吸烟与肺组织dna加合物形成关系的研究

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/7吸烟与肺组织DNA加合物形成关系的研究吕京1杨柯1崔涛1谢汇江2张海青2孟庆海2赵志文2贺锡雯1【摘要】目的探讨吸烟与人肺组织DNA加合物含量的关系以及在肺癌患者与非肺癌患者之间、男女性之间有无差别。方法提取同期住院原发肺癌患者与非肺癌患者男各19例,女各18例手术切除正常肺组织DNA,采用32P后标记方法测定DNA加合物含量。结果吸烟可明显地引起肺组织DNA加合物含量增高。如果控制吸烟因素,男女之间,非肺癌患者与肺癌患者之间的肺组织DNA加合物水平差异无统计学意义。结论人体中DNA加合物水平与生物学效应之间的关系尚需积累更多的资料加以阐明。【关键词】肺肿瘤DNA加合物吸烟同位素标记STUDIESONTHERELATIONSHIPBETWEENSMOKINGANDFORMATIONOFDNAADDUCTSINLUNGTISSUESLJING,YANGKE,CUITAO,ETALINSTITUTEOFOCCUPATIONALMEDICINECHINESEACADEMYOFPREVENTIVEMEDICINE,BEIJING100050【ABSTRACT】OBJECTIVETOEXPLORETHERELATIONSHIPBETWEENSMOKINGANDCONTENTSOFDNAADDUCTSINTHELUNGTISSUES,ANDTOSTUDYIFTHERE精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/7ISANYITSDIFFERENCEBETWEENTHEPATIENTSWITHANDWITHOUTLUNGCANCERANDBETWEENMALESANDFEMALESMETHODSDNAWASEXTRACTEDFROMTHENORMALLUNGTISSUESDISSECTEDFROMTHECONCURRENTLYHOSPITALIZEDPATIENTSWITHANDWITHOUTLUNGCANCER19AND18EACHFORMALESANDFEMALESCONTENTSOFDNAADDUCTSINTHELUNGTISSUESWEREDETERMINEDBY32PPOSTLABELLINGASSAYRESULTSSMOKINGCOULDCAUSEINCREASEINLEVELSOFDNAADDUCTSINTHELUNGTISSUESTHEREWERENOSIGNIFICANTDIFFERENCEINDNAADDUCTLEVELSBETWEENTHELUNGTISSUESFROMMENANDWOMENANDFROMTHEPATIENTSWITHANDWITHOUTLUNGCANCER,AFTERTHEADJUSTMENTFORSMOKINGFACTORCONCLUSIONMOREDATASHOULDBEACCUMULATEDTOELUCIDATETHERELATIONSHIPBETWEENDNAADDUCTLEVELSINTHEHUMANBODIESANDITSBIOLOGICALEFFECTS【KEYWORDS】TUMOR,LUNGDNAADDUCTSMOKINGISOTOPELABELLING吸烟可致肺癌的观点已广泛被世人所接受。这主要基于以下研究大量的人群流行病学研究从香烟及其燃烧产物中分离鉴定出大量致突物和致癌物动物实验精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/7结果。但人们从没有放弃寻找吸烟与肺癌关系的更直接证据。随着对致癌机理研究的不断深入,人们发现,外来化学物进入体内经生物转化生成亲电活性产物,然后与DNA链上的特异位点结合,形成共价DNA加合物,可能是化学物致癌的途径之一。80年代发展起来的DNA加合物测定方法,特别是32P后标记方法,由于可用于人体样本的检测,极大地推动了这一领域内的研究。靶器官内DNA加合物的水平反映的是更直接的外来物对DNA的作用,尽管人体组织样本十分难得,还是引起了人们极大的关注。通过对17例肺癌患者肺组织DNA加合物含量分析,PHILLIPS等1于1988年在NATURE杂志上提出吸烟可导致肺组织DNA加合物水平升高。国内学者分析了32例肺癌患者肺组织DNA加合物含量2,亦得到同样结果。本文报告了74例人肺组织DNA加合物的含量。与以前报道不同的是,本研究对象除肺癌患者男19例,女18例外,还有37例非肺癌肺部疾病患者男19例,女18例。目的在于探讨吸烟与肺组织DNA加合物的关系是否在肺癌患者与非肺癌患者之间及男女之间有无差异,以期为进一步阐明吸烟与肺癌的因果关系提供证据。材料与方法1主要试剂和仪器核酸酶P1NUCLEASEP1,前列腺精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/7酸性磷酸酶PROSTATICACIDPHOSPHATASE,PAP,多核苷酸激酶POLYNUCLEOTIDEKINASE,PNK,腺苷三磷酸双磷酸酶APYRASE,APY,聚乙烯亚胺纤维素PEICELLULOSE薄层层析板,苯并A芘BAP,购自SIGMA公司32PATP111PBQMOL1,购自北京福瑞生物工程公司医用X光片,化工部第二胶片厂生产LS6000液闪计数仪,BECKMAN公司产品。2人肺组织样本取自北京某医院外科住院病人手术切除部分正常组织。其中原发肺癌病例男19例,女18例同期住院非肺癌肺部疾患病例男19例,女18例合计74例。对入选病例,同时记录年龄,吸烟史,被动吸烟史,职业,居住地,使用燃料类型,父母有无癌症及饮酒史等。加合物分析按GUPTA3的方法提取肺组织DNA,当A260NM/A280NM的比值为时认为纯度达到要求。DNA加合物含量测定按RANDERATH等4的方法进行酶反应，32P后标记,薄层层析,放射自显影分析及液闪测定DNA加合物的含量用相对加合物标记值RAL表示,含义为每108核苷酸中所含加合物数。4质量控制措施同时测定不同剂量BAP染毒小鼠肺组织DNA加合物含量,观察剂量反应关系及作定性分析5所测人肺组织为双盲样本。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/75采用T检验对结果进行统计学处理,差异显著性水平设在P结果与讨论在本实验中我们选用了针对芳烃类DNA加合物的层析液并以BAP染毒小鼠的肺组织DNA加合物作为质控标准。检测DNA加合物的意义在于它提供的是致癌物的“内暴露”水平,特别是在本实验中,反映的是“靶器官中靶分子”水平的暴露剂量,所以意义特别重要。本研究再一次证实,吸烟可非常明显地引起肺组织DNA加合物含量增高39例吸烟者,RAL35例不吸烟者,RALP附表吸烟与肺组织DNA加合物的关系组别例数RAL/108核苷酸S吸烟男肺癌17男非癌15女肺癌5女非癌2不吸烟男肺癌2男非癌4女肺癌13女非癌16精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/7参考文献1PHILLIPSDH,HEWERA,MARTINCN,ETALCORRELATIONOFDNAADDUCTLEVELSINHUMANLUNGWITHCIGARETTESMORKINGNATURE,1988,3367907922张立方,徐坤,李学明吸烟与非吸烟肺癌病人正常肺组织中DNA加合物定量研究中华预防医学杂志，1994,282062093GUPTARCNONRANDOMBINDINGOFTHECARCINOGENNHYDROXY2ACETYLAMINOFLUORENETOREPETITIVESEGUENCESOFRATLIVERDNAINVIVOPROCNATLACADSCIUSA,1984,81694369474RANDERATHK,RANDERATHE,DANNATF,ETALANEWSENSITIVE32PPOSTLABELINGASSAYBASEDONTHESPECIFICENZYMATICDINUCLEOTIDESANDNUCLEOSIDE5MONOPHOSPHATESCARCINOGENESIS,1989,10123112395杨柯,崔涛,吕京,等DNA加合物的32P后标记法的应用及质量控制中华预防医学杂志，1993,273023046GAYLORDW,KADLUB