第六章-天然药物的鉴定与品质评价PPT课件

1 天然药物的鉴定和质量评价 2 生药鉴定的目的和意义 生药鉴定是在继承中医药学理论和实践的基础上 应用现代科学技术手段来研究生药的来源 性状 显微特征 理化特性等方面的一项重要基础工作 生药鉴定的目的和意义是 鉴定生药品种的真伪优劣 保证患者用药的安全与有效 3 生药中同名异物 同物异名的品种混乱现象普遍存在 直接影响到生药质量 影响到化学成分 药理作用等研究的科学性和制剂生产的正确性 以及临床应用的有效性和安全性 例如商品生药白头翁多达20种以上 其来源分属于毛茛科 蔷薇科 石竹科 菊科 唇形科 玄参科等不同科的植物 生药贯众 全国曾作贯众用的原植物有11科18属58种 均属于蕨类植物 其中各地习用的商品和混用的药材有26种 另外的32种均为民间草医用药 在同物异名的生药中 有的是同科属植物 临床已习惯使用 功效尚相似 有的是不同科或者同科不同属 其化学成分 药理作用和临床疗效不尽一致 有的甚至没有疗效或者作用完全不同 生药的同物异名现象也有不少 例如玄参科的阴行草SiphonostegiachinensisBenth 在北方主要作刘寄奴使用 而在南方则作土茵陈或铃茵陈使用 以假充真或掺伪贵重药材中发现较多 牛黄 麝香 羚羊角 冬虫夏草 西红花 三七 天麻 砂仁等 4 生药鉴定的依据和一般程序 生药鉴定的依据 中华人民共和国药品管理法 2001年修订 第三十二条规定 药品必须符合国家标准 中华人民共和国药典 和药品标准为国家标准 国家药典和国家食品药品监督管理局药品标准 简称局颁药品标准 中华人民共和国药典 以下简称 中国药典 是国家的药品法典 它规定了药品的来源 质量要求和检验方法 全国的药品生产 经营 使用 检验和管理部门等单位都必须遵照执行 新中国成立以来 先后颁布了八版药典 现行版为 中国药典 2005年版 自1963年版起 开始分 二部 一部收载药材和成方制剂 二部收载化学药品 抗生素 生物制品和各类制剂 中国药典 2005年版开始分为三部 一部收载药材及饮片 植物油脂和提取物 成方制剂和单味制剂等 二部收载化学药品 抗生素 生化药品 放射性药品及药用辅料等 三部收载生物制品 首次将 中国生物制品规程 并入药典 5 药材及饮片的记载格式和项目 中文名汉语拼音拉丁名原植 动 物科名 植 动 物名 学名 药用部分 采收季节 产地加工性状 外观 质地 断面特征 气 味鉴别 经验鉴别 显微鉴别 组织 粉末 显微化学反应 理化鉴别 化学试验 薄层色谱等 检查 杂质 水分 灰分等浸出物 水溶性浸出物 醇溶性浸出物 醚溶性浸出物等含量标志含量测定 主要有效成分的含量测定方法及含量限度 幅度 炮制 净制 切制 炮炙 炮制品性味与归经 四气五味 有无毒性 归经功能与主治 以中医 民族医 辨证施治的理论和复方配伍用药经验为主而概括的作用与临床应用用法与用量注意 用药注意事项贮藏 对药品贮藏和保管的基本要求 6 局颁药品标准是现行药典内容的补充 也是国家标准 各有关单位也必须遵照执行 目前 国家食品药品监督管理局尚未颁布新的关于药材的药品标准 由卫生部颁布的 中华人民共和国卫生部进口药材标准 1986 中华人民共和国卫生部药品标准 中药材 第一册 1991 等原部颁标准现属于局颁标准 其体例与药典相同 我国的生药资源极其丰富 品种繁多 对于国家药品标准没有收载的生药 在本地区可依据各省 市 自治区关于药材的地方药品标准进行鉴别 7 二 生药鉴定的一般程序 生药鉴定就是依据国家药品标准以及有关资料规定的生药标准 对商品生药或检品进行真实性 纯度 品质优良度的检定 生药真实性鉴定 包括来源鉴定 性状鉴定 显微鉴定 理化鉴定及生物检定 生药纯度检定是检查样品中有无杂质及其数量是否超过规定的限度 杂质包括生药原植 动 物的非药用部分 有机杂质和无机杂质 无机杂质的检查一般采用过筛及灰分 酸不溶性灰分定量等方法来测定 水分虽然不是杂质 但水分超过一定限度可引起生药生霉 变质和腐烂 故也列入杂质检查范畴 生药品质优良度检定 包括浸出物 有效成分含量的测定和生物检定 以确定检品的质量是否合乎规定的要求 8 中国药典 附录部分收载药材取样法 药材检定通则 药材及成方制剂显微鉴别法 杂质检查法 水分测定法 灰分测定法 浸出物测定法 挥发油测定法 色谱法等 9 一 取样 生药的取样是指选取供检定用生药样品的方法 取样的代表性直接影响到检定结果的正确性 1 取样前 应注意品名 产地 规格等级及包件式样是否一致 检查包装的完整性 清洁程度以及有无水迹 霉变或其他物质污染等 作详细记录 凡有异常情况的包件 应单独检验 2 从同批生药包件中抽取检定用样品的原则 生药总包件数在100件以下的 取样5件 100 1000件按5 取样 超过1000件的 超过部分按1 取样 不足5件的逐件取样 对于贵重生药 不论包件多少均逐件取样 10 3 对破碎的 粉末状的或大小在1cm以下的生药 可用采样器 探子 抽取样品 每一包件至少在不同部位抽取2 3份样品 包件少的 抽取总量应不少于实验用量的3倍 包件多的 每一包件的取样量 一般生药100 500g 粉末状生药25g 贵重生药5 10g 个体大的生药 根据实际情况抽取代表性的样品 如可在包件不同部位 包件大的应从l0cm以下的深处 分别抽取 4 将所取样品混合均匀 即为总样品 对个体较小的生药 应摊成正方形 依对角线画 X 字 使分为四等份 取用对角两份 再如此操作 反复数次至最后剩余的量足够完成必要的试验以及留样数为止 此为平均样品 个体大的生药 可用其他适当方法取平均样品 5 平均样品的量一般不得少于做真实性 纯度和品质优良度等实验所用量的3倍数 即1 3供实验室分析用 另l 3供复核用 其余1 3则为留样保存 保存期至少一年 11 二 杂质检查 生药中混杂的杂质 系指来源与规定相同 但其性状或部位与规定不符 来源与规定不同的物质 无机杂质如砂石 泥块 尘土等 检查方法可取规定量的供试品 摊开 用肉眼或放大镜 5 10倍 观察 将杂质拣出 如其中有可以筛分的杂质 则通过适当的筛分 将杂质分出 然后将各类杂质分别称重 计算其在供试品中的含量 如生药中混存的杂质与正品相似 难以从外观鉴别时 可称取适量 进行显微 理化鉴别实验 证明其为杂质后 计入杂质重量中 对个体大的生药 必要时可破开 检查有无虫蛀 霉烂或变质情况 质检查所用的供试品 除另有规定外 按生药取样法称取 12 生药的鉴定方法 四大鉴定 五大鉴定 基源 原植物 动物 鉴定性状鉴定显微鉴定理化鉴定生物鉴定 13 基源鉴定 分类学鉴定identificationoforiginalplant 基源鉴定 又称原植 动 物鉴定 是应用动植物分类的知识 对中药材的来源进行鉴定 确定学名和药用部位 这是中药鉴定工作的基础 每一种药材都有准确的学名 因此 为了保证中药材每味品种的真实准确性 有利于临床用药的安全有效 进行基原鉴定是相当必要的 观察 记录植物形态 对繁殖器官 花 果实 种子 孢子体等 应特别仔细 深入产地实地调查和采集实物标本 核对文献进行鉴定 中国植物志 中国高等植物科属检索表 中国经济植物志 中国药用植物图鉴 中国高等植物图鉴 中药志 中药大辞典 新华本草 植物分类学报等 必要时核对原始文献 核对标本 对有疑问的生药进行最后鉴定时 往往还需核对模式标本 14 特点 是生药鉴定和一切研究工作 生药生产 资源开发 新药研制 的基础 鉴定比较准确 但采集标本较难 15 2 性状鉴定 macroscopicalidentification 利用眼看 手摸 鼻闻 口尝 水试 火试等十分简便的方法 以生药的外观性状特征为依据对生药进行鉴定 确定生药真伪优劣的方法 16 性状鉴定 形状生药的形状一般与药用部位有关 如根类药材的圆柱形 圆锥形 纺锤形等 老药工们凭经验总结出了许多生动 形象 实用的鉴别术语野山参的 芦长碗密枣核艼 紧皮细纹珍珠须 海马的 马头蛇尾瓦楞身 三七的 铜皮铁骨狮子头 等 17 生晒山参 芦长碗密枣核艼紧皮细纹珍珠须山参支大皮细润五形全美为佳品 18 大小一般指中药材的长短 粗细 厚薄 一般用cm或mm表示 如黄连单枝长3 6cm 直径3 7mm 19 性状鉴定 颜色各种中药材颜色是不相同的 如红色的丹参 紫色的紫草 黄色的黄连 黑色的玄参 但大多数为复色 应以后一色为主色 如黄棕色 即以棕色为主 稍带有黄色 20 表面特征中药材的表面特征不尽相同 如光滑 粗糙 皱纹 皮孔或毛茸等 双子叶植物的根类药材顶部有的带有根茎 单子叶植物根茎有的具膜质磷叶 蕨类植物的根茎常带有叶柄残基和磷片 白花前胡根的根头部有叶鞘残存的纤维毛状物 是区别紫花前胡根的重要特征 21 性状鉴定 质地指药材的软硬 坚韧 致密 粘性或粉性等特征 在经验鉴别中 用于形容药材质地的术语很多 如质轻而松 断面多裂隙的称为 松泡 如南沙参 富含淀粉 折断时有粉尘散落 谓之 粉性 如山药 质地柔软 含油而润泽 谓之 油润 如当归 质地坚硬 断面半透明状或有光泽 谓之 角质 如郁金等 22 折断面指折断面的特征和折断时的现象 描述该药材折断的难易程度和断面特征 断面是否平坦或纤维性 颗粒性 粉性等 如杜仲易折断 断面银胶丝如绵 何首乌难折断 断面可见云锦花纹 黄芪断面有菊花心 黄柏断面显纤维 茯苓易折断 断面粉性颗粒状 23 性状鉴定 气味有些中药材中因含挥发性物质而有特殊的香气或臭气 如麝香 肉桂 阿魏等 味是用舌尖 舔 或取少量药材入口咀嚼而尝到的味感 如山楂 乌梅以酸味为好 黄连味越苦者越好 甘草以味甜为佳 若味感改变 就要考虑其品种和质量问题 注意剧毒和刺激性的药材用口尝时要特别小心 尝后立即吐出并漱口 以免中毒 如草乌 半夏 马钱子等 24 性状鉴定 水试有些药材在水中或遇水能产生特殊的现象 如熊胆粉未投入清水中 即在水面旋转呈现黄线下沉而不扩散 秦皮放入水中浸泡后 浸出液在日光或荧光下显天蓝色荧光 西红花加水浸泡后 水液染成金黄色 这些现象都与药材所含有的化学成分或组织构造有关 25 火试有些药材用火烧之 能产生特殊的气味 颜色 烟雾 闪光和响声等现象 以此可作为鉴别特征之一 如麝香 取少许用火烧时有爆鸣声 随即融化 起油点似珠 香气浓烈四溢 灰为白色 26 3 显微鉴定 microscopialidentification 显微鉴定是利用显微镜来观察药材内部的组织构造 细胞形状及细胞内含物的特征 从而达到鉴别药材的一种方法 由于药材植物体或生物体内部构造比较稳定 多具有种的特异性 对帮助正确鉴别药材有重要应用价值 本法更适用于性状相似不易区别的药材 显微鉴别主要包括显微组织 切片 和药材粉未鉴别两种方法 通常经过制片在显微镜下观察 27 显微鉴定 显微鉴定的步骤 制片 切片 表面装片 粉未制片 解离组织片 观察 记录 绘图等 制片时常用不同的试剂或方法从而鉴别不同的内容 观察淀粉或较薄而透明的样品时 一般用蒸馏水或稀甘油 观察较厚而不透明的组织多用水合氯醛透化制片 目的是增加透明度 有利于透光观察 观察时先将显微制片放镜下观察细胞 组织碎片及后含物 若需要比较其直径或长短 可应用显微测微尺测量 并以微米 m 为单位 观察淀粉粒 甘油醋酸试液蒸馏水观察糊粉粒 甘油装片观察菊糖 水合氯醛液装片不加热 立即观察 观察细胞组织 水合氯醛液装片加热透化 28 显微鉴定 29 1 定义 是利用物理的 化学的和仪器分析方法 对生药及其制剂中所含的主要成分或有效成分进行定性或定量分析 来鉴定生药真伪优劣的方法 4 理化鉴定physicalandchemicalidentification 30 理化鉴定 物理常数测定 适用于油脂类 液体类 如蜂蜜 加工品类 如阿胶 微量升华 利用中药中所含的某些化学成分 在一定温度下能升华的性质 获得升华物 在显微镜下观察其结晶形状 颜色及化学反应作为鉴别特征 如大黄含蒽醌类成分 其粉末升华物有黄色针状 低温 树枝状和羽状 高温 结晶 在结晶上滴加碱液则呈红色 31 理化鉴定 32 化学反应 如显色反应 沉淀反应等荧光分析 利用生药中所含的某些化学成分 在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光性质进行鉴别 如 黄连饮片显金黄色荧光 牛膝饮片显黄白色荧光 浙贝母粉末显亮绿色荧光 33 色谱法 薄层色谱法 高效液相色谱法和气相色谱法是药材鉴定中常用的方法 分光光度法 紫外分光光度法 可见分光光度法 红外分光光谱法 原子吸收分光光度法等 电泳法 带电质点 分子 离子或胶体颗粒 在电场作用下 向着与其所带电荷相反的电极移动 称为电泳 主要用于氨基酸 多肽 蛋白质 核酸等 34 理化鉴定 牛黄薄层色谱 1牛磺胆酸2牛磺去氧胆酸3胆酸15牛黄对照药材4 14 16牛黄 35 注 高效液相色谱仪 HPLC 36 5 DNA分子标记鉴定 中药DNA分子遗传标记鉴定是指通过比较生药间DNA分子遗传多样性差异来鉴别生药基源的方法 a DNA提取技术b 琼脂糖凝胶技术c PCR技术 37 一 限制性片段长度多态 restrictionfragmentlengthpolymorphism 简称RFLP 二 随机扩增多态性DNA RAPD randomamplifiedpolymorphicDNA 和