激光共聚焦技术参数.doc

共聚焦荧光显微镜技术参数1技术规格（配置）1.激光照射部分(1)系统激光器应覆盖可见光，三个激光器单独分立：红光HeNe激光器 633nm；绿光HeNe激光器 543nm；多线蓝光Ar激光器 458/488/514nm。(2)具有独立电动机械光闸，以降低声光调制器的漏光现象。(3)激光器强度由各独立AOM控制，调节由计算机的激光共聚焦扫描软件系统控制，与整个系统偶合程度高，电噪声小，安全。2.扫描检测部分(1)激光扫描系统通过照相端口与显微镜相连，不影响传统荧光观察效果，并且使扫描系统在正置与倒置显微镜通用。与所接显微镜一体化设计，一体化像差及色差校正，以保证高质量，高分辨率成像。软件对硬件应有效控制， 使系统有优异的稳定性及可维护性。光纤藕合表面应有专用防反射涂层，以提高激光传输效率(2)检测器：传统荧光检测器：三个荧光扫描检测器+一个透射光DIC（明场/相差/微分干涉）扫描检测器专用光谱检测器：32个通道(3)光谱/荧光检测系统：光谱检测通道与传统荧光检测通道分别工作，不相互影响采用多阳极PMT灵敏度矫正技术，可以对每个光谱检测通道的灵敏度误差以及波长透射属性进行矫正，使测量误差和偏差降至最低光谱检测通道可自由选择光谱的波长范围、光谱分辨率及当前工作的通道数，通过一次扫描即可获取完整的最大32个通道的光谱图像，能精确地对光谱进行分析。可以任意指定软件只显示选定的波段，相当于拥有了一个可编程的荧光阻挡滤光片光谱检测器上具有可移动的激光遮光片，可以屏蔽任意波长的激光，这样即增加了激光的应用种类，又提高了PMT的利用率光谱探测器可同时拍摄透射和共聚焦图像，为定位荧光标记，提供手段三个传统荧光通道和一个透射光DIC通道可同时进行快速扫描多个传统荧光通道的图像可即时叠加、荧光图像与透射光DIC图像即时叠加使用者可自行更换传统荧光检测系统中所有的滤色镜，这样可以在使用新的探针和染料不会存在兼容性问题(4)光谱扫描系统：高速32通道光谱分析和扫描，可获得透射光谱图像光谱分辨率：2.5nm、5nm、10nm（用衍射光栅方式保证精度）光谱扫描范围：400-750nm光谱扫描步进：0.2nm使用光栅线性拆分光谱，保证光谱精度使用DEES 衍射效率增强技术，提高光栅衍射效率使用DISP 双积分信号处理技术，以提高曝光精度和光谱数据精度，从而提高图像的信噪比光谱数据来源：用户指定/用户自建/厂家预设(5)扫描速度：标准模式下扫描速度：1.68us/pixel（512512 pixels）光谱扫描速度：2.4ms/pixel (512512pixels 32通道同步记录)扫描速度可调节(6)共聚焦针孔：可变，电动切换(7)扫描分辨率及灰度级： 分辨率：20482048 pixels灰度级：12bit(8)扫描方式： X-Y-Z-t-任意组合，可实现点扫描及任意区域扫描、光谱波长扫描等点扫描 获取样品中一指定点的荧光强度随时间变化的点扫描图像平面扫描 X-Y横切面、X-Z纵切面、X-Y-t，任意方向旋转，任意角度扫描，步进1X-Y-Z, X-Y-Z-t扫描 任意方向，任意角度局部放大扫描 1X-1000X，步进1X光谱模式下 多通道同时扫描，可进行：X-Y-、X-Y-Z-、X-Y-t-、X-Y-Z-t-扫描：分别获取横切面XY平面或纵切面XZ平面虽光谱变化的系列图像，并支持任意角度旋转扫描(9)扫描旋转、光学放大（变倍）：旋转扫描：任意角度自由旋转（旋转步进：1度），旋转扫描的同时可做DIC扫描光学放大扫描：1X-1000X，连续可调，调节步进1X共聚焦扫描视野：18mm(10)可即时或延时进行扫描，扫描时间无限制，扫描时可结合ROI(region of interesting，感兴趣区域)，实现样品中多点位置的荧光强度变化的图象、曲线和数值的实时（real time）显示；时间扫描时可单通道或多通道同时进行,并可实现可变延迟(11)光谱扫描具有极佳精度， 可使在充分保证荧光信号通量（特别是一些弱荧光信号）的情况下，消除串色（混色）问题；同时也有利于对荧光样品的定量检测；在遇到发射光谱相近的探针同时存在的情况，要保证在实际操作中可以分开相差5nm的相近光谱(12)可对光谱图像进行动态拍摄，进行光谱型FRET试验的观察，并同步生成光谱曲线，即时监视光谱变化(13)在改变扫描分辨率及扫描速度等后，无须很复杂地对仪器参数重新设置；避免频繁重新设置扫描参数，减少样品不必要的激光照射时间，减少荧光的无谓淬灭是荧光定量检测的根本保证(14)有记忆功能，使仪器可在不同时间对样品进行同一仪器测试设置的扫描，保证样品间可靠的定量比较；可智能化取像，以便在不了解染料特性是自动取像(15)有专用的图象数据库：有利众多图象的浏览这种数据库不但满足对图象的浏览，而且利用上述“记忆”功能，使仪器可在不同时间对样品进行同一仪器测试设置的扫描，保证样品间可靠的定量比较，在改变扫描分辨率及扫描速度等后，无须很复杂地对仪器参数重新设置：避免频繁重新设置扫描参数，减少样品不必要的激光照射时间，减少荧光的无谓淬灭(16)系统要求采用模块化设计：便于整个系统的扩展和升级换代正置、倒置显微镜可安装同一套共聚焦系统用户可自行升级激光器、滤色镜、检测器系统用户可自行升级计算机系统无需任何改装即可装TIRF系统3.全内反射系统(1)与共焦系统共用同一台电动倒置显微镜。且不需在使用时手工更动各部件(2)与共焦系统共用同一套激光光源。并能保证两套系统各自正常工作(3)专用TIRF高数值孔径平场复消色差物镜，NA1.49(4)专业高灵敏度CCD：CCD尺寸：8.77 x 6.6mm像素尺寸：6.45 x 6.45m分辨率：1392 x 1040满井电子：16,000读出噪音：8 e- rms 20 MHz读出速度：12 bits 20 MHz暗电流：1 e-/p/s制冷以提高相机信噪比(5)专业图像处理软件4.显微镜部分(1)采用目前最高级的电动研究型倒置荧光万能显微镜；由计算机的激光共聚焦扫描软件系统全自动控制（同时也须兼顾手动）(2)显微镜光学系统采用先进的CFI60独立校正色差无限远光学系统(3)显微镜上的外接图像接口，要尽可能的多（总数应5个）(4)具有中间放大倍率：1.5倍(5)6工位电动计算机控制转换的DIC物镜转换器(6)电动系统聚光器(7)电动荧光附件(8)电动DIC附件(9)所有物镜为共聚焦专用：放大倍率性能（平场/消色差等）数值孔径工作距离干/水/油10平场复消色差物镜0.454.00干20平场复消色差物镜0.751.00干40平场复消色差物镜0.950.14干60平场复消色差TIRF物镜1.490.13油100平场复消色差TIRF物镜1.490.13油(10)显微镜聚焦稳定、精确、可靠，Z轴步进最小50nm(11)显微镜除了荧光和透射光之外，还应具备相应的微分干涉配置(12)目镜系统要符合人体功能学的设计，采用大视野的目镜（10倍/视场数22mm），有利于观察者长时间和舒适的观察 (13)4位显微镜荧光滤色片组，置换方便，覆盖紫外和可见光波长UV单色滤块: 激发330-380nm; 阻挡400nm; 发射: 420