磷钼蓝分光光度法测定水中的磷.doc

磷钼蓝分光光度法1 适用范围和应用领域 适用于海水中活性磷酸盐的测定2 方法原理 在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于882 nm波长测定吸光值。 3 试剂及其配制 3.1 硫酸溶液c(H2SO4)=6.0 mol/L 在搅拌下将300 mL硫酸(H2SO4,=1.84 g/mL)缓缓加到600 mL水中。酒石酸锑钾-钼酸铵混合溶液 3.2 钼酸铵溶液： 溶解56 g钼酸铵(NH4)6Mo7O244H2O于400 mL水中。溶液变混浊时，应重配。 3.3酒石酸锑钾溶液：溶解12 g酒石酸锑钾(C4H4KO7Sb1/2H2O)于400 mL水中 ，贮于聚乙烯瓶中。溶液变混浊时，应重配。 3.4混合溶液: 搅拌下将45 mL钼酸铵溶液加到200 mL硫酸溶液中，加入5 mL酒石酸锑钾溶液，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。 3.5 抗坏血酸溶液 ：溶解20 g抗坏血酸(C6H8O6)于200 mL水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4避光保存，可稳定1个月。 3.6 磷酸盐标准贮备溶液：（0.300 mg/mL -P）称取1.318 g磷酸二氢钾(KH2PO4)，优级纯，在110115烘12 h)溶于10 mL硫酸溶液及少量水中，全量转入1 000 mL量瓶，加水至标线，混匀，加1 mL三氯甲烷(CHCL3)。此溶液1.00 mL含0.300 mg磷。置于阴凉处，可以稳定半年。 3.7 磷酸盐标准使用溶液：（3.00 g/mL-P）量取1.00 mL磷酸盐标准贮备溶液至100 mL量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCL3)。此溶液1.00 mL含3.00 g磷。有效期为一周。4 仪器及设备仪器及设备如下-分光度计：配5cm测定池；-量筒：容量10ml、50ml、100ml、250ml、500ml-量瓶：容量100ml、1000ml-带刻度具塞比色管：50ml-刻度吸管：容量1ml、5ml、10ml-自动加液器：容量1ml-一般实验室常备仪器和设备5 分析步骤 5.1 绘制标准曲线 5.1 量取磷酸盐标准使用溶液0，0.75，1.50，2.25，3.00，3.75，4.50 ，6mL于25 mL具塞比色管中，加水至25 mL标线，混匀。5.2 各加1.5 mL混合溶液，1.5 mL抗坏血酸溶液，混匀。显色5 min后，注入5 cm测定池中，以蒸馏水作参比，于882 nm波长处测定其吸光值Ai。其中零浓度为标准空白吸光值A0。 5.3 以吸光值(Ai-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。 5.2 水样测定 按以下步骤测定样品A）量取25 mL经0.45 m微孔滤膜（用0.5mol/L的盐酸浸泡12个小时）过滤的水样至具塞比色管中，按标准曲线绘制的步骤测定吸光值Aw。 b)同时量取25 mL水按相同步骤测定分析空白吸光值Ab。6 记录与计算将测定数据记入表1及表2中，据(Ai-A0)做在工作曲线上查得水样中活性磷酸盐浓度(ug/L-P)，亦可用工作曲线的线性回归方程计算。7 精密度和准确度相对误差1.8%；重复性（r）0.015ugL；重复性相对标准偏差2.1%；再现性（R）0.13ugL，再现性相对标准偏差2.4%。8 注意事项本方执行中应注意如下事项：-除非另作说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。-水样采集后应马上过滤，立即测定。若不能立即测定，应置于冰箱中保存，但也应在48h内测完。-过滤水样的微孔滤膜，需用0.5molL盐酸浸泡，临用时用水洗净。-硫化物含量高于2mgL-S时干扰测定。此时，水样用硫酸酸化，同氮气15in，强硫化氢除去，可消除干扰。-磷钼蓝颜色在4h内稳定。9 实验结果标准曲线标准曲线Y=0.1034+0.1015*x实验数据及结果海水样品标号1-11-21-3实验数据0.5000.5510.541磷酸盐浓度3.914.414.31海水样品标号2-12-22-3实验数据0.7090.6820.730磷酸盐浓度5.965.706.17海水样品标号3-13-2