，随后使愈伤组织分化成完整的植株。 花粉培养：药中分出单个花粉粒，为获得单倍体植株接种到特定培养基上，诱导其长出愈伤组织，再将愈伤组织移植到另一种特定的培养基上含不同配比的细胞分裂素和生长素，诱导分化出根和茎、叶，成为完整的植株。 嵌合体：亦称异源嵌镶体。植物体的突变往往只影响分生组织的一部分，使突变的组织呈扇状或层状。用这种分生组织所繁殖的植物，因同时具有两个或多个遗传性状不同的组织，而表现出不同的性状和特点的现象。二、问答题1、什么是外植体褐变？防止外植体褐变的方法有哪些？ 答：褐变指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象；从理论上讲,酶促褐变可以通过以下三种方法加以抑制:一是除去引起氧化的物质氧；二是捕捉或减少聚合反应的中间产物；三是抑制有关的酶。2、 简述人工种子的制作方法、意义及尚待解决的问题？ 答：人工种子的制作方法：采用高科技手段，将其某些植物细 胞在试管中培育成胚状体，再用富含营养物质和其他必要成分 的凝胶物将胚状体包裹起来，制成人工种子；意义：（1）在无 性繁殖植物中，有可能建立一种高效快速的繁殖方法，它既能 保持原有品种的种性，又可以使之具有实生苗的复壮效应。（2） 可以对优异杂种种子不通过有性制种而快速获得大量种子，特 别是对于那些制种困难的植物更具有主要的实用意义。（3）对 于一些不能正常产生种子的特殊植物材料如三倍体、非整倍体、 工程植物等，有可能通过人工种子在短期内加大繁殖应用。（4） 与田间制种相比，可以节省制种用地，且不受季节限制，可以 实现工厂化生产，同时还避免了种子携带病原菌的危险。（5） 与利用试管苗相比，可以避免移栽困难，且可以实现机械化操 作，同时还便于储存和运输；尚待解决的问题：（1）体细胞胚 诱导及其可能发生变异（2）人工种皮还存在缺陷（3）贮藏、 发芽技术尚待解决（4）人工种子工厂化生产配套设施、及种子 成本过高。3、 脱毒培养的常规方法如何？意义何在？ 答：马铃薯易感染多种病毒，导致薯块变小、畸形、种薯退化等。实验证明，利用茎尖组织培养结合病毒检测，进行马铃薯脱毒，进而生产脱毒种薯用于生产，可有效地防止种薯退化，大幅度提高马铃薯产量。其主要脱毒方法如下：1、取材和消毒将欲脱毒地品种块茎催芽，芽长4-5cm时，剪芽并剥去外叶，自来水下冲洗40min，于无菌室内用漂白粉溶液消毒后，无菌水冲洗23次。2、剥离和接种在无菌室内，于40倍地解剖镜下，剥取带1个叶原基地茎尖，接种于MS茎尖培养基地试管中。试管中的MS茎尖培养基包括大量元素、微量元素、有机成分和生长素、细胞分裂素、蔗糖和琼脂，pH值为5.7，经高压灭菌后使用，每试管接种1个茎尖。3、培养条件接种的茎尖培养于25C、1500-3000LX光照条件下培养室内，3个月则长成3-4片叶的小植株。在无菌条件下，进行切段扩繁一次，取部分苗进行病毒检测。4、病毒检测病毒检测是茎尖脱毒不可缺少的步骤，常用鉴别寄主即指示植物或血清学方法进行检测，及时淘汰血清学阳性反应或在指示植物上有症状的茎尖苗，无任何反应的茎尖苗即脱毒苗用作繁殖。4、叙述愈伤组织发生发展的几个时期特征。 答：（1）诱导期：气体交换增加，如氧气的吸收增加RNA含量增加（增加到300%）蛋白质量增加（每个细胞的总增加量为200%）d酶活性增强（2） 分裂期：细胞的数目迅速增加 每个细胞平均鲜重下降 细胞体积小，内无液泡 d细胞的核和核仁增大到最大 e细胞中RNA含量减少，而DNA含量保持不变 f随着细胞不断分裂和生长，细胞的总干重、蛋白质和核酸含量大大增加，新细胞壁的合成极快。（3）分化期：细胞分裂部位和方向发生改变 形成瘤状或片状的分生组织结节和维管组织结节 细胞的体积相对稳定，不再