肠道杆菌.ppt

1 肠道杆菌 学习要求名词解释 肥达反应掌握大肠埃希菌的致病性与卫生学意义掌握志贺菌属和沙门菌属致病物质 所致疾病 2 共同特性 1 g 杆菌 无芽胞 多数有鞭毛 菌毛 少数有荚膜 2 营养要求低 普通平板上生长良好 3 生化反应活泼鉴别肠道致病菌与非致病菌 乳糖发酵试验肠道致病菌 阴性 不分解乳糖肠道非致病菌 阳性 分解乳糖 3 共同特性 4 抗原结构 菌体 o 抗原鞭毛 h 抗原荚膜或包膜 k 抗原5 抵抗力 不强6 变异 极易变异 毒力 菌落 抗原 耐药性变异 血清型表示方式 o k h例 o111 k58 h2 5 一 大肠埃希菌 代表菌 大肠杆菌 e coli 正常菌群 宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或器官时可引起肠外感染 某些强毒力菌株可致肠内感染 大肠埃希菌数被作为环境与食品卫生检测指标 6 大肠杆菌 e coli 一 生物学性状 多数有周鞭毛 能运动有普通菌毛和性菌毛生化反应 imvic试验 imvic试验 1 吲哚试验大肠杆菌 色氨酸 吲哚 试剂 玫瑰吲哚2 甲基红试验3 vp实验4 枸橼酸盐利用试验总结 imvic试验大肠杆菌 产气杆菌 vp 吲哚 甲基红 大肠杆菌 e colicoloniesonembagar 伊红美蓝琼脂 e colicells 9 一 致病性 一 致病物质1 p菌毛 2 粘附因子3 蛋白类毒素 引起腹泻4 lps和荚膜等 10 二 所致疾病 1 肠外感染原因 大肠杆菌 寄居部位改变在肠外组织或器官引起化脓性感染 常见病 泌尿系统感染 尿道炎 膀胱炎 肾盂肾炎等 腹膜炎 胆囊炎新生儿脑膜炎 败血症等 婴幼儿和老年人 2 肠内感染 菌株致病机制所致疾病肠产毒型菌毛和肠毒素婴幼儿和旅游者腹泻肠侵袭型与痢疾类似较大儿童和成人腹泻肠致病型损害微绒毛婴幼儿腹泻肠出血型vero毒素急性出血性肠炎肠集聚型肠凝集耐热毒素婴儿持续性腹泻 各类肠道杆菌的比较 e coli0157型 2006年4月 美国食品和药物管理局数字 美国8个州暴发大肠杆菌感染 造成至少1人死亡 50人住院治疗 认定可能与居民吃了袋装的菠菜有关 因為這些食物中含有o157型的e coli 這種o157型的e coli會產生毒素 造成腸道流血 患者通常可在一週內復原 但約有7 的患者會有嚴重的失血 甚至會因而致死 o157 1996年 日本 感染万人news25thjanuary2001e colio157 h7genomesequences completed 13 三 微生物学检查 1 肠外感染 标本采集 中段尿 血液 脓液 脑脊液 涂片革兰染色镜检分离培养鉴定 标本 肉汤 血平板 imvic试验 2 肠内感染粪便或排泄物 鉴别培养基 鉴定 肠毒素及血清型检查 14 ss培养基 15 志贺菌属 痢疾杆菌 引起细菌性痢疾 通称痢疾杆菌 16 抗原与分类 根据o抗原分类 17 致病性与免疫性 1 致病物质菌毛 细菌通过菌毛粘附于回肠末端及结肠粘膜的上皮细胞表面 穿入细胞内繁殖 炎症内毒素 使肠粘膜通透性增加外毒素 志贺毒素 vero毒素 18 致病机理 痢疾杆菌 胃 小肠粘附回 结肠粘膜上皮细胞 进行细胞内繁殖 炎症局部 坏死 炎症 粘液脓血便内毒素刺激肠壁植物神经 腹痛 里急后重毒素吸收入血 毒血症 发热 休克 外毒素 毒性强 a群产生 具有神经毒性 细胞毒性 肠毒性 菌毛 19 2 所致疾病 细菌性痢疾 菌痢传染源 病人 带菌者 传染途径 粪 口 症状 1 急性菌痢 发热 腹痛腹泻 里急后重 脓血粘液便 2 急性中毒型菌痢 多见于儿童 全身中毒症状明显 肠道症状不明显 3 慢性菌痢 急性治疗不彻底转为慢性 20 三 微生物学检查 标本取脓血粘便 新鲜 不与尿混合 立即送检 选择或鉴别培养基 生化反应鉴定 血清学鉴定 急性中毒型菌痢取肛门拭子 21 沙门菌属 salmonella 仅少数对人致病 引起 伤寒副伤寒食物中毒败血症 22 伤寒杆菌的鞭毛图片由微生物学教研室提供 23 伤寒杆菌电镜照片 24 一 生物学性状 培养与生化反应对胆盐和煌绿的耐受性比其他肠道菌强葡萄糖分解试验 鉴别伤寒 副伤寒杆菌h2s试验 鉴别副伤寒甲 乙杆菌抗原构造与分类成分相应抗体菌体 o 抗原 脂多糖igm鞭毛 h 抗原 蛋白质iggvi 毒力抗原 检查伤寒带菌者 25 1 菌体抗原cellwallo o抗原 脂多糖稳定 耐热 特异性低 为沙门菌共有 2 鞭毛抗原flagellah h抗原 蛋白质不稳定 不耐热 特异性高 可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副伤寒杆菌的分型 o抗体 igm 早现早退 h抗体 igg 迟现迟退 26 3 表面抗原capsularvi vi抗原 与毒性有关 抗吞噬作用 与致病性有关 新分离菌才有 vi抗体 体内有菌时产生 无菌时消失 可作为伤寒带菌者指标 27 二 致病性与免疫性 1 致病物质侵袭力菌毛 vi抗原内毒素 大部分内毒素引起wbc 但伤寒杆菌内毒素引起wbc 肠毒素 水样腹泻 肠热症 即伤寒 副伤寒 伤寒杆菌 伤寒甲 乙 丙型副伤寒杆菌 副伤寒传染源 病人 带菌者传染途径 粪 口途径 2 所致疾病 1 肠热症 29 伤寒沙门菌 小肠 肠系膜淋巴结 初次菌血症 肝脾 骨髓的巨噬c内繁殖 菌血症 发热 肾和其他器官感染 胆囊 集合淋巴结溃疡和炎症 腹泻 肠出血 肠穿孔 胆囊炎或带菌状态 淋巴结 胸导管 胆汁 胆汁 30 胃 淋巴管 胸导管 发热 全身不适乏力 血培 出现抗体 病菌 小肠粘膜上皮 巨噬c吞噬 肠壁 肠系膜淋巴结 血流 第 次菌血症bacteriomia 第1周 31 第4周恢复期 肝脾肿大皮肤玫瑰疹 菌 肾 尿 尿检菌 菌 胆囊 粪便 粪检菌 小肠肠壁 超敏反应肠坏死 穿孔 持续发热 相对缓脉 wbc下降 表情淡漠 全身中毒症状 全身 器官和组织 再次入血 第 次菌血症 第2 3周 32 持续高热和相对缓脉 33 玫瑰疹 34 35 带菌问题carrier 3 5 的人病后可随粪便排菌 成为伤寒带菌者 传染源 值得注意 鼠伤寒杆菌 猪霍乱杆菌 肠炎杆菌等污染食物引起多为集体食物中毒细菌一般不入血潜伏期4 24h 呕吐 腹痛 腹泻 发热 二 所致疾病2 食物中毒 37 常由猪霍乱杆菌 丙型副伤寒 鼠伤寒及肠炎杆菌引起症状 进入血流 高热 寒战 厌食 贫血进入组织器官 广泛感染 脑膜炎 骨髓炎 胆囊炎 肾盂肾炎 心内膜炎 二 所致疾病3 败血症 38 主要由鼠伤寒杆菌引起多见于2岁以下婴幼儿 夏秋多发 二 所致疾病4 婴幼儿腹泻 三 免疫力伤寒或副伤寒病后可获牢固免疫力 细胞免疫为主 血液中抗体增高可辅助诊断伤寒副伤寒 39 三 微生物学检查 病原菌检查 肠热症根据病程不同 取标本1w取血 1 3w取骨髓液 2w起粪便 3w起取尿液分离培养与鉴定血 骨髓液 增菌 ss培养基 emb鉴别培养基 37 24h 无色半透明乳糖不发酵菌落 双糖或三糖培养基 生化反应 玻片凝集试验 40 血清学诊断 肥达试验widaltest 原理 已知抗原测未知抗体 定量凝集试验用已知的伤寒杆菌h抗原伤寒杆菌o抗原 患者血清甲 乙 丙型副伤寒杆菌h抗原定量凝集反应 测定病人血清中相应抗体及其含量 以辅助诊断伤寒 副伤寒 概念 41 o 菌体 抗原凝集试验 42 h 鞭毛 抗原凝集试验 43 诊断标准 因为隐性感染者或接种过菌苗的正常人伤寒血清中一定量的抗体 所以肥达试验的凝集效价应超过正常范围才有诊断意义 44 我国标准广州地区伤寒杆菌o 1 80 1 160伤寒杆菌h 1 160 1 160甲型伤寒副杆菌h 1 80 1 160乙型伤寒副杆菌h 1 80 1 160 结果判断 若两次试验效价上升或超过4倍则更有意义 45 exampleofwidaltest 46 四 防治原则 vi荚膜多糖疫苗 47 其他肠道杆菌 克雷伯菌属 肺炎克雷伯菌是引起社区感染和医院感染的重要病原菌 变形杆菌属 有鞭毛 运动活泼 具有迁徙生长现象的g阴性杆菌 可引起食物中毒和泌尿系统感染等 某些菌株与立克次体有共同抗原成分 因此临床上常用变形杆菌ox19 ox2 oxk代替立克次体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清作凝集试验 外 斐试验 协诊立克次体病 48 小结 肠道杆菌是人类肠道中的一大群革兰阴性杆菌 无芽胞 多数有鞭毛 大肠埃希菌多为条件致病菌 能引起肠外感染 致病性大肠埃希菌引起肠内感染 在卫生学上常以大肠菌群数和细菌总数作为饮水 食品等被粪便污染的指标 志贺菌 细菌性痢疾的病原菌 分四群 我国以福氏志贺菌最常见 菌痢分为 急性菌痢 慢性菌痢 中毒性痢疾 49 小结 沙门菌可引起伤寒及副伤寒 食物中毒 败血症 婴幼儿腹泻等 带菌者对伤寒及副伤寒的流行有一定意义 肥达反应可作为伤寒及副伤寒的辅助诊断 50 keywords 沙门氏菌内毒素伤寒副伤寒二次菌血症细胞免疫食物中毒 败血症肥达反应志贺菌痢疾杆菌 不入血流 细菌性痢疾内毒素菌毛外毒素大肠埃希菌肠内感染肠外感染卫生细菌学指示菌 肠道杆菌 肠道杆菌是一大群寄居在人类和动物肠道中的g 杆菌 无芽孢 广泛分布在土壤 水及腐败的物质中 大多数为肠道的正常菌群 如大肠杆菌 主要致病菌有伤寒杆菌 痢疾杆菌和致病性大肠杆菌 肠道杆菌在以下几个方面有共同特征 1 形态与结构 中等大小 两端钝圆的g 杆菌 无芽孢 多数有鞭毛 菌毛 少数有夹膜或包膜 2 培养特性 需氧或兼性厌氧 营养要求不高 在普通琼脂平板上生长良好 可形成中等大小 直径2 3mm 湿润光滑的菌落 在液体培养基中呈均匀浑浊生长 3 生化反应 活泼 能分解多种糖类和蛋白质 形成不同代谢产物 用于区别菌属和菌种 乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病菌和非致病菌上有重要意义 前者一般不分解乳糖 后者分解乳糖 4 抗原构造 复杂 菌体 o 抗原 鞭毛 h 抗原 荚膜或包膜 k 抗原及菌毛 f 抗原等 5 抵抗力 不强 加热60 30min即死亡 6 变异 易发生变异 常以自发突变或基因转移出现变异菌株 若要对不同菌属的肠道菌进行鉴别 要先将其接种于肠道菌选择和鉴别培养基上 以其生化反应和血清学反应为鉴别依据 本节课主要针对大肠杆菌和伤寒杆菌的鉴别 进行一系列的实验 几种常见的选择和鉴别培养基ss琼脂平板培养基均含乳糖 指示剂不同emb琼脂平板培养基双糖含铁斜面培养基 含乳糖和葡萄糖及feso4 ss琼脂平板培养基 是一种选择性的培养基 对大肠杆菌有较强的抑制作用 对肠道病原性杆菌无抑制作用或抑制作用很弱 这是因为除含有营养物质外 还含有柠檬酸钠和煌绿对大肠杆菌的生长有抑制作用 含有的胆盐对伤寒杆菌的生长有促进作用 还含有乳糖和指示剂中性红 在酸性条件下 呈红色中性红在碱性条件下 呈黄色大肠杆菌分解乳糖产酸指示剂变红乳糖伤寒杆菌不分解乳糖菌落呈淡黄色双糖含铁斜面培养基 由两层组成 上层为蛋白胨水为基础营养成分 加入1 的乳糖及feso4 指示剂为酚红 碱红 酸黄 若细菌分解乳糖产酸 由红变黄 还可以观察细菌是否产生h2s气体 h2s feso4fes黑色沉淀下层为含葡萄糖的蛋白胨水半固体 指示剂为酚红 可观察细菌的动力和发酵葡萄糖的能力 接种时用接种针挑取细菌 先由培养基的中央向下垂直穿刺到接近管底 然后沿原线退出 再在斜面上划线 结果 伤寒杆菌 1 分解葡萄糖产酸不产气下层琼脂由红变黄 无气泡 有动力2 不分解乳糖上层琼脂仍为红色3 可产生h2s气体 试管有黑色沉淀大肠杆菌 1 分解乳糖 葡萄糖 产酸产气 整个糖管由红变黄 糖管中有气泡产生 有动力2 不产生h2s气体 无黑色沉淀 伊红 美蓝琼脂平板 emb平板 大肠杆菌分解乳糖产酸 伊红 美蓝紫黑色金属光泽菌落 伤寒杆菌不分解乳糖无色 实验目的 了解大肠杆菌和伤寒杆菌在鉴别和选择培养基上的生长特点及生化反应特性并加以鉴别 实验材料 大肠杆菌和伤寒杆菌的ss琼脂平板 emb平板及双糖含铁斜面培养基示教片 五糖发酵管等 实验内容 1 观察大肠和伤寒杆菌在ss琼脂平板和emb平板上的菌落特点及生化