内分泌常用激素测定的原理标本收集及注意事项课件

内分泌常用激素测定的原理 标本收集及注意事项 第一节 垂体相关激素测定 1 促肾上腺皮质激素 ACTH 2 促甲状腺激素 TSH 3 生长激素 GH 4 泌乳素 PRL 5 黄体生成素 LH 卵泡刺激素 FSH 6 抗利尿激素 ADH 1 促肾上腺皮质激素 ACTH 测定 原理 ACTH由腺垂体ACTH细胞分泌 刺激肾上腺皮质生长和释放各种类固醇激素 特别是皮质醇 ACTH分泌有昼夜节律变化 清晨最高 午夜最低 ACTH受促上腺皮质激素释放激素 CRH 调控 皮质醇在下丘脑和垂体水平反馈抑制ACTH分泌 1 促肾上腺皮质激素 ACTH 测定 采血要点和注意事项 1 由于ACTH的分子不稳定 半衰期短 10分钟 在采集标本过程中容易被玻璃皿吸附 需预冷塑料注射器于上午8时空腹采血 标本量2ml 加入EDTA抗凝 立即置于冰浴中 即送实验室 2 尽快分离血浆 4 低温离心 后于 20 以下冰箱保存 70 更好 3 各种应激可使ACTH水平增高 应尽量避免 2 促甲状腺激素 TSH 测定 原理 TSH由腺垂体分泌 作用于甲状腺 促进甲状腺激素的合成和分泌 TRH可刺激TSH分泌 而甲状腺激素反馈抑制TSH分泌 采血要点 空腹不抗凝静脉血2ml 2 促甲状腺激素 TSH 测定 注意事项 1 多巴胺 皮质醇可显著减少TSH的释放 在使用这些药物时TSH水平可抑制到甲亢水平 生长抑素和5羟色胺也可使TSH分泌减少 2 在某些非甲状腺疾病和急性精神疾病 TSH水平急剧波动使结果难以分析 应待病情稳定后重新评价或连续观察TSH的动态变化 3 不同化验方法 灵敏度不同 其意义有所不同 RIA 放射免疫法 不能区别正常人与甲亢病人 IRMA 免疫放射法 可区别绝大多数甲亢病人和正常人 称为sTSH ICMA 免疫化学发光 和TRIFMA 时间分辨免疫荧光法 为uTSH 血清TSH测定方法 建议选择第三代及以上的TSH测定方法 3 生长激素 GH 测定 原理 GH由腺垂体GH细胞分泌 正常情况下GH呈脉冲式分泌 大部分是在夜间睡眠时分泌 受下丘脑神经内分泌细胞分泌的生长激素释放激素和生长抑素调节 采血要点 1 检查前一天晚饭后禁食 避免饮酒 喝茶或咖啡 勿过度兴奋 夜间保证充分睡眠 次晨醒后半小时内 勿下床活动并保持精神安静 卧位取静脉血2ml 不加抗凝剂送检 2 门诊患者在家取血 门诊抽血者 需要在安静环境下休息至少半小时后方可采血 3 生长激素 GH 测定 注意事项和影响因素 GH为应激激素 故情绪紧张 手术刺激 体力活动 进食 禁食24h以上以及入睡后 均可使GH水平升高 判断时需排除影响因素 1 GH减少的因素有肥胖 甲减 雌激素 生长抑素 脂肪酸 急性葡萄糖负荷 2 GH增加的因素包括抑制生长抑素 受体阻滞剂 多巴胺能激动剂 胆碱能激动剂 受体激动剂 生长激素释放激素 低血糖 此外 大手术 紧张 胰高血糖素 输入氨基酸等也可引起GH增加 4 泌乳素 PRL 测定 原理 PRL由腺垂体细胞分泌 主要受泌乳素释放抑制激素的调节 许多因素可以影响PRL的分泌 采血要点 1 要求病人在清醒 安静和没有紧张以及乳腺检查之前采血 为避免刺激可于采血前1h预先留置肝素抗凝静脉导管 2 空腹采血 取静脉血2ml 标本不加抗凝剂送检 分离血清待测 2 8 储存24h对结果无影响 超过24h需储存于 20 4 泌乳素 PRL 测定 注意事项和影响因素 1 PRL释放呈脉冲式分泌 存在一个与睡眠相关的波动 睡眠时PRL水平升高 醒后几个小时下降到最低点 因此 为避免睡眠 醒觉时的高峰 建议在9am至中午采血 取3次血清PRL的平均值 每次间隔30 60分钟 2 引起高泌乳素血症的药物因素有H2受体阻滞剂 雌激素 三环类抗抑郁药 利血平 甲基多巴 氯丙嗪 胃复安等 3 垂体损伤 受压或阻断 垂体柄受压或断裂 外伤 手术 放疗等 垂体浸润性疾病 结核 垂体肿瘤 结节病等 垂体炎 空泡蝶鞍 动静脉畸形 脑积水可使PRL水平升高 4 其他使PRL水平升高的因素包括肝脏疾病 肾衰竭 原发甲减 多囊卵巢综合征 肾上腺皮质功能减退等 5 LH FSH测定 原理 LH和FSH由腺垂体分泌 在女性LH的主要作用是促进排卵和黄体形成 FSH促进卵泡生长和发育 在男性LH促进睾丸间质细胞分泌睾酮 FSH刺激和维持精子的发生和成熟 测定LH和FSH对了解下丘脑 垂体 性腺轴的功能状态有重要意义 采血要点 清晨空腹采静脉血2ml 不加抗凝送检 5 LH FSH测定 影响因素和注意事项 促性腺激素释放激素 LHRH 可刺激LH和FSH的分泌 雌激素 孕激素和睾酮在下丘脑和垂体水平对LH FSH进行负反馈调节 LH和FSH受年龄 月经周期的影响 在一天的不同时间LH和FSH可有不规则的分泌波动 单次化验结果有时难以解释 每15 20分钟采血1次 将多次血混合后测平均值 可减少波动造成的差异 在分析LH和FSH时应与靶器官激素同时考虑 如雌二醇 孕酮或睾酮 6 抗利尿激素 ADH 测定 原理 ADH主要由视上核和室旁核合成 经神经垂体分泌 主要受血液渗透压和容量的调节 作用于肾小管和集合管 促进水的重吸收 采血要点 空腹不抗凝静脉血2ml 或在禁水加压素试验开始时 基础 与注射加压素前分别采静脉血 6 抗利尿激素 ADH 测定 注意事项和影响因素 1 血浆渗透压是生理情况下调节ADH分泌的主要因素 高渗和低血容量可刺激ADH分泌 此外 引起ADH升高的其他因素包括从卧位改为立位 老年人 2 某些药物可刺激ADH释放 如尼古丁 吗啡 三环类抗抑郁药 长春新碱 环磷酰胺 安妥明 氯磺丙脲 抑制ADH释放的药物有苯妥英钠 氯丙嗪 乙醇等 第二节 甲状腺和甲状旁腺相关激素测定 2 FT3 FT4测定 3 甲状腺自身抗体TRAb测定 4 TGAb和TPOAb测定 5 完整PTH测定 1 TT3 TT4测定 6 降钙素 CT 测定 1 TT3 TT4测定 原理 全部T4和20 的T3由甲状腺滤泡上皮直接合成和分泌 80 的T3由T4在外周组织脱碘而来 血液中大部分甲状腺激素与TBG呈可逆性结合 T3和T4与蛋白结合的量分别为99 7 和99 97 测定TT3和TT4分别代表结合与游离T3和T4的总量 采血要点 晨空腹取静脉血1 5 3 0ml 不抗凝干燥管送检 分离血清进行测定 注意事项和影响因素 1 受TBG的影响 雌激素 如妊娠 避孕药 可使TBG升高 雄激素 水杨酸 皮质醇 严重肝肾疾病和低蛋白血症时TBG下降 2 血中存在的抗T3 抗T4抗体可以干扰化验结果 使之出现假性增高或降低 根据试验方法 3 采血时病人刚服用含T3的甲状腺激素 可使T3的水平升高 4 服用抑制T4转化为T3的药物如丙基硫氧嘧啶 普萘洛尔 地塞米松 胺碘酮可影响T3值 使T3减少 1 TT3 TT4测定 2 FT3 FT4测定 原理 FT3和FT4不受TBG的影响 是甲状腺激素中具有代谢活性的部分 能更直接反应甲状腺的功能 采血要点 晨空腹取静脉血1 5 3 0ml 不抗凝干燥管送检 分离血清进行测定 注意事项和影响因素 个别人体内存在抗T3和抗T4抗体 可以干扰FT3 FT4的化验结果 在分析时要结合病人情况以及TSH结果来判断病人的甲状腺功能情况 3 TRAb测定 原理 全部TRAb主要由甲状腺内的免疫活性淋巴细胞产生 作用于甲状腺TSH受体上 TRAb为多克隆抗体 其中包括甲状腺刺激抗体 TSAb 使甲状腺激素合成和分泌增加 导致Graves病 甲状腺刺激阻断抗体 TSBAb 使甲状腺激素分泌减少 采血要点 静脉血1 0 3 0ml 不抗凝送检 分离血清测定 注意事项和影响因素 试验方法不同其意义有所不同 放射受体法是依据患者抗体阻断同位素标记的TSH与TSH受体结合而测的TRAb 不能确定TRAb的性质 生物法可以测定兴奋性和阻断性TRAb 4 TGAb和TPOAb测定 原理 甲状腺球蛋白为甲状腺滤泡胶质的主要成份 甲状腺微粒体抗体 TMAb 其真正抗原成份为甲状腺过氧化物酶 TPO TGAb和TPOAb经常存在于甲状腺自身免疫性疾病中 TPOAb与甲状腺淋巴细胞浸润关系密切 采血要点 静脉血1 0 3 0ml 不抗凝送检 注意事项和影响因素 大约10 的健康正常人有低水平的TGAb和TPOAb 影响TGAb和TPOAb的其他因素包括 用甲状腺激素替代治疗慢性淋巴细胞性甲状腺炎可使抗体滴度轻中度降低 甲状腺次全切或全切可使抗体滴度下降 131I治疗使抗体滴度升高 峰值在2 3个月 皮质醇和抗甲状腺药物治疗可降低抗体滴度 患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的儿童和孕妇抗体滴度较低 孕妇产后升高 干扰素 可增加抗体的产生 4 TGAb和TPOAb测定 5 PTH测定 原理 PTH由甲状旁腺的主细胞合成和分泌 血清中完整的有生物活性的PTH 84个氨基酸 占5 20 其半衰期不到5分钟 具有部分生物活性的氨基端PTH片段量很少 PTH分子中无生物活性的羧基端和中段占75 95 有较长的半衰期 使用免疫放射法或免疫化学发光法可以直接测定完整PTH 有较好的准确性 敏感性和特异性 采血要点 空腹不抗凝静脉血2ml 注意事项和影响因素 PTH的分泌在24小时内可有多个峰 主张早晨空腹取血 某些原发性甲状旁腺功能亢进病人高钙饮食的摄入可抑制PTH的分泌 因此 理想的方法是限制钙饮食 元素钙400mg 日 3 5天 抽取血标本后应尽快处理和保存 促进PTH分泌的因素有低血钙 高血磷 降钙素 儿茶酚胺和皮质醇 抑制PTH分泌的主要因素有高血钙 低血磷 低血镁 1 25 OH 2D3和普萘洛尔 老年人PTH水平较中青年高 冬季PTH高于夏季 肾功能不全的病人 其PTH水平可随血清钙的迅速变化 因透析和饮食磷的量 而有较大的波动 5 PTH测定 6 降钙素 CT 测定 原理 CT主要由甲状腺滤泡旁细胞 C细胞 分泌 甲状腺髓样癌来自滤泡旁细胞 自主分泌大量CT 可作为该肿瘤的标记 采血要点 空腹抗凝静脉血2ml 注意事项和影响因素 CT主要受血中钙浓度的调节 高血钙可促进CT的分泌 男性高于女性 随年龄增长降钙素下降 肾功能不全可使降钙素水平升高 肾脏清除减少 第三节 肾上腺功能相关激素测定 1 血浆皮质醇及其昼夜节律2 24H尿游离皮质醇3 肾素 血管紧张素 醛固酮 RAAS 4 尿3 甲氧基 4羟基苦杏仁酸 VMA 5 尿总甲基肾上腺素 MN NMN 1 皮质醇及其昼夜节律测定 原理 皮质醇由肾上腺分泌 受促肾上腺皮质激素 ACTH 调控 具有昼夜节律变化 高峰时间在6 8am 最低值在午夜11 2am 分泌入血的皮质醇有1 3 呈游离状态 大部分与皮质类固醇结合球蛋白 CBG 结合 采血要点 于安静状态下8am 必要时4pm和11pm抽静脉血2ml 加肝素抗凝送检 注意事项及影响因素 引起皮质醇浓度升高的因素有体力活动 精神紧张 各种急性病 手术 感染 饥饿 抑郁症 神经性厌食 饮酒 吸烟 过度劳累和慢性肝肾疾病等 灯光和活动可影响皮质醇的节律变化 皮质醇浓度受CBG的影响 使CBG升高的因素包括妊娠 肥胖 甲亢和雌激素治疗 使CBG降低的因素包括甲减 多发性骨髓瘤和先天性CBG缺乏 1 皮质醇及其昼夜节律测定 2 24h尿游离皮质醇测定 原理 循环中的游离皮质醇通过肾小球滤出 成为尿游离皮质醇 正常占肾上腺分泌皮质醇的1 左右 在皮质醇增多症时 皮质醇的增加超过皮质类固醇结合球蛋白 CBG 的结合能力 使大量游离皮质醇通过肾小球滤出 导致尿游离皮质醇明显增多 采血要点 留24小时尿 标本加入防腐剂 每100ml加1g硼酸 或加5 10ml浓盐酸 记录总尿量 混匀后取20 30ml送检 注意事项及影响因素 精神刺激 过度劳累 各种急性疾病 抑郁 饮酒和吸烟可使尿游离皮质醇升高 尿游离皮质醇不受药物和类固醇结合球蛋白 CBG 的影响 2 24h尿游离皮质醇测定 3 肾素 血管紧张素 醛固酮测定 原理 肾素由肾小球旁器产生 作用于血液中的血管紧张素原 使其产生血管紧张素I 在肺组织 经转换酶作用 形成血管紧张素II 可刺激醛固酮的产生和分泌 试验方法 1 采标本前2周停用有关药物 如 受体阻滞剂 ACEI ARB 利尿剂 激素和甘草等 2 卧位 普食 钠 120mmol 日 卧床8小时以上 于8am采血5ml 分别放入有抗凝剂的特殊试管中 查肾素 血管紧张素II和醛固酮 尽量分离血浆 或置冰浴中送检 3 卧位采血后 站立2 4小时后抽血 查上述化验 注意事项及影响因素 促进肾素分泌的主要因素有细胞外液容量降低和肾小管内钠离子浓度降低 站立可刺激肾素释放 醛固酮的分泌主要是通过肾素血管紧张素的作用 各种影响血容量 血钾和血钠的因素均可影响化验结果 降压药物特别是血管紧张素转换酶抑制剂和利尿剂等会干扰试验结果 应尽可能停用2 4周 血压较高不能完全停用降压药时 其结果要综合分析 在卧立位采血时 为便于分析 应同时采血查皮质醇 用以判别ACTH或应激对醛固酮的影响 3 肾素 血管紧张素 醛固酮测定 4 尿VMA测定 原理 VMA是儿茶酚胺的终末代谢产物 嗜铬细胞瘤时儿茶酚胺产生增多 进一步代谢为VMA 入血后经尿排出 标本收集 留24小时尿 加浓盐酸10ml 加水10ml稀释后再倾入器皿内 防腐 混匀后记录总量 取10 30ml送检 注意事项 采集标本前1周 停食可影响检查的药物和食物 如单胺氧化酶抑制剂 降压药 水合氯醛 桔子 香蕉 香草 巧克力等 避免应激状况 5 尿总甲基肾上腺素 MN NMN 测定 原理 MN 3 甲氧基肾上腺素 和NMN 3 甲氧基去甲肾上腺素 分别为肾上腺素和去甲肾上腺素的中间代谢产物 嗜铬细胞瘤的病人排出量可达正常上限的3倍或更高 血尿MNS推荐为嗜铬细胞瘤生化诊断的一线筛查指标 标本收集 同尿VMA 注意事项 1 尿MN NMN的敏感性和特异性较尿VMA和尿CA高 对嗜铬细胞瘤有较大的诊断价值 2 影响尿MNs排出量的药物主要有 CA类 对乙酰氨基酚 扑热息痛 氯丙嗪 四环素 单胺氧化酶抑制剂 心得安 放射造影剂等 第四节 性腺功能相关激素测定 1 血清睾酮 T 测定2 血清雌二醇 E2 测定3 血清孕酮 P 测定 原理 睾酮在男性主要来自睾丸间质细胞 在女性 睾酮小部分由卵巢间质细胞和肾上腺产生 50 60 由雄激素在外周转换而来 在男性睾酮主要受LH调节 测定睾酮有