糖尿病实验室检查及其意义

糖尿病实验室检查及其意义,主要内容,HbA1c测定及其意义胰岛B细胞自身免疫抗体的检测尿系列蛋白测定,一、HbA1c的结构和形成机制,HbA1c的形成原理,GHb是葡萄糖分子和血红蛋白A 某些特殊部位分子经缓慢而不可逆非酶促反应而形成的产物。在红细胞中，葡萄糖的摄取无需胰岛素介导， 其细胞内葡萄糖浓度随血糖的升高而升高， 很快与血浆葡萄糖水平达到平衡。葡萄糖最初与HbA的链-N端的缬氨酸残基发生氨基反应，迅速以共价健形成醛亚胺化物，其性质不稳定，可逆，但逆反应速度较正反应慢。醛亚胺经脱水，分子重新排列，通过酮氨基和葡萄糖连接， 成为氨基酮化合物，其性质稳定，此反应不可逆，。红细胞内糖化血红蛋白水平随红细胞暴露于高血糖的时间和高血糖的程度有关。,HbA1c 形成的动力学,寿命：120 days.50% 的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31 90 天平均血糖水平相关.只有10% HbA1c 与 过去91 120天平均血糖水平相关.,平均血糖水平,(mg/dl),糖化血红蛋白水平,（%）,糖化血红蛋白每变化1% 所对应的平均血糖的变化为30mg/dl.,记住餐前和餐后血糖对HbA1c的相对影响,若HbA1c 10.2% (参考DCCT) 70% HbA1c 源于空腹血糖30% HbA1c 源于餐后血糖若HbA1c 7.3% (参考DCCT) 70% HbA1c 源于餐后血糖30% HbA1c 源于空腹血糖若HbA1c 7.3-8.4% (参考DCCT) 空腹和餐后血糖各占50%,二、HbA1c的测定方法和影响因素,检测方法,阳离子交换树脂微柱层析法 HPLC电泳法亲和色谱微柱法放免法免疫比浊法免疫竞争抑制法,HPLC方法,目前HPLC法测定HbA1c使其准确性和重复性得到很大的提高。美国 临床化学协（AACC）糖化血红蛋白标准化分会和IFCC HbA1C标准化工作组建议，HPLC方法可作为检测糖化血红蛋白的金标准，希望以此使大多数的实验方法能够参照“指定的方法”实现标准化。 糖化血红蛋白自动分析仪采用离子交换HPLC法测定HbA1c，利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的方法。 该法直接测定全血HbA1c，其批内和批间变异系数CV均可以小于1%（CV 1%），结果比较精确， 检测结果不受存在的变异型血红蛋白及其衍生物的影响，特别适合于糖尿病人的监控。,影响因素,血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、怀孕等红细胞寿命缩短，从而糖化血红蛋白的量降低；肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢，使其寿命延长，从而使糖化血红蛋白的量增加。,三、 HbA1c与糖尿病慢性并发症,Stratton IM et al. BMJ 2000; 321:405412.,HbA1c 升高伴并发症的风险增加,DCCT Research Group. N Engl J Med. 1993;329:977-986.Ohkubo Y, et al. Diabetes Res Clin Pract. 1995;28:103-117.UKPDS 33: Lancet 1998; 352, 837-853.Stratton IM et al. BMJ. 2000;321:405-412.,严格血糖控制 降低糖尿病并发症的风险,HbA1c糖尿病视网膜病糖尿病肾病糖尿病神经病变糖尿病心血管病,1型糖尿病 DCCT19 7%63%54% 60% 41%*,2型糖尿病 Kumamoto29 7%69%70% -52%*,2型糖尿病 UKPDS38 7%17-21%24-33% -16%*,*因发生并发症事件数较少无统计学显著性. 在随后的流行病学分析中显示统计学显著性4,血糖均值,血糖波动,血糖,血糖,HbA1c6.5%,HbA1c6.5%,时间,Del Prato S. 1999,Patient A,Patient B,HbA1c值相同不等于全天血糖谱相同,A：平均血糖6.6mmol/L SDBG 1.1mmol/L,B：平均血糖6.7mmol/L SDBG 3.4mmol/L,Derr R. Is HbA1c affected by glycemic instability? Diabetes Care. 2003;26(10):2728-2733.,平均血糖相同，SDBG不同,四、血糖控制标准,血糖控制率低,超过50%70%的患者血糖控制不满意，长期获得良好控制（HbA1c6.5 %7.0%)的比例不到30%。 原因： 患者障碍 医生的障碍 胰岛素使用率低,美国/中国：仅1/3患者控制达标,1Saydah SH et al. JAMA 2004; 291:335-342 2 Asia-Pacific Type 2 Diabetes Policy GroupType 2 Diabetes Practical Targets and Treatments. 2002.,NHANES 19992000 (US)1,达到HbA1C6.5%的患者比例,6.5%,6.5%,CODIC(China)2,28%,72%,0,10,20,30,40,50,60,70,80,达到HbA1C7.0%的患者比例,7.0%,7.0%,37%,63%,0,10,20,30,40,50,60,70,各种指南推荐血糖控制全面达标,1. IDF Clinical Guidelines Task Force. Global guideline for Type 2 diabetes 2. America Diabetes Association. Diabetes Care 2007, 30(suppl 1):S4-S413. AACE 2007. /pub/odimplementation4. 中糖尿病防治指南，2007,2008美国糖尿病学会HbA1c标准,7.0%（非妊娠成年人：降低微血管病变和肾病）。6.0%（若无明显低血糖时，可获得更多有益）。适当放宽：反复严重低血糖（尤其是未感知的低血 糖）；有限寿命；合并其他疾病（如心脑血管疾病）；儿童；病程很长但微血管并发症轻或稳定。 血糖控制个体化,儿童及青少年糖尿病血糖控制标准,餐前 睡前 HbA1c 理由0-6岁 5.6-10.0 6.1-11.1 7.5-8.5 避免低血糖6-12 5.6-10.0 6.1-10.0 8.0 低血糖风险高， 并发症风险低13-19 5.0-7.2 5.0-8.3 7.5 有严重低血糖风险 考虑发育和精神健康 如无低血糖，建议达7.0%以下,五、糖化血红蛋白和糖尿病诊断、筛查 HbA1C and diagnosisscreening of diabetes,诊断：优点,比血糖检测稳定性好，精确度高，实验室变异系数小个体内变异率小，日间差仅35岁，发病时没有酮症，发病半年内不需要胰岛素治疗，但起病后B功能逐步衰减，一般在56年后大多（94%)需要都需要胰岛素治疗。病理上亦表现为胰岛炎。发病时自身抗体的检测对LADA的诊断具有重要作用，有人认为自身抗体阳性是诊断LADA的必备条件。,a)5%10的2型糖尿病自身免疫抗体阳性；b) 58的LADA表现为单一抗体阳性；c) 51成年发病的1型糖尿病为单一抗体阳性；只有14的儿童糖尿病为单一抗体阳性，LADA的抗体滴度明显低于典型的1型糖尿病。d) IA-2A在LADA检出率低，几乎与其他抗体同时存在。,3) 自身抗体检测对1型糖尿病的预报作用,1）自身抗体在1型糖尿病的前期就存在，而且研究发现自身抗体阳性者以后发生1型糖尿病的机率远高于自身抗体阴性者，因此自身抗体的检测在预测1型糖尿病中被广泛采用。2）研究表明无任在1型糖尿病的1级亲属还是在普通人群（儿童）中，1型糖尿病只发生在那些最初有多个抗体阳性者，目前大多报道认为如果初查时有2个以上抗体阳性，那么6年后发生1型糖尿病的可能是50；在多项大规模的前瞻性研究中均发现最初自身抗体检测阴性者在随访68年后不发现1型糖尿病。3）IA2As和GADA是最常用的作为筛查的第一线抗体。,自身抗体易感基因的检测第一时相的胰岛素分泌的测定可以很好的预报1型糖尿病的发生，其中自身抗体的检测由于其操作相对简单，成本较低而被广泛采用；但由于人群中1型糖尿病的发病率只有0.3,因此在实践中1型糖尿病的预报工作如何进行还有许多问题需要解决。,4) 自身抗体与糖尿病的治疗,1）典型1型糖尿病发病即需要胰岛素治疗，因此自身抗体对其治疗指导作用很小；2）对成人发病的糖尿病，自身抗体的检测可以预告其胰岛B细胞功能衰竭的发生，因此在这类病人早期测定自身抗体，及时采取适当措施，可能保护残存的B细胞，起到稳定病情的作用。,5)自身抗体与1型糖尿病的预防,预报1型糖尿病的目的是预防其进一步发展为糖尿病自身抗体的检测可以预报1型糖尿病，从而为发现高危人群提供了手段在动物实验，多种方法可以预防1型糖尿病的发生但在人类预防1型糖尿病的发生还需要经过艰苦的努力,小结 自身抗体的检测对1型糖尿病的诊断与分型、预报及防治等方面均具有重要作用。,三、尿系列蛋白测定,糖尿病肾病的早期诊断十分重要，临床上糖尿病肾病的早期诊断主要依赖于对尿蛋白的检测。,尿蛋白种类,白蛋白(Alb)，最常用（中分子）转铁蛋白(TRF，中分子）IgG（大分子）微球蛋白测定（a1-或B2-微球蛋白，小分子）视黄醛结合蛋白(RBP，小分子)胱氨素-C（小分子）TammHorsfall protein (THP，远曲小管分泌）N-乙酰-B-氨基葡萄糖转移酶 （NAG，近曲小管排泌）,血浆蛋白肾小球滤过,正常情况下血清蛋白：不易被肾小球滤过可被近端肾小管以吞饮方式重吸收,蛋白尿的形成原因,肾小球内跨毛细血管压力过高肾小球滤过屏障机制障碍，包括滤孔改变或电荷改变肾小球足细胞结构和代谢障碍肾小管损伤,测定方法与注意事项,常用测定方法有比浊法、放射免疫法及酶免法等；标本可取晨尿、随机尿、24小时尿及夜间12小时尿液；结果可以用排泄率、蛋白/肌酐比值或mg/L表示，但前