脑出血的治疗研究进展.doc

脑出血的研究进展关键词脑出血 脑出血发病率、死亡率和致残率均较高，但目前为止尚无肯定、有效的治疗方法，同时对基础研究也远远地落后于脑缺血。近年来脑出血的研究又有新进展，结合国内及我中心近年来的工作对脑出血系列研究综述如下。 一、脑出血的动物模型 自20世纪60年代开始，就有脑出血动物模型，种类较多，运用的动物有狗、猫、猪、兔、猴、猿、狒狒及啮齿类等，常用的主要有四大类型，不同的类型均有各自的特点和应用范围。 1.注入胶原酶 该方法是在立体定位下用微量注射泵向脑组织中注入VII型胶原酶溶液，引导脑出血。胶原酶是一种金属蛋白酶，能够分解细胞间基质和血管基底膜上的胶原蛋白，破坏血脑屏障。血管壁受损后引起渗血，血液逐渐集聚，约4h出血区融合成血肿。血肿的大小由胶原酶的量决定。1990年由Rosenberg等首先报道，注入0.5U凝血酶于200300克SD大鼠的尾状核。1998年Clark等注入0.07U胶原酶于2636g的雄性Swissalbino小鼠尾状核内制成脑出血模型。该模型操作简单，所产生的出血大小、形态及部位基本一致，重复性好。但需要一段时间才能产生出血，出血区为弥散性渗血区，与临床自发性脑出血的血肿性状不同。Chesney认为该模型适于脑出血后神经功能恢复的研究和治疗方法的评价，不宜用于血肿的演变、血肿及其分解产物的作用研究。我们已进行了这种模型的基础研究。 2.直接注血 有注入动脉血，亦有注入静脉血。1994年Yang等在立体定位下将100L新鲜的自体动脉血注入250350g的SD大鼠尾壳核内，制成自体血脑出血模型。该模型的关键是：应以较低压力（0.05），联合移植组运动功能改善较嗅鞘细胞组为显著（P0.05）。组织病理学结果提示有相应的良性的改变。工作正在总结中。 间充质干细胞与脑血管病的治疗研究： 3.骨髓间充质干细胞治疗脑出血： 同所有的干细胞一样，骨髓间充质干细胞（MSCs）也具有自我更新能力和多向分化潜能。它虽然仅占骨髓单核细胞的0.001%0.01%，但是却具有惊人的增殖能力。对MSCs的细胞周期的研究发现MSCs中仅有20%的静止细胞(0期细胞)，这表明MSCs具有强大的自我更新能力。骨髓间充质干细胞来源于中胚层，具有向中胚层细胞分化的能力；同时，MSCs还可以向外胚层的神经元细胞和内胚层的肝卵圆性细胞分化，但争议很大。展示了MSCs在神经系统疾病的治疗上也具有重要的理论研究意义和广阔的可探索应用前景。 3.1张化彪、张苏明等的系列研究提示：所培养细胞经流式细胞仪检测CD90、CD106呈阳性而CD45呈阴性，初步证实是MSCs，流式细胞仪检测显示细胞均一性达95%以上，说明细胞均一性较高，可以满足组织工程的需要；体外诱导分化结果显示诱导后的细胞NeuN、GFAP、CNP三者皆呈阳性，表明MSCs在体外可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样细胞。同时，有Nestin阳性细胞的出现，表明在MSCs转化为了NSCs；免疫追踪技术发现MSCs的迁移主要集中在患侧出血周围、海马区、胼胝体以及大脑皮质的其它部位，同时在健侧也有少量的分布。荧光双标发现，MSCs在脑出血大鼠脑内分化为NeuN和GFAP阳性的神经元和星型胶质细胞，其中在海马处的MSCs大部分分化为神经元，在出血灶周围的MSCs大部分分化为星型胶质细胞；爬行计分结果可见，颈动脉组和侧脑室组的大鼠治疗作用明显。其中侧脑室组效果最好，颈动脉次之，颈静脉几乎没有疗效。 3.2间充质干细胞治疗脑血管病理论基础：易获得性体外培养能快速扩增可自体移植，能免疫耐受能够与宿主大脑整合并长期存活能够转染和长期表达外源性基因有证据表明MSCs能够穿越血脑屏障，促进R小胶质细胞的形成在脑的微环境中存在一些因素如神经生长因子（NGF）等有保护MSCs在脑中不被破坏，促进其增殖分化的作用。 3.3张化彪、张苏明等人的研究证明：将标记后的MSCs通过颈动脉、颈静脉、侧脑室三种途经植入脑出血大鼠体内，颈动脉组和侧脑室组的移植治疗起了明显的效果，神经功能障碍有明显改善，与模型组和颈静脉组有显著性差异。同时发现，MSCs的迁移主要集中在患侧