使用Malvern Mastersizer 2000的PSD验证.doc

使用Malvern Mastersizer 2000的PSD(粒度分布)方法（湿法测量）的验证0 介绍为了验证PSD方法，已经使用了一些程序进行描述。由于术语定义的不同，总是引起了不同的实验室和药政部门或者部门之内的误解。在此文件中，验证相关程序中的术语和定义和ICH Q2(R1)中的一致。ICH中的验证参数如下：专属性线性（上限和下限）定量限/检测限精密度 重复性 中间精密度准确度范围耐用性关于PSD方法的这些参数的解释请参见以下段落：1. 专属性根据ICH，PSD方法不具有专属性，因为这个方法不能区分不同的化合物。实际上，专属性应该被解释成不同的状态，即基础颗粒、颗粒形状、凝聚和易碎颗粒的碎片等。专属性可以通过使用不同的方法，例如显微镜法、SEM（扫描电子显微镜）或者相似的方法进行确认。这些方法可以说明完美球形颗粒假设（激光衍射计算的基础）的有效性。2.1线性-上限根据ICH，线性是浓度和响应值之间的等比例性的量度。在PSD的测量中，它的目标是无论浓度（样品量）的多少，能够得到一个粒度测量常数，即一个斜率为0的完美直线。例如，加入样品直到模糊度达到50%左右，然后在每个浓度之间稀释5-10%。将d（0.5）对模糊度作图，理想情况下在很高的模糊度处，d(0.5)很小；而且当样品被稀释后，d(0.5)会变大直到到达一个常数水平。这是由于光在高颗粒浓度（高模糊度）时的多重散射产生的。线性范围就是d(0.5)到达常数时的范围。此程序可以被用来设置模糊度范围的上限。2.2 线性-下限线性的下限可以被定义为信号与背景的比值。在Malvern软件的“DATA(M)”表格中，信号是被背景覆盖的。在这里可以看到信号比背景响应值大多少。信号的最高检测器数值可以用来和同一检测器的背景数值进行比较。这2个的比值就是信号/背景比（和S/N一致）。此数据的可接受标准可以作为模糊度范围的下限。此背景测量的响应值限度必须在SOP中设定为系统适应性参数。3.3定量限/检测限建立一个点，在此点信号值可以和背景值有很大的不同是没有意义的。因为颗粒的浓度可以是任意的。此方法中的LoD和 LoQ概念和含量确定中相似，在含量方法中LoD和 LoQ是不用确定的。因此这些参数不需要评估。4.1 精密度-重复性根据ICH，重复性是来自同一样品的一系列数据的比较。对于Malvern仪器，重复性可以通过每次样品加入后（检测周期）的一定数量的测量在d(0.1) d(0.5) 和d(0.9)处的RSD%来确认。最小标准偏差是通过优化测量时间和每次测量的拍摄数量来获得的，它是方法研发的一部分。4.2 精密度-中间精密度对于HPLC的中间精密度，包括整个装置的变化（仪器，流动相、检测员、样品制备等）。此方法的主要变化是因为样品和检测人员。通常在实验室中只有一个设备，而且有大量的分散溶液，所以这些参数在验证当中是不会改变的。此检测的限度可以在USP和EP中找到：粒度 10um：d(0.5) 10% and d (0.1 )/d (0.9) 15%粒度 10um：d(0.5) 20% and d (0.1 )/d (0.9) 30%在USP和EP中的样品数目要求分别是3和6。因此为了符合2个药典，建议使用6个样品（3个样品第一个检测员，另3个样品第二个检测员）。5.准确度使用激光衍射得到的是一个近似值除非颗粒是一个完美的球形。因此，精确度只有在测量标准品时，才对于仪器的性能有意义。例如，从Malvern厂家购买标准品。这些标准品同样用于系统适应性、校验和仪器确认。使用标准品和此方法的分散剂可以确认分散剂的折射率设定是否正确。如果此仪器使用同样的分散剂进行校验，参引最精的校验就足够了。EP和USP声称可以使用如下的限度作为定期检测限度：标准品值 10um：d(0.5) 10% and d (0.1 )/d (0.9) 15%标准品值 10um：d(0.5) 20% and d (0.1 )/d (0.9) 30%6.范围系统的检测范围就是模糊度的范围，其中d (0.5)是一个常数（线性），根据ICH指南精密度和准确度就足够了。因为准确度是使用标准品确认的，它可能使得加入的模糊度水平和真正使用的模糊度水平不同，范围也许不得不通过线性和精密度确认。如果发现线性的下限很低，模糊度范围不需要包括此下限。相反的，只要选择的限度大于下限，就可以选择此限度。对于更高的模糊度限度，可以使用相似的理由。例如，在目标模糊度的10%处测量，范围可以被设置为7.5%到12.5%，尽管下限是3%（=可接受的信号背景比）和线性（=常数模糊度）的最大点是18%。此适用范围需要归入SOP（一些文件声称范围是仪器的可测量尺寸（对于此仪器也就是 0.02到2000um），但是它取决于化合物，因此对于验证不是一个适用的定义）7. 耐用性根据ICH的说明，耐用性可以通过对于方法设定的微小的蓄意变化（仪器设定和样品制备）进行检测的。在验证中的检测，耐用性可以通过相关方法研发中的数据呈现。在耐用性检测中，可能的变化可以是：-模拟不同批号分散剂的可能变化的微小变化或折光率设定。RI需要在方法研发是测量。-5-10%的搅拌速度变化，例如1600100rpm。对于一些泵，需要每次检测。在分析方法研发是需要进行大范围的检测。-如果使用超声，考虑到到系统的总能量转换会成时间*强度（%）的比例，不同的超声时间或者强度（%），例如10%需要检测。尽管此方法的超声时间和强度（%）是固定的，可能发生微小的强度变化。-根据样品配置的设备和程序，加入表面活性剂的变化为10-25%.-在使用样品重复检测时（根据SOP的规定），样品稳定性会不同。可以使用以下时间间隔：0分钟（最初测量），5分钟以后，10分钟以后，15分钟以后和20分钟以后。d (0.1 ) ，d (0.5)和d (0.9)的参数需要在表格中标示，任何趋势都需要说明。其他可能影响验证的分析程序的性能的耐用性参数，也需要列入。8. 方法研发在方法研发中需要考虑的参数是那些不会因为仪器的拆卸也改变的参数。这些参数的例子如下：-分散介质的选择和折光率的确认。-测量时间，拍摄数量和测量周期等可能导致平均值微小差别的选择。这些设置然后需要固定并在验证过程中通过精密度-重复性的检验。-折光率的确认，如果使用Mie计算法，化合物的虚数部分的确认。-设定搅拌率来确保大客户可以跟着流动并且不出现气泡。搅拌速度的微小变化可以在耐用性下检测。-如果需要，超声的效果评估，和时间和效率（%）的选择。-使用在表格“Fit（M）”中的加权剩余，用拟合检验确认数据和计算出的PSD的相互关系。加权剩余是检测器的Fit，在这里样品被检测，所以应该尽可能的慢，