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文档简介
2014年高三生物提分宝典(选修部分)一生物工程【知识梳理】1DNA重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。2基因工程的基本操作程序:目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定。3基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。4目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。5目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法,常用的受体细胞是受精卵。6植物组织培养技术的理论基础是植物细胞具有全能性,过程是离体的植物组织、器官或细胞脱分化愈伤组织再分化胚状体或丛芽试管苗。7植物体细胞杂交技术中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体;诱导细胞融合的方法有离心、振动、电激等物理方法或聚乙二醇等化学方法。8动物细胞培养过程:取动物组织块分散组织细胞(用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理)配制细胞悬液原代培养传代培养。9动物细胞融合技术中涉及的促融方法有聚乙二醇(化学方法)、灭活的病毒(生物方法)或电激(物理方法)等。10杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生某种特异性抗体(单克隆抗体)。11防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜封闭作用。12卵裂期特点是细胞分裂方式为有丝分裂,细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加,或略有缩小。13早期发育的胚胎分为桑椹胚、囊胚和原肠胚3个阶段。14哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等主要步骤。15培养哺乳动物早期胚胎的培养液成分:无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清等物质。16胚胎移植的意义是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。17对囊胚进行分割时要注意将内细胞团均等分割。18哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上具有发育的全能性。19生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理。【规律拓展】1限制酶主要从原核生物中分离纯化出来,能使每条链中特定部位的磷酸二酯键断开。DNA连接酶与DNA聚合酶的作用部位均是磷酸二酯键,前者是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来,后者只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的末端的羟基上,形成磷酸二酯键。2基因工程的受体细胞选择,植物可以采用体细胞,动物不能用体细胞,一般采用受精卵细胞。当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2+处理细胞,这样做的目的是使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA分子的感受态。3目的基因的检测:转基因生物的DNA是否插入了目的基因(DNA分子杂交技术);目的基因是否转录出了mRNA(分子杂交技术);目的基因是否翻译成蛋白质(抗原-抗体杂交);个体生物学水平鉴定。4植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍5动物细胞培养基是固体(植物细胞培养基是液体),培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官。动物细胞培养时CO2起到调节pH值作用,血清中含有激素。使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞。6单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备。制备单克隆抗体过程中需要两种筛选:获得杂交瘤细胞特定的选择性培养基;第二次:专一性抗体检测。7去核卵母细胞能够激发核的全能性。8受精前精子要有获能过程;排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减中期才具备受精能力。9胚胎分割选用的胚胎最好是桑椹胚或者囊胚,因为其全能性较高;分割囊胚内细胞团时要均等。10采集卵子前一般要对雌体进行促性腺激素处理,同期发情处理用性激素同时处理供体、受体动物。二生物技术实践【知识梳理】1制作果酒、果醋、腐乳、泡菜用到的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、毛霉(主要)、乳酸菌,它们的代谢类型分别是:兼性厌氧型、异养需氧型、异养需氧型、异养厌氧型;一般控制发酵温度为:1825、3035、1518、1820。2常见的两种纯化方法是平板划线法和稀释涂布平板法。3三种常用的灭菌方法有:灼烧灭菌,如接种环、接种针;干热灭菌,如玻璃器皿和金属用具等;高压蒸汽灭菌,如培养基等。4固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。5DNA粗提取的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在014 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。6PCR技术的原理是DNA复制,需要的条件是引物、模板、原料、耐高温的DNA聚合酶等,过程是变性、复性和延伸。7蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理粗分离纯化纯度鉴定。8植物有效成分的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。【规律拓展】1选择培养基配置的原理是增加或减去某种成分,使要选择的微生物能生长,其它微生物不能生长。2灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。消毒是指用较为温和的理化方法杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽孢、孢子。3测定微生物数量的方法有显微镜直接计数、统计菌落数目。测定微生物数量时接种方法为稀释涂布平板法。4生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素5PCR扩增方向:总是从子链的5端向3端延伸。6PCR结果:DNA聚合酶只能特异地复制处于两引物之间的DNA序列,使这段序列呈指数扩增。7血红蛋白的提取和分离实验原理:利用蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力,分离不同种类的蛋白质。8固定化酶的优点:易接触;易分离;可反复利用。9酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化,而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。10水蒸气蒸馏是植物芳香油提取的常用方法,但会导致原料焦糊或有效成分水解等,若植物有效成分易水解,则不宜采用此法。三实验方法与技术【知识梳理】1观察类实验观察方式实验名称观察对象染色剂生物材料原色观察观察叶绿体叶绿体无菠菜叶观察质壁分离和复原紫色大液泡无洋葱表皮(低倍镜)染色观察观察细胞的有丝分裂染色体龙胆紫醋酸洋红洋葱根尖检测生物组织脂肪脂肪颗粒苏丹III苏丹IV花生种子观察DNA、RNA在的分布DNA、RNA甲基绿、吡啰红人口腔上皮细胞洋葱表皮细胞观察线粒体线粒体健那绿人口腔上皮细胞低温诱导染色体加倍染色体改良苯酚品红溶液洋葱根尖2鉴别类实验实验名称鉴定对象试剂颜色水浴加热生物材料检测生物组织中的糖淀粉碘液蓝色无脱色的叶片还原性糖斐林试剂砖红色需要苹果匀浆、尿液等蛋白质的检测蛋白质双缩脲试剂紫色无豆浆、蛋白类酶等DNA的鉴定DNA二苯胺试剂蓝色需要鸡血细胞脂肪的检测脂肪苏丹III橘黄色无花生种子绿叶中色素的提取和分离四种色素二氧化硅、碳酸钙(防色素被破坏)、无水乙醇(提取液)、层析液(分离)橙黄色、黄色、蓝绿色、黄绿色无新鲜的绿叶3调查类实验课题调查对象统计方法计算公式种群密度的取样调查动物(活动范围较大)标志重捕法个体总数初次捕获个体数再次捕获个体数重捕的标志个体数植物或活动范围较小的动物、昆虫的卵样方法所有样方个体总数样方的总面积土壤动物的丰富度调查土壤小动物取样器取样进行采集、调查的方法记名计数法和目测估计法调查人群中的发病率人群中某种遗传病汇总法发病率患病人数被调查人数100%4教材经典实验实验名称实验选材实验方法备注细胞膜成分及鉴定人得成熟红细胞渗透、离心法、酶解法等脂质溶剂和蛋白酶处理膜分析成分光合作用的发现(需光和O2的产生)天竺葵叶遮光法实验前进行饥饿处理小球藻同位素标记法分别用18O标记H2O和CO2DNA是遗传物质的证据两种肺炎双球菌体内转化法S型细菌中存在能使R型细菌转化成S型细菌的“ 转化因子 ”两种肺炎双球菌体外转化法DNA是遗传物质,蛋白质和 多糖不是大肠杆菌和噬菌体同位素标记法注意误差分析生长素的发现胚芽鞘对照法感受光刺激部位的是胚芽鞘尖端 ,单侧光对植物向光生长产生某种影响胚芽鞘、琼脂对照法尖端产生生长素,向下运输,促进尖端下部的生长【规律拓展】1实验结果的显示方法或观测指标(1)光合速率O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量(水生植物可依气泡的产生量或产生速率;离体叶片若事先沉入水底可以单位时间内上浮的叶片数目判断;植物体上的叶片可以指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅)判断。(2)呼吸速率O2吸收量、CO2释放量或淀粉减少量 。(3)原子转移途径放射性同位素示踪法。(4)细胞液浓度大小初始质壁分离时的外界溶液浓度。(5)细胞是否死亡质壁分离、细胞质是否流动。2实验条件的控制方法(1)增加水中氧气泵入空气、吹气或放入绿色植物。(2)减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水。(3)除去水中的CO2NaOH溶液。(4)除去叶片中原有的淀粉置于黑暗环境中。(5)除去叶片中叶绿素与酒精溶液共煮。(6)除去光合作用对细胞呼吸的干扰给植株遮光。(7)如何得到单色光棱镜色散或彩色薄膜滤光。(8)线粒体提取细胞匀浆离心。4实验中常用器材
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