浙科版选修3 动物的克隆(Ⅰ) 课件（42张）.pptx

第5课时动物的克隆 第二章克隆技术 考试要求 一 动物细胞 组织培养与动物组织培养技术的发展 二 细胞株 细胞系与克隆培养法 内容索引 当堂检测 一 动物细胞 组织培养与动物组织培养技术的发展 基础梳理 1 动物克隆的技术基础动物克隆的技术基础是 2 动物细胞培养 1 培养过程 动物的细胞和组织培养 机械 胰酶 接触抑制 2 原代培养和传代培养将动物组织通过酶或机械方法分散成单个细胞后进行的初次培养 称为 即从机体取出后立即进行的细胞 组织培养 初次培养的细胞生长 繁殖一定时间后 由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭 影响细胞的生长 因此需要重新用胰蛋白酶等处理 进行分瓶扩大培养 称为 即细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶 原代培养 传代培养 3 动物组织培养 1 概念 动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或特性 2 结果 由于细胞的运动 变化和培养物的组织成分发生变化 长期的培养结果最终成了简单的 3 在广义的组织培养中还包括器官培养 即 器官的一部分或在体外和人工控制的条件下得以保存 生长 在此过程中保持器官的结构 功能及能力 生长 细胞培养 器官的原基 整个器官 分化 问题探究 1 结合教材p29 动物成纤维细胞的培养过程 回答下列问题 1 动物细胞培养 答案 理论基础 的揭示调节控制机理的分析的研究等 含义 动物细胞培养包括组织块的切取 组织细胞的分散及细胞培养三个阶段 分散组织细胞常用的方法有和 培养的细胞要表现出生长 和有规律的衰老 死亡等生命活动现象 细胞全能性 细胞周期 癌变机理和衰老原因 机械消化 胰酶消化 分裂 接触抑制 2 动物组织培养的含义 动物组织在体外及人工条件下维持或 3 动物细胞 组织培养间的联系 细胞培养的后代之间并非彼此独立 而是相互依存 表现出一定的 因此有时将两者统称为 简称 4 培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞 答案分散后细胞能与培养液充分接触 更易进行物质交换 答案 生活状态 生长特性 组织特性 组织 培养 组培 2 填写动物细胞的培养过程图 思考回答有关问题 答案 胶原纤维 单个的细胞悬浮液 原代 传代 1 方法 悬浮培养法 2 常用培养液 鸡胚浸出液 人工培养液 199 答案 3 原代培养和传代培养 从机体取出后立即进行的细胞 组织培养称为培养 将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶就称为培养 3 动物细胞与组织培养为什么需要无菌 无毒的环境 答案细菌 真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染 而离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力 一旦受到污染或自身代谢物质积累等 培养的细胞就会死亡 原代 传代 小贴士 细胞贴壁和接触抑制 1 细胞贴壁 将培养液中分散的动物细胞放入培养瓶中 置于适宜的条件下培养 细胞很快会贴附在瓶壁上 称为细胞贴壁 2 接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时 细胞就会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的接触抑制 注意 打破接触抑制现象的方法 将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理 然后分瓶继续培养 让细胞继续增殖 癌变细胞没有接触抑制现象 活学活用 1 请判断下列有关动物细胞培养的说法的正误 1 噬菌体的研究与动物细胞培养技术无密切关系 2 对癌变机理和衰老原因的研究与动物细胞培养技术有密切关系 3 从机体取得细胞后立即进行的培养过程属于原代培养 4 生物制药厂通过细胞培养的方法生产细胞产物 属于原代培养 5 细胞培养过程中可用胃蛋白酶使组织分散成单个细胞 答案 2 动物细胞培养过程的顺序是 原代培养 传代培养 胰蛋白酶处理组织 形成分散的细胞悬浮液a b c d 解析动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物的器官通过胰蛋白酶处理制成单细胞悬浮液 再通过原代培养和传代培养得到细胞株或细胞系 答案 解析 二 细胞株 细胞系与克隆培养法 基础梳理 1 细胞系和细胞株 1 细胞系 可的细胞 原代培养物在首次传代时就成为细胞系 能连续培养下去的细胞系称为细胞系 不能连续培养下去的细胞系称为细胞系 二倍体细胞通常为有限细胞系 连续细胞系被认为是发生转化了的细胞系 大多数具有 有的连续细胞系是 具有异体致瘤性 有的连续细胞系获得了不死性 但保留现象 不致癌 连续传代 有限 连续 异倍体核型 恶性 细胞系 接触抑制 2 细胞株 通过一定的选择或纯化方法 从原代培养物或细胞系中获得的的细胞称为细胞株 细胞株一般具有恒定的 同功酶类型 病毒敏感性和生化特性等 可以连续多次传代的细胞株称为细胞株 传代次数有限的细胞株称为有限细胞株 具有特殊性质 染色体组型 连续 2 克隆培养法 或细胞克隆 1 概念 把一个从群体中分离出来单独培养 使之繁衍成一个新的的技术 2 结果 由于来源于一个共同的祖细胞 所以称为 也就是克隆 3 提高细胞克隆形成率的措施 选择适宜的培养基 添加 以滋养细胞支持生长 刺激 使用co2培养箱 等 单细胞 细胞群体 纯系 血清 胎牛血 清最好 激素 胰岛素等 调节ph 问题探究 1 比较细胞系 细胞株 完善下表 答案 可连续传代的细胞 有限细胞系 连续细胞系 选择或纯化 原代 培养物或细胞系 答案 有限细胞系 异倍体 恒定 同功酶 原代培养物 细胞系 2 克隆培养法中的细胞增殖方式是什么 细胞克隆的原理是什么 答案增殖方式 有丝分裂 原理 细胞增殖 答案 知识拓展 克隆的类型 活学活用 3 动物细胞培养中 出现遗传物质改变的细胞是a 连续细胞系b 细胞株c 原代细胞d 传代细胞解析原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了 少数能传到40 50代 50代后 有少部分细胞遗传物质发生改变 变成了无限增殖的细胞 这些称为连续细胞系 答案 解析 4 回答下列有关植物组织培养和动物细胞培养的问题 1 植物组织培养的目的一般是获得 动物细胞培养一般是通过原代和传代培养 获得 解析植物组织培养的目的是得到完整的植株 在液体培养基中 愈伤组织可通过悬浮培养形成胚性细胞 然后发育成胚状体 如果连续培养细胞 可能会发生变异 从而导致细胞的全能性降低 动物细胞培养的目的主要是获得细胞群 克隆培养法是将一个单细胞繁衍成为一个新细胞群的技术 因而这项技术的最基本要求是所建成的克隆来源于单个细胞 理论上各种培养细胞都可被克隆 但无限细胞系比较容易克隆 这是因为它们的适应能力较强 在培养基中加入滋养细胞 可以提供细胞发育所需要的营养物质 答案 解析 完整植株 细胞系或细胞株 2 植物组织培养中 愈伤组织细胞可通过在液体培养基中形成单个胚性细胞 利用胚性细胞再分化形成的可制成人工种子或发育成植株 但连续传代培养后 胚性细胞全能性可能降低 从细胞内部看 主要原因是传代过程中发生等变化 答案 悬浮培养 胚状体 染色体畸变 细胞核变异或非整倍体产生 3 动物细胞克隆 克隆培养法 要取得成功的最基本要求是 为提高克隆成功率 还应该在培养基中加入以支持生长 克隆培养的细胞要有较强的独立生存能力和适应性 最好取自下列哪种细胞 a 幼体组织细胞b 有限细胞系c 处理后的胚胎成纤维细胞d 无限细胞系 答案 保证所建成的 克隆来源于单个细胞 滋养细胞 d 判断正误 1 细胞克隆的遗传性状均一 表现的性状相似 2 细胞克隆的最基本要求是保证克隆后的后裔细胞均来源于单个细胞 3 细胞克隆过程中需要o2 不需要co2 4 细胞克隆的最主要用途之一就是从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系 答案 判断细胞株和细胞系的方法 1 细胞系是可以传代的细胞 分为两种类型 有限细胞系 细胞系的生存期有限 和连续细胞系 大多具有异倍体核型 2 细胞株是通过纯化或选择法从原代培养物或细胞系中分离出来的具有特异性状或标志性状的细胞群体 分为两种类型 连续细胞株和有限细胞株 3 细胞系所有细胞都能传代培养 却不一定具有相同的特征 不能称为细胞克隆 而细胞株是具有特殊性质的细胞系 一个细胞株就是一个细胞克隆 课堂小结 动物细胞的培养和克隆形成 1 动物细胞的培养 从动物体中取出相关的组织 将它分解成的悬浮液 然后 在的培养条件下 使这些细胞得以生存 并保持和等生命活动的现象 2 动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持 或生长特性 动物组织培养过程中可以伴随 单个细胞 人工控制 生长分裂 繁殖 乃至接触抑制 有规律的衰老 死亡 生活状态 组织分化 动物细胞的培养和克隆形成 原代培养 从机体取出后立即进行的细胞 组织培养 传代培养 将细胞分成若干份 接种到若干份培养基中 使其继续生长 增殖 3 原代培养和传代培养 原代培养 动物细胞的培养和克隆形成 细胞系 可连续传代的细胞 原代培养物在时就成为细胞系 细胞株 从中选择获得的具有特殊性质的细胞 一般具有恒定的染色体组型 病毒敏感性和 等 4 细胞系和细胞株 首次传代 原代培养物或细胞系 同功酶类型 生化 特性 动物细胞的培养和克隆形成 基本要求 必须肯定所建成的克隆来源于 5 克隆培养法 提高成功率的措施 选择适宜的培养基添加 以支持生长激素刺激使用co2培养箱 调节ph等 单个 细胞 血清 滋养细胞 当堂检测 1 下列关于动物细胞培养的叙述 不正确的是a 培养基为液体培养基b 培养结果只能获得大量细胞及生物制品 而不能获得生物体c 需要氧来满足细胞代谢的需要 不需要二氧化碳d 通过细胞培养可以检测有毒物质 判断某物质的毒性 2 3 4 5 1 答案 解析 2 3 4 5 1 解析动物细胞一般用液体培养基来培养 需要无菌环境 基本营养物质 适宜的温度和ph 一定量的o2和co2等 通过动物细胞培养可以生产生物制品 可以培养皮肤移植的材料 还可以检测有毒物质 用于生理 病理 药理等方面的研究 由于动物细胞分化程度高 虽然细胞核内具有该物种的全套遗传物质 但单个细胞不具备形成完整个体的其他条件 所以目前还不能通过动物细胞培养获得生物体 2 下列关于细胞系和细胞株的说法中 正确的是a 细胞系有分裂次数的限制 细胞株可连续传代b 细胞系的遗传物质没有变化 细胞株的遗传物质也没有改变c 细胞系是原代培养建成的 细胞株是传代培养建成的d 细胞系是可传代的细胞 细胞株是具有特殊性质的细胞系解析细胞系是指可连续传代的细胞 分为有限细胞系和连续细胞系 连续细胞系是发生转化的细胞 遗传物质已经发生变化 从细胞系中选择出的具有特殊性质的细胞是细胞株 答案 解析 2 3 4 1 5 3 动物体内的细胞不易受到外界细菌 病毒等微生物的感染 原代培养的细胞a 对微生物有一定的防御能力b 细胞培养的环境中可以有一定量的微生物c 对微生物已失去了防御能力d 刚离体的细胞必须生活在无菌条件下 以后的培养对无菌条件要求不严格 答案 解析 2 3 4 1 5 2 3 4 1 5 解析动物体具有一定免疫力 是因为动物体具有非特异性免疫系统和特异性免疫系统 对各种病原微生物有一定的防御能力 而离体的动物细胞失去了对各种微生物的防御能力 因此 动物细胞培养的环境中不能存在微生物 否则 动物细胞就会死亡 4 动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于a 培养基不同b 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行c 动物细胞可以传代培养 而植物细胞不能d 动物细胞能够大量培养 而植物细胞只能培养成植株解析动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基不同 动物细胞一般用液体培养基培养 而植物细胞一般用固体培养基培养 与植物组织培养的培养基相比 动物细胞培养的培养基中还要加动物血清等 它们都是在无菌条件下培养的 解析 2 3 4 1 答案 5 5 回答下列问题 1 在动物细胞培养过程中 当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时 细胞会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的 此时 瓶壁上形成的细胞层数是 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来 需要用酶处理 可用的酶是 解析动物细胞培养过程中当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时 细胞会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的接触抑制 此时 瓶壁上形成单层细胞 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来 需要用胰蛋白酶处理 答案 2 3 4 1 5 解析 相互接触 接触抑制 单层 或一层 胰蛋白酶 2 随着细胞传代次数的增多 绝大部分细胞分裂停止 进而出现 的细胞 但极少数细胞可以连续增殖 其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞 该种细胞的粘着性 细胞膜表面蛋白质 糖蛋白 的量 解析随着细胞传代次数的增多 绝大部分细胞分裂停