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文档简介
2011年富川县伤寒、副伤寒监测方案一、背景伤寒、副伤寒是中华人民共和国传染病防治法规定的乙类传染病,其传染性强、病程长、易复发、并发症多、疾病负担较重。多年来,富川县每年均有伤寒、副伤寒的疫情报告,并于2002年、2006年发生疫情的爆发流行。为全面掌握伤寒、副伤寒的疫情动态,及时发现传染源和外环境的污染情况,为制定防治策略和措施提供科学依据,自治区从2010年始把富川县定为伤寒、副伤寒监测点,监测期为三年。为搞好该项工作,结合富川县实际,特制定2011年富川瑶族自治县伤寒、副伤寒监测方案。二、监测目的1、及时掌握伤寒、副伤寒在我县的发病情况和流行病学特征,查明暴发、流行的主要原因;2、掌握富川县伤寒、副伤寒的病原变异、菌株耐药性的变迁情况; 3、追踪带菌者。三、监测定义(一)病例定义1、疑似病例:不明原因持续性发热或反复发热3天及以上,体温37.3,可伴头痛、乏力、腹部不适等症状,但实验室检验尚未明确的病例。2、临床诊断病例(伤寒副伤寒诊断标准WS280-2008):需同时符合以下3项:(1)不明原因持续发热;(2)特殊中毒面容(表情淡漠,呆滞),相对缓脉,皮肤玫瑰疹,肝脾肿大中的一项;(3)嗜酸性粒细胞减少或消失、白细胞总数正常或低下/肥达反应“O”抗体凝集效价180,“H”抗体凝集效价1160者。3、确诊病例(伤寒副伤寒诊断标准WS280-2008):需符合以下其中一项:(1)不明原因持续发热及恢复期血清中特异性抗体效价较急性期血清特异性抗体效价增高4倍以上;(2)不明原因持续发热及从血、骨髓、粪便、胆汁、尿中任何一种标本分离到伤寒沙门菌或副伤寒沙门菌。(二)暴发疫情定义在局部地区或单位(比如在一个自然村或一个居委会、或一个单位团体),两周内出现5例或以上的伤寒、副伤寒病例。四、监测点的确定及工作内容 根据自治区卫生厅的伤寒副伤寒监测方案的要求,综合考虑各地的地理位置、交通、人口(包括流动人口)、经济、文化和既往伤寒、副伤寒流行史等因素,选择了富川县作为自治区级监测点,开展各项监测工作。五、监测时间 本监测全年开展。六、监测内容和方法1、病例监测采集300例疑似和临床诊断病例的标本,分配在富川县人民医院、富川县民族医医院、富阳镇医院、富川县妇幼保健院、麦岭中心卫生院、朝东中心卫生院、莲山中心卫生院、葛坡卫生院、古城卫生院、柳家卫生院进行,各单位具体数量见下表。每个病例根据病程,应采集病例早期发热时的血样(成人810ml、儿童35ml),放置于常温下,填好“伤寒、副伤寒病例监测采样登记表”(附表2-1)和填好送检单。并于24小时内送至富川县疾病预防控制中心检验科进行检验(富川县人民医院、富川县民族医医院送至本单位检验科进行检验),对标本进行伤寒、副伤寒沙门菌分离和鉴定(副伤寒要明确区分甲、乙、丙型),以及肥达试验。富川县伤寒、副伤寒监测点采样任务分配表时间单位县人民医院富阳卫生院妇幼保健院县民族医医院朝东中心卫生院麦岭中心卫生院莲山中心卫生院葛坡卫生院柳家卫生院古城卫生院合计第一季度-第二季度3010103033333398第三季度5010103051551555150第四季度1010101022222252合计903030701020102010103002、重点人群监测(1)伤寒或副伤寒病原确诊病例 富川县疾控中心对在监测期间内诊治的伤寒、副伤寒病原确诊病例,选择20例伤寒、副伤寒病原确诊病例(确诊病例不足20例者,以实际确诊病例数为准),在临床治愈或出院1个月后,间隔23天,粪检两次,了解其排菌情况。发现带菌者,督促其继续治疗,并于每5天粪检1次,追踪观察带菌情况,直至连续两次粪检阴性为止。(2)饮食、供水从业人员 选择富川县高级中学、富川县第一幼儿园、富川县第二幼儿园、富川县第一中学、富川县第二中学、富川县民族中学等集体单位共75名饮食、供水从业人员作为监测对象,在311月采集两次粪便标本进行病原检测,两次检测间隔1个月,监测其带菌情况,发现阳性带菌者要及时调离治疗。重点人群监测采样后填写附表2-2,及时送当地疾病预防控制中心检验科进行检验。3、水体监测分三类进行:第一类为定期、定点水体,选择老糖厂排污口、新永街老桥东、西面排污口、富江桥东、西面排污口、风雨桥东、西面排污口7个点,在4-9月份每月2次,其他每月1次,每个点平行采集水样2份,共计105份,进行伤寒、副伤寒沙门氏菌分离;第二类为自备水源水体,对富川县高级中学、富川县一中、县一幼、葛坡初中、麦岭初中和麦岭中心校6个点的自备水源,在4-12月份每月1次,共计54份进行以检验细菌总数、总大肠菌群为主的监测;第三类为新发疫点(区)水体,根据流行病学指征,在水体消毒之前酌情对饮用水源、病家水缸水和易受污染的沟、塘、河水取样检验。水样具体采样方法见附件2。采样后填写附表2-2。4、食品标本监测在各监测点区域,有针对性对市售、食堂、餐馆等集中供应的生冷食品和熟食进行定期或不定期的抽样检查。要求监测点食物监测每年不少于100份,生冷食品和熟食各占一半,其中2、3季度各完成40%, 4季度完成20%。具体采样方法见附件2,采样登记见附表2-2。七、监测系统组成和职责(一)富川县卫生局富川县卫生局负责监测工作的组织和领导,对监测方案进行修改完善,负责组织开展本辖区内监测工作,协调各相关工作单位,保证监测工作顺利开展 ,并不定期进行现场督导和质量考核。 (二)富川县疾病预防控制中心负责监测方案的实施,对相关人员培训、暴发疫情处理,收集基本资料;按质按量完成疫情监测与报告、病例监测、重点人群监测和水体监测等任务,完成相关报表的填写、录入和报送等工作;按要求进行标本采集、实验室检测、做好试验记录和菌种的保存及上送;发现问题及时组织相关人员有针对性地讨论、分析,查找原因,及时解决;如仍不能解决或有疑问时及时报告贺州市及自治区疾病预防控制中心。(三)各有关医疗机构在当地卫生行政部门的统一领导下,配合疾病预防控制机构的各项监测工作,协助完成就诊病例的标本采集、登记、检验和个案调查工作。(四)病例监测单位:富川县人民医院、富川县民族医医院负责病例监测及伤寒、副伤寒确诊病例监测;富川县妇幼保健院、富阳镇医院、朝东中心卫生院、麦岭中心卫生院、莲山中心卫生院、葛坡卫生院、古城卫生院以及柳家卫生院负责病例监测。八、资料上报和反馈(一)上报资料内容:1、伤寒、副伤寒病例监测采样登记表(附表2-1)2、伤寒、副伤寒监测月报表(附表3-1)3、伤寒、副伤寒病原检测及肥达试验阳性结果月报表(附表3-2)4、伤寒、副伤寒监测菌株移交登记表(附表5)5、暴发疫情调查报告6、年度监测计划和总结(二)资料上报时限与反馈监测工作中规定的各类报表,各医疗监测点单位要分月报通过电子邮件形式于次月5日前上报至县疾控中心流行病科;县疾控中心以电子邮件形式将病例监测采样登记表、月报表、菌株移交登记表于次月10日前、年度计划于当年1月15日前、年度总结于次年1月31日前上报广西区疾病预防控制中心细菌性疾病防制科;暴发疫情处理报告要求在疫情处理期间和处理后以书面和电子文件形式及时上报自治区、市(县)卫生行政部门和自治区、市疾病预防控制中心,同时要将个案调查资料及时录入数据库,并及时上报自治区疾控中心细菌性疾病防制科。 九、经费使用管理2011年肠道传染病经费40000元,根据2011年富川县辖区伤寒、副伤寒监测工作的需要,预算使用情况如下: 1、病例监测 本年度总计监测300例疑似和临床诊断病例。标本采集并上送费共6800元;驻县城的医疗单位采集并上送合格血标本补助每份20元、驻乡镇的卫生院采集并上送合格血标本补助每份30元。检验每份10元,检验费共计3000元,总计共需经费9800元。2、重点人群监测 采集饮食、供水从业人员粪便标本150份。标本采集每份30元,共计4500元;检验每份10元,共计1500元;总计共需经费6000元。3、水体监测 一类水105份、二类水54份、三类水10份,共需采集25次,每次补助100元,共计2500元;检验费每份5元,共计845元;总计共需经费3345元。 4、食品标本监测 购买食品标本100份;采样每份补助5元,共计500元;购买食物每份250-500g,每份15元,共计1500元;检验每份10元,共计1000元。总计共需经费3000元,5、病例追踪 要求追踪至少20例伤寒、副伤寒病例,每例100元,共需经费2000元。6、试剂 培养瓶、试剂耗材共4000元。7、培训费 举办年富川县辖区伤寒、副伤寒监测培训班需经费4000元。8、交通费 共需3000元。9、督导费 上级和本级对监测点督导,需经费4855元。十、联系方式:联系人:县疾控中心流行病科电话、传真县疾控中心微生物检验科电话电子信箱:十一、附表附表1. 伤寒、副伤寒暴发疫情流行病学个案调查表附表2-1. 伤寒、副伤寒病例监测采样登记表附表2-2. 伤寒、副伤寒重点人群、食品及外环境监测采样登记表附表3-1. 伤寒、副伤寒监测月报表 附表3-2. 伤寒、副伤寒病原检测及肥达试验阳性结果月报表附表4. 伤寒、副伤寒监测实验记录表附表5. 伤寒、副伤寒监测菌株移交登记表十二、附件附件1. 伤寒、副伤寒暴发疫情调查步骤附件2. 标本采集、分离培养和鉴定方法附件3. 菌种管理要求富川县卫生局二0一一年三月附表1 年伤寒、副伤寒暴发疫情流行病学个案调查表地区国标编码 病例编码-1一般情况1.1姓名 ,若为14岁以下儿童,家长姓名 1.2性别 男 女 1.3年龄 (岁、月) 1.4职业 幼托儿童 散居儿童 学生 教师 保育员及保姆 餐饮食品人员 公共场所服务员商务人员 医务人员 工人 民工 农民 牧民 渔(船)民(15)海员及长途驾驶员(16)公务人员及职员 离退人员 (18)家政、 家务及待业 (19)不详(20)其他 1.5文化程度 学龄前儿童 文盲 小学 初中 高中 大学及以上 不详1.6 现住址 户口地 1.7工作(学习)单位 1.8联系人 联系电话(办) (宅) (手机) 2发病情况 2.1发病日期 年 月 日 时2.2发病地点 2.3首诊时间 年 月 日 时2.4首诊单位 2.5诊断医院 2.6报告时间 年 月 日 时 2.7是否住院 是 否 2.7.1住院时间 年 月 日 时2.7.2出院时间 年 月 日 时3临床资料3.1临床表现3.1.1发热 有 无 发热持续 天 最高体温 .热型 稽留热 驰张热 不规则 3.1.2畏寒 有 无 3.1.3头痛 有 无3.1.4头晕 有 无3.1.5腹痛 有 无3.1.6腹胀 有 无3.1.7便秘 有 无3.1.8腹泻 有 无3.1.9便血 有 无3.1.10恶心 有 无3.1.11呕吐 有 无3.1.12表清淡漠 有 无3.1.13谵妄 有 无3.1.14昏迷 有 无3.1.15相对缓脉 有 无 3.1.16玫瑰疹 有 无3.1.17脾大 有 无3.1.18肝大 有 无 3.2有无下列并发症? 3.2.1肠出血 有 无 3.2.2肠穿孔 有 无 3.2.3其它(注明) 3.3病人转归 痊愈 带菌 死亡4流行病学调查4.1传染源和传播途径的追溯(病前1个月):4.1.1外出史 有 无去过何地 在该地有无下列活动 (1)住宿 有 无 (2)用餐 有 无(3)带回食品 有 无 食品名称: .4该地同样疾病 有 无4.1.2外人来家 有 无 来自何地 该地同样疾病 有 无来后有无下列活动 (1)在家住宿 有 无 (2)在家用餐 有 无(3)带来食品 有 无 食品名称: 4.1.3接触过同样患者 有 无 接触时间 年 月 日 时 接触地点 接触方式 (1)同吃 有 无 (2)同住 有 无 (3)护理 有 无 (4)其他 有 无4.2饮食情况(病前1个月) 4.2.1饮生水 有 无水源类型 井水 河水 塘水 自来水 其他 4.2.2吃生冷食品 有 无 生冷食品名称 购买地点 4.2.3熟食冷吃 有 无 熟食品名称 购买地点 4.2.4其他可疑食品名称 购买地点 4.2.5在外就餐史 有 无 就餐地点 排档 个体餐馆 宾馆餐厅 其他就餐地点名称 4.2.6同餐者 有 无同餐人数 同餐日期 年 月 日 时4.3预防接种 有 无4.3.1最近一次接种时间 年 月 日4.3.2接种 次5.实验室检查结果5.1白细胞计数、分类日期总数中性淋巴嗜酸性其它5.2培养(细菌型别)日期血粪尿其它5.3肥达氏反应日期OHABC6. 诊断依据临床 病原学 血清学 7.结论 。调查者单位: 问卷者: 审核者: 调查日期: 25附表2-1 年伤寒、副伤寒病例监测采样登记表标本编号病例分类姓名性别年龄家庭住址及联系电话 发病日期就诊日期采样日期临床表现标本名称采样医院医生签名疑似临诊发热()持续天数头痛乏力腹痛腹胀其它血血清肛拭粪便其他填表说明:病例分类在相应格内打;临床表现除发热和持续天数填数字外,其余在相应格内打;标本名称尽量详细,在相应格内打。附表2-2 年伤寒、副伤寒重点人群、食品及外环境监测采样登记表标本编号标本分类姓名/标本名称性别年龄工作地点/采样地点 采样日期采样者粪便肛拭食品水其他填表说明:1、标本分类:每份标本在相应分类栏中打,2、姓 名/标本名称:若是重点人群则写人名,若是其他标本则写名称;3、工作地点/采样地点:重点人群填写工作学习地点,其他标本填写采样地点。附表3-1 年广西伤寒、副伤寒监测月报表地 区重点人群疑似病例临床诊断病例食品定点水体自备水源肥达采样数阳性数采样数阳性数采样数阳性数采样数阳性数采样数阳性数采样数不合格数采样数阳性数伤寒甲副乙副丙副伤寒甲副乙副丙副伤寒甲副乙副丙副伤寒甲副乙副丙副伤寒甲副乙副丙副细菌总数总大肠菌群监测时间: 年 月至 年 月 填表日期: 填表单位: 填表人: 填表说明:疑似病例和临床诊断病例栏只填写病例监测标本,即血培养标本数和检验结果。附表3-2 年伤寒、副伤寒病原检测及肥达试验阳性结果月报表编号标本来源姓名/标本名称性别年龄(岁)家庭住址/采样地点发病日期就诊日期采样日期肥达试验阳性结果记录病原培养重点人群疑似病例临诊病例食品水体其他TOTHABC监测时间: 年 月至 年 月 填表日期: 填表单位: 填表人: 填表说明:1、本表只记录病原培养和肥达阳性标本数据;2、病原培养“阳性”记录病原名,如伤寒 ,甲型副伤寒,“阴性”不用填写;3、肥达阳性判断:TO180及TH1160;A1160;B1160;C1160。表格中填写具体滴度。附表4 年广西伤寒、副伤寒监测实验记录表检验号标本编号标本来源标本名称姓 名性别年龄家庭住址/采样地点发病日期就诊日期采样日期采样单位实验室检查结果血清存放位置(保留培养阳性、肥达阳性标本)剩余血清ml备注重点 人群疑似病例临诊 病例食品水体其他肥达病原(血清凝集)TOTHABC填表说明:(1)标本名称:(人)粪便,血,血清;食品-尽量写明食品名称;水-注明水源(2)血清存放位置:血清在血清盒内的位置(3)病原:(血清凝集)可在表下注明一栏内写上:血清凝结果,如A-F-O,Vi,O9附表5 年广西伤寒、副伤寒监测菌株移交登记表序号菌种号菌株型别菌株来源姓 名性别年龄家庭住址(或水、食品采样地点)发病日期采样日期分离日期保存日期保存基质和温度备注人水食品苍蝇血便监测时间: 年 月至 年 月 检测/复核单位: 接收单位: 菌株移交日期: 年 月 日 签 名: / 附件1. 伤寒、副伤寒暴发疫情调查处理步骤一、调查目的迅速查明暴发的原因,采取紧急措施,控制暴发,防止疫情蔓延。二、调查的步骤及内容 初步核实疫情 根据上报的信息,电话询问或者派出专业人员前往现场核实暴发的基本情况和分布特征,初步判定暴发的情况和严重程度。 调查准备 确定调查组人员,明确调查任务、内容与方法;准备调查表格、采样器材、诊断试剂、检测仪器、个人防护与消杀用品。 现场调查 根据拟订的调查表格,通过访问、现场调查等方式,了解患者的主要临床表现,收集当地背景资料(人口、民族、地理、经济、文化、交通等)、近期自然因素资料(自然灾害、气候条件)、社会因素资料(社会局势、生活环境、生活习俗、卫生服务设施等)、既往流行病学资料、已采取的疫情控制措施等,迅速采集必要的标本送检,同时积极救治患者。 确定病例定义 根据流行病学调查资料、患者临床表现和实验室检测结果,参照诊断标准或疫情情况,迅速确定在一定时间、地点和人群范围内疑似病例、临床诊断病例、确诊病例的定义。 主动搜索和核实病例 根据确定的病例定义,在可能的波及范围内,积极开展主动搜索,寻找传染源,及时进行病例个案调查,核实所有病例的诊断,排除混杂病例。及时将调查结果进行网络直报,经核实后排除的病例要及时作订正报告。 提出病因假设 采用描述流行病学方法,分析疫情发生和发展过程、波及范围、病例数及其在不同地点、不同时间、不同人群中的分布特征,寻找发病的暴露因素,探索可能的传染源和传播途径。 深入调查与验证假设 开展深入的分析流行病学调查如病例对照研究等,确定传染来源和传播途径,验证假设,以便进一步完善预防控制措施。三、控制措施 要遵循边调查、边调整、边控制的原则。 严格管理传染源 要对患者严格控制在指定医疗机构(医疗点)进行隔离、规范、全程治疗,严格控制陪护,防止传染源扩散和院内感染,如有必要,可设立临时隔离治疗点,对带菌者也要进行规范治疗。疾病预防控制构要对患者发病前1周以来的密切接触者(如同食、同住、同工作场所人员)或有共同暴露史者(如聚餐史、同一污染食物食用史等)应进行登记和医学观察。观察期限以最后接触之日起计算,伤寒14天,副伤寒10天;一旦出现伤寒、副伤寒早期症状,要到医疗机构隔离诊治,并及时进行血、粪培养,明确诊断。要对发现的带菌者会同医疗机构进行消菌治疗,并定期进行随访以及采集粪便送检,直到粪便检查连续两次(每次间隔23天)阴性为止,并且指导其实施餐具和排泄物消毒处理。 严格消毒 要及时对患者住所、隔离治疗场所及其周围的环境(如厕所、地面等)、患者排泄物及物品(如食具、衣物、用品等)进行随时消毒和终末消毒。 保护水源 如水源被污染,要查清污染途径,杜绝继续污染的途径;要加强饮用水源的卫生管理,并定期消毒和监测。 确保食品的卫生安全 要严格执行中华人民共和国食品卫生法,做好饮食服务行业、食品摊点、集体食堂的卫生监督管理。要加强对生、冷食品、熟肉制品卫生监督管理和对饮食服务行业、食品摊点、集体食堂工作人员的健康管理。如发现做从业人员带菌或患病,要及时调离岗位。 预防服药 仅限于对同一传染来源的可疑感染人员。应根据所分离菌株的药敏试验结果,选择敏感的抗生素进行应急性预防服药,服用的时间一般为57天。疾病预防控制机构要做好服药指征、范围和对象的指导,临床医疗机构持有执业医师资格的医生则要对不同人群服用药物的种类、用药量和使用方法等作好指导。预防服药应严格控制服用对象和范围,不能无指征的扩大服药范围,更不能在伤寒、副伤寒疫情散发地区列为常规防治措施进行普遍服药,忽视切断传播途径的措施。滥用抗生素不仅造成人力、财力的浪费,可能造成不良反应,还能使伤寒菌株产生耐药性,给伤寒、副伤寒防治工作带来严重危害。 大力开展健康教育和健康促进工作 为使群众了解伤寒、副伤寒的发病原因及防治方法,提高防病意识,要采取多种形式积极开展健康教育和健康促进工作,教育群众养成良好的卫生习惯,注意饮食卫生,便后及接触食物前必须洗手,不喝生水,不吃腐败变质食物,不食用不洁食物,不随地大小便,不乱倒垃圾等,劝阻群众不在疫区内举行大型聚餐活动,共同把好“病从口入”关。 疫区封锁 处理伤寒、副伤寒暴发疫情需要封锁疫区时,要按照中华人民共和国传染病防治法第四十二条规定执行。 应急接种,根据疫情暴发的情况,经卫生行政部门批准,在疾病预防控制部门的指导下,可在疫情暴发地区及毗邻地区的重点人群进行疫苗应急接种,以增强人群免疫力。四、调查报告调查和处理疫情的过程中,应有初始报告、进程报告。暴发疫情处理结束后,要及时收集、整理、统计、分析调查资料,对所有资料(病例和带菌者个案调查、密切接触者调查、重点人群调查、流行因素调查、实验室检测结果)等,建立数据库并及时录入,一般要求在疫情控制工作结束后7天内完成全面的结案报告。调查报告的主要内容应包括:标题、前言、背景资料、事件描述(包括疫情的发现经过、发病情况、首发病例或指示病例的描述、病例三间分布、临床特点、实验室检查结果、流行因素调查结果、传播途径分析)、控制措施及效果评价、结论、趋势分析及下一步建议等。附件2. 标本采集、分离培养和鉴定方法1. 标本采集标本采集应在2小时内用无菌方法采集新鲜标本,置于灭菌容器中或直接接种于增菌培养基中,写上标本编号和采样登记表(附表2-1、2-2)一同送到指定实验室,如不能及时送检,标本要存放在专用的标本运送箱内,包扎好以免容器破损。实验室标本检测基本程序见下图:接收标本并核对标本采样登记表(附表2-1,2-2)填写实验室记录表(附表4)标本培养,鉴定,肥达试验实验室结果报告向相关人员报告,录入数据保存菌种,血清1. 1 血液应根据病程的不同阶段采集不同标本进行检测,宜在发病早期和抗生素使用前采集。无菌采集静脉血标本,成人810mL,儿童35mL,将成人血标本48mL,儿童24 mL,立即接种已在室温(20)平衡的需氧培养瓶或胆盐葡萄糖肉汤培养瓶中,轻摇血培养瓶,使血样与培养液均匀混合。血液接种量直接影响培养的阳性检出率。不同厂商的血培养瓶对接种量要求有不同,可根据使用要求采集,宜按照要求的最大量采集和接种。已使用抗生素治疗的患者标本宜使用带抗生素吸附剂的培养基。所有情况下,接种的标本量必须做好记录。血培养瓶在室温条件下运送至实验室。采血步骤(按最大采血量描述):(1) 采血前30分钟将血培养瓶从冰箱取出放至室温。(2) 消毒(碘酒、酒精/碘伏)皮肤,待干后无菌采集10mL静脉血,先将8mL 血无菌注入血培养瓶,轻摇血培养瓶,使血样与培养液均匀混合;再将余下的血注入无菌采血管。(3) 采血前将血培养瓶保护盖打开时,注意勿使不洁物碰触瓶口,必要时用酒精消毒瓶口后,方可将血样注入瓶内。(4) 余下的2mL血沿管壁轻缓(防止溶血)注入无菌采血管(管口酒精消毒,待干),静置。如为促凝管,则反复轻缓颠倒68次,使血液与促凝剂混匀后静置,待分离血清。1. 2 血清余下的2mL病人血液(作为上述采集血液程序的一部分)及病后23周采集恢复期血液2mL,分离血清做血清学检测(肥达试验等)。 标本置室温1小时使血块完全凝固。放置时间过长会造成溶血,避免留置过夜。3000rpm离心5分钟,然后用无菌吸管小心取上清转入冻存管。避免吸取血细胞。将冻存管(做完肥达试验的血清)放进标本盒,记录剩余血清量和存放位置,放置20(40)保存。1. 3 粪便 病人宜在病程的第34周、抗菌素治疗前或停药3天后采集。带菌者以粪便培养为主。采样方法:(1)留便 用棉拭子采取自然排出的新鲜粪便23克(指甲盖大小)。(2)肛拭 用棉拭子在盐水中蘸湿后(棉拭子贴管壁挤出多余的液体),由肛门插入直肠内约35(幼儿约23)处采取,棉拭上要沾有粪便。采集的粪便标本立即放置亚硒酸氢钠增菌培养基(SF)或亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)等采样管送检,如2小时内不能送检时,将肛拭或用采样拭子沾满粪便插入运送培养基(Cary-Blair,C-B)内保存,常温条件下运送至实验室。1. 4水样标本 按伤寒、副伤寒防治手册中所述的方法进行水源标本的采集和分离培养。(1)浓缩培养基法(瓶水法) 用500 mL灭菌空盐水瓶,在选定的水源处采样450mL,避免阳光曝晒,尽快带回实验室。取10 SF 50 mL加入水样瓶中,摇匀,置37 培养1824小时。(2)纱布块法取纱布按20 20 cm大小剪好,折叠成四层,在纱布中心处拎起,用线绳将其扎住。用牛皮纸包好,高压消毒后备用。用时打开纸包将绳头拎起,让纱布自行落入水中,线头系结在木桩或树枝等上面。12天后取出,立即投入装有50 mL 2 SF增菌培养基内,摇匀,置37 培养1824小时。(3)前增菌检查法(微量法)采集污水标本10mL,加入装有 1mL 10PBS采样管中,尽快送往实验室。37 培养46小时,取出0.10.5 mL转种到10 mL SF增菌培养基中,37 培养1824小时。比较清洁的水可取450 mL加于500 mL广口瓶中,加入10PBS 50 mL,尽快送往实验室。其他步骤同微量法。(4)滤膜法 将杂质较少的被检水样100 mL,注入已灭菌的滤膜(0.45 m)滤器中抽滤后,将滤膜取下,置SF增菌培养基中,37 培养1824小时。(5)吸附沉淀法 取水样450 mL,先加入10%无菌碳酸钠溶液2 mL及10硫酸亚铁溶液1.7 mL,混匀,静置50分钟,倾去上清液,取沉淀物约4050 mL,置50100 mL 2SF增菌培养基,37培养1824小时。1. 5食品标本 固体食品需剪碎和研磨,奶和奶制品可直接取样增菌,具体操及所用的培养基、鉴定方法参考中华人民共和国国家标准(食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验)GB/ T4789.4-2003。注意事项 标本采集及标本接收时应认真核对名单及标本号,并作好收样、检测记录(附表21,2-2,4-1)。2. 分离培养2. 1 血培养 血培养瓶放在37培养箱里培养10天,每天观察生长情况,如出现混浊现象,应马上转种麦康凯/血平板,即使没有肉眼可见的生长,也必须在1、2、7天转种麦康凯/血平板。从血培养瓶中无菌吸取培养物,在麦康凯/血平板上接种2滴培养物,接种环划线。平板在培养1824h。如果没有生长,再继续培养48h。2. 2 粪便培养 增菌管37培养1824h ,挑取培养物转种到SS平板,37培养1824h,如果没有观察到有可疑菌落生长,再继续培养24h,观察结果,挑取可疑菌落。2. 3水样标本 标本增菌管/瓶经37培养1824小时后,接种到DHL/MaC和SS琼脂平板上,置37、1824小时分离培养,如果没有观察到有可疑菌落生长,再继续培养24小时。2. 4食品标本 具体操作及所用的培养基、鉴定方法参考中华人民共和国国家标准(食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验)GB/ T4789.4-2008。2. 5 菌落形态 见表1。表1 沙门菌及大肠菌在选择培养基上菌落生长特征选择性 培养基 沙门
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