CN101822373A金耳银杏功能性食品、制备方法及用途

CN101822373A金耳银杏功能性食品、制备方法及用途 (10)申请公布号101822373A (43)申请公布日xx.09.08101822373A*101822373A* (21)申请号xx10145686.5 (22)申请日xx.04.13A23L1/29(xx.01) (71)申请人江苏大学地址21xx江苏省镇江市学府路301号 (72)发明人张志才崔凤杰林琳任晓锋 (74)专利代理机构南京知识律师事务所32207代理人汪旭东 (54)发明名称金耳银杏功能性食品、制备方法及用途 (57)摘要本发明公开了金耳银杏功能性食品，其中总黄酮含量515，萜类化合物含量16，白果酸5ppm，氢氰酸5ppm，银杏内酯520，蛋白质1530，可溶性糖10。 按下述步骤制备得到精确称取已经脱壳的白果，打浆加入110倍的水，加入蛋白酶水解16小时，加入液化酶60100水解0.55小时，加入0.15银杏叶提取物，以310接入用白果水解液经过在温度2233下连续25次扩大培养的金耳菌种(Tremellaaurantialba)，发酵培养210天；减压浓缩，烘干，粉碎，制成胶囊或冲剂。 该食品具有增强肌体免疫力，调节血糖、血脂，缓解老年性哮喘等功效。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书4页附图1页101822373A1/1页21.金耳银杏功能性食品，其特征在于其中总黄酮含量515，萜类化合物含量16，白果酸5ppm，氢氰酸5ppm，银杏内酯520，蛋白质1530，可溶性糖10；其中食品色质黄色至褐色，具有淡淡白果香味和金耳子实体香味。 2.金耳银杏功能性食品的制备方法，其特征在于是按下述步骤制备得到精确称取已经脱壳的白果，打浆加入110倍的水，升温到3070，按0.020.5加入蛋白酶水解16小时，继续升温到80120维持2100分钟，冷却到60100，加入0.22市售液化酶60100水解0.55小时，加入0.15银杏叶提取物，100130灭菌1060分钟，以310接入用白果水解液经过在温度2233下连续25次扩大培养的金耳菌种(Tremella aurantialba)，在温度2233，搅拌转速80180转/分，通风量10.311.2v/v/m发酵培养210天；发酵结束后500020000rpm打浆，减压浓缩，烘干，粉碎，制成胶囊或冲剂，其中银杏叶提取物中总黄酮化合物含量20，总萜类化合物含量5。 3.根据权利要求2所述的金耳银杏功能性食品的制备方法，其特征在于其中所述金耳菌种(Tremella aurantialba)的制备工艺金耳试管斜面菌种，接入经过1211060分钟灭菌的220的银杏白果水解液，在温度2033，搅拌转速80180转/分，通风量10.311.2v/v/m培养110天，连续25次扩大培养后可作为菌种使用。 4.根据权利要求2所述的金耳银杏功能性食品的制备方法，其特征在于其中所述所使用的蛋白酶包括风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、高效水解蛋白酶、小麦蛋白水解专用酶。 5.金耳银杏功能性食品，其特征在于该食品可以用做降血糖的保健食品。 权利要求书101822373A1/4页3金耳银杏功能性食品、制备方法及用途技术领域0001本发明涉及生物工技术领域，特指利用双酶法水解银杏白果，经过金耳发酵生产的产品金耳银杏功能性食品的方法和用途。 背景技术0002白果的主要成分是蛋白质、淀粉和脂肪，另外含有黄酮、萜类化合物、银杏酸、氢化白果酸、氢化白果亚酸、银杏醇、白果酚、五碳多糖；脂面醇瓣虞分。 我国中医古书，一直将白果列为重要药材，白果酸抑制多种杆菌及皮肤真菌，并对葡萄球菌、链球菌、白喉、炭瘟杆菌，枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、伤寒菌等都有不同程度的抑制作用。 从鲜白果中提取出来的白果酚甲，有降压作用，并且使血管的渗透性增加。 近年来各地临床试验证明，经常食用白果，可治高血压、止白带、咳锹发热；心脑血管、呼吸系统、皮肤病、牙痛等疾病，还有清热扰菌、温肺益气、扩张血管、增加血流量、定痰喘、去皱纹、防衰老、润音喉、健身美容、延年益寿等功效。 但是白果中由于含有微量的白果酚、白果酸，易导致人体食欲不振、脱皮、触痛，不等程度的肝损害、肾小球肾炎，白果酸有溶血作用引起惊厥和死亡。 由于这些副作用阻碍了白果的大量的食用。 因此采用一方面可以强化白果的药用价值，同时具有降低白果毒性的技术开发利用白果资源具有重要社会学意义，同时也会带来巨大的经济价值。 0003在银杏资源综合开发方面，国外主要集中在药剂和保健品的开发利用上，利用银杏叶为原料开发的银杏制品已达30多种，年销售额在20-40亿美元。 发展趋势仍集中在银杏叶上，一是对银杏叶有效成份的新发现和分离；二是银杏叶制剂的复配；三是银杏叶药用新功效的开发。 在叶的利用上，以采用水或乙醇等作为溶剂生产银杏叶提取物为主，产品大部分出口，少量的制成保健食品销售；也有研制出用银杏叶提取物制作专用化妆护肤品的报道。 有些地区还生产银杏叶茶和药枕。 在银杏花粉的利用上，以果用树人工授粉为主，未见银杏花粉类产品。 在果的利用上，以出口或内销干果为主，消费主要集中在餐饮行业。 国内在银杏叶果方面的专利主要在提取和功能，而利用生物工程技术转化同时转化银杏果和叶的提取物国内外还没有报道，也未查到相关专利。 如发明专利“猴头菌转化银杏叶提取物的制备方法及用途”(申请号xx10190182.3)描述了利用猴头菌转化银杏叶提取物提高发酵液的降血糖活性，没有涉及银杏果，同时也未涉及银杏毒素的降解；发明专利“一种复合银杏保健品及制备方法”(专利号99127020.7)描述了银杏提取物与其它药物复配制得保健品，该保健品具有调节血脂、保护心脑血管、延缓衰老等功效；发明专利“一种银杏食品添加剂”(申请号xx10068947.1)描述了银杏果仁与人参、枸杞和红花复配制成的食品添加剂；“银杏提取物在药物组合物制备中的应用，以及银杏提取物用作美容性治疗的方法”(申请号97192462.7)描述了用银杏的一种活性组分制作一种有免疫调节活性的组合物。 关于银杏脱毒的专利几乎全部集中在提取方法的改进，如“制备具有低含量的4-O-甲基吡哆醇和/或双黄酮的银杏提取物的改进方法”(申请号xx80013412.2)描述了利用吸附树脂和离子交换树脂降低银杏提取物中4-O-甲基吡哆醇和/或双黄酮的方法；“一种从银杏提取物中去除银杏酚酸的方法”(01133794.X)描述了采用反复萃取技术从银杏提说明书101822373A2/4页4取物中去除银杏酚酸的方法。 所能查到的银杏提取物脱毒的方法均采用化学方法。 这些方法脱毒也只能去除其中某一种毒性物质。 0004银杏叶都含有白果酸、氢化白果酸和氢化白果亚酸等毒性物质，其中白果酚和银杏酚分别为烃基取代的苯酚和间苯二酚衍生物，是银杏的主要有毒物质，它们在银杏果实中分布最多，是过多食用白果造成中毒的主要成分。 这些银杏毒素使得银杏叶果的食用量受到了一定的限制，限制了银杏叶提取物及银杏果的销售量，本技术采用生物工程技术极大的降低了银杏毒素的含量，使产品变得更加安全。 发明内容0005本发明提供的是一种金耳银杏功能性食品生产技术，该食品含有银杏活性成分(黄酮和萜类)和金耳活性成分(如多糖和蛋白质)，具有预防糖尿病、高血脂、抗氧化和增加肌体免疫力具有特效。 0006本发明金耳银杏功能性食品，特征在于采用双酶法水解银杏白果，获得银杏白果水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，其中氨基酸和肽类含量1，淀粉含量2，该水解液添加银杏叶提取物后通过金耳菌种转化、打浆、浓缩和干燥后获得金耳银杏功能性食品。 0007本发明金耳银杏功能性食品，其中总黄酮含量515，萜类化合物含量16，白果酸5ppm，氢氰酸5ppm，银杏内酯520，蛋白质1530，可溶性糖10；其中食品色质黄色至褐色，具有淡淡白果香味和金耳子实体香味。 0008本发明的金耳银杏功能性食品是按下述步骤制备得到0009精确称取已经脱壳的白果，打浆加入110倍的水，升温到3070，按0.020.5加入蛋白酶水解16小时，继续升温到80120维持2100分钟，冷却到60100，加入0.22市售液化酶60100水解0.55小时，加入0.15银杏叶提取物(总黄酮化合物含量20，总萜类化合物含量5)，100130灭菌1060分钟，以310接入用白果水解液经过在温度2233下连续25次扩大培养的金耳菌种，在温度2233，搅拌转速80180转/分，通风量10.311.2v/v/m发酵培养210天；发酵结束后500020000rpm打浆，减压浓缩，烘干，粉碎，制成胶囊或冲剂。 0010其中所述金耳菌种制备工艺金耳试管斜面菌种，接入经过1211060分钟灭菌的220的银杏白果水解液，在温度2033，搅拌转速80180转/分，通风量10.311.2v/v/m培养110天，连续25次扩大培养后可作为菌种使用。 0011所使用的蛋白酶包括风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、高效水解蛋白酶、小麦蛋白水解专用酶等。 0012本发明提供的金耳银杏功能性食品，其特征在于该食品具有降低体内氧化压力，增强肌体免疫力，调节血糖、血脂，缓解老年性哮喘等功效。 附图说明0013图1是本发明的工艺流程图。 说明书101822373A3/4页5具体实施方式0014下面结合实施例对本发明做进一步阐述0015本发明中实施例1-3中金耳斜面菌种采用PDA培养基制备。 1000mLPDA培养基含200g马铃薯提取液(去皮马铃薯切成碎片、1000mL蒸馏水煮沸30分钟，八成纱布过滤，滤液定容至1000mL，滤液即为马铃薯提取液)加入蔗糖20g、琼脂20g，煮沸待琼脂完全溶化后分装试管，塞上棉塞，121灭菌，制成斜面。 无菌接种金耳菌种，28培养7天，4冷藏待0016实施例10017精确称取已经脱壳的白果200g，加入200mL水打浆，升温到30，加入0.4g木瓜蛋白酶(广西南宁东恒华道生物科技有限公司，80万单位/g)，水解6小时，继续升温到80维持40分钟，冷却到60，加入0.4mL液化酶(无锡赛德生物工程有限公司，16万单位/mL)60水解0.5小时，加入1g银杏叶提取物，100灭菌20分钟，待用。 0018接入9mL用白果水解液培养的金耳菌种(Tremella aurantialba)，在温度22，搅拌转速80转/分，通风量10.3v/v/m发酵培养2天；发酵结束后发酵液5000rpm打浆，打浆液减压真空浓缩，残渣65烘干至恒重，烘干后粉碎即为金耳银杏发酵物。 其中所述的烘干后粉碎物为黄色，总黄酮含量10，总萜类化合物含量3.4，银杏内酯6，蛋白质15，可溶性糖10白果酸5ppm，氢氰酸5ppm。 0019其中金耳菌种制作工艺为金耳试管斜面菌种，接入经过121，10分钟灭菌的2的银杏白果水解液，在温度20，搅拌转速80转/分，通风量10.3v/v/m培养1天，连续2次扩大培养后可作为菌种使用。 0020实施例20021精确称取已经脱壳的白果200g，打浆加入1000mL水，升温到50，加入0.7g碱性蛋白酶(济宁和美生物工程有限公司)，水解3小时，继续升温到100维持40分钟，冷却到80，加入1.6mL液化酶(无锡赛德生物工程有限公司，16万单位/mL)80水解1.5小时，加入3g银杏叶提取物，120灭菌40分钟，待用。 0022接入30mL用白果水解液培养的金耳菌种，在温度26，搅拌转速120转/分，通风量10.6v/v/m发酵培养6天；发酵结束后发酵液100rpm打浆，减压浓缩浓缩残液，85烘干至恒重，烘干后粉碎即为金耳银杏发酵物。 其中金耳菌种制作工艺为金耳试管斜面菌种，接入经过121，10分钟灭菌的10的银杏白果水解液，在温度28，搅拌转速120转/分，通风量10.6v/v/m培养7天，连续4次扩大培养后可作为菌种使用。 其中烘干后粉碎物浅黄褐色，总黄酮含量6，总萜类化合物含量1.2，银杏内酯10，蛋白质23，可溶性糖10白果酸5ppm，氢氰酸5ppm。 0023实施例30024精确称取已经脱壳的白果200g，打浆加入2000mL水，升温到70，加入1g碱性蛋白酶(那种蛋白酶？)(无锡赛德生物工程有限公司，16万单位/g)，水解1小时，继续升温到120维持10分钟，冷却到100，加入20mL液化酶(江苏宜兴微生物制剂厂，10万单位/mL)，100水解5小时，加入50g银杏叶提取物，130灭菌60分钟，待用。 0025接入200mL用白果水解液连续两次培养的金耳菌种，在温度33，搅拌转速180转/分，通风量11.2v/v/m发酵培养10天；发酵结束后发酵液20000rpm打浆，减压浓缩，浓缩物100烘干至恒重，烘干后粉碎即为金耳银杏发酵物。 其中金耳菌种制作工艺为金耳说明书101822373A4/4页6试管斜面菌种，接入经过121，10分钟灭菌的3的银杏白果水解液，在温度33，搅拌转速180转/分，通风量11.2v/v/m培养10天，连续4次扩大培养后可作为菌种使用。 该发酵物为褐色，酒精度13，总黄酮含量15，总萜类化合物含量6，银杏内酯19.2，蛋白质28，可溶性糖10