纳豆菌的提取及纳豆的制作VIP

开题报告 纳豆菌的提取和纳豆的制作 实验原理 食品纳豆中含有的纳豆菌 主要指枯草芽孢杆菌 Bacillusnatto 在通过其发酵大豆的过程中 通过枯草芽孢杆菌对蛋白质和糖类特别的直接利用功能 在枯草芽孢杆菌的生长过程中 又利用大豆本身的营养成分 分泌和合成了很多种酶类 维生素 氨基酸及其它只有纳豆特有的营养素和生理活性物质 使得发酵后的大豆中更富营养 称之为纳豆 实验方法 工艺流程 大豆 浸泡约12h 使体积增加2倍左右蒸煮 消毒冷却铺层发酵后熟接种菌 糖 盐 实验材料及菌种 菌种 筛选出发菌源为产自日本的纳豆培养基 牛肉膏蛋白胨培养基250ml酪蛋白培养基250ml无菌水100ml 移液枪 100 1000ul 枪头6个 培养皿6个 试管6个 烧杯 500ml 2个 玻璃棒2支 涂布棒一支 接种环2支 锥形瓶 250ml 2个 瓶塞 纳豆菌的分离提取步骤 菌株分离 取上述品种的纳豆若干粒 放入装有25mL无菌水和十余颗玻璃珠的锥形瓶中 室温下浸提 振荡多次 获得菌悬液 以十倍稀释法稀释至10 2 10 3 10 4 涂布于牛肉膏蛋白胨培养基 放入恒温培养箱中 30 培养24h 镜检 确定培养出的微生物的形态特点 酪蛋白平板筛选 挑取经培养后牛肉膏蛋白胨平板培养基上的单菌落 利用平板划线法接种于新鲜的酪蛋白平板 30 培养24h后观察平板透明圈情况并进行测量 选取透明圈直径大者转接酪蛋白斜面培养 食品纳豆的制作具体实验步骤 1 将大豆彻底清洗后用3倍量的水进行浸泡 浸泡时间是夏天8 12h 冬天20h 以大豆吸水重量增加2 2 5倍为宜 笔者认为2倍最好 2 在实验室用普通灭菌锅在充分放汽后 121摄氏度高温高压处理15 20min 以豆子很容易被用手捏碎为宜 宜蒸不宜煮 煮的水分太多 3 在大豆被蒸熟前 在浅盘中铺好锡箔纸 用筷子等尖细物在锡箔上打多个气孔 灭菌备用 搅拌时要用的橡胶手套也要用开水灭菌 4 大豆蒸熟后 不开蒸锅的盖子 直接倾去锅内的水 将蒸锅的大豆无菌转移到灭菌盆或罐内 立即盖盖 以免杂菌污染 5 在已灭菌的杯中用10ml开水溶解盐 约0 1 糖 约0 2 和0 01 纳豆菌 如果觉得体积太小 不易均匀喷洒于大豆中 也可用20 30ml的水 注意水的多少会影响纳豆的粘滞性和嚼感 将混合液喷洒于大豆中搅拌均匀 6 把接种好的大豆均匀地平铺于灭好菌的锡箔纸上 厚约2 3cm 不宜太厚 将锡箔纸折过来 或用另一种锡箔纸 铺盖于豆层上面 然后在上面再铺接种好发酵剂的大豆 厚约2 3cm 上面也盖上一层纱 注意 如果发酵中勇气不好 做出的纳豆会以苦 如果勇气太大 纳豆表面会过干 不利于充分发酵 发酵环境的湿度要高 7 37 42摄氏度培养20 24h 也可以在30摄氏度以上的自然环境中发酵 时间适当延长 当发酵完时 纳豆基本上做成了 揭掉锡箔纸或纱时 会看到豆子表面部分发灰折色 室内漂满纳豆的芳香 稍有氨味是正常的 但氨味过于强烈 则有可能有杂菌生长了 实验日程安排 第一周 配置牛肉膏蛋白胨培养基 酪蛋白培养基各250ml 100ml无菌水 包好12个培养皿 6个试管 高压蒸汽灭菌第二周 制备纳豆的稀释液10 2 10 3 10 4 利用涂布平板法对菌进行培养第三周 对培养出的细菌镜检 将枯草芽孢杆菌进行筛选 接种到酪蛋白平板上进行筛选第四周 对筛选出的菌株进行纯化 接种于酪蛋白的斜面上进行大量培养第五周 提前一天将大豆清洗后浸泡 用普通灭菌锅在充分放汽后 121摄氏度高温高压处理15 20min 铺好锡箔纸打多个