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第七章 多底物酶反应动力学多底物酶占所有酶的一半以上。见下表:表 酶反应按底物数的分类反应底物数酶类型酶催化反应式占总酶数的%单底物反应异构酶AB5单向一底物反应裂合酶AB + C12假单底物反应水解酶A-B + H2OA-OH + BH26双底物反应氧化还原酶AH2 + BA + BH227基团转移酶A + BXAX + B24三底物或多底物反应连接酶X + Y + ATPX-Y + ADP + Pi6X + Y + ATPX-Y + AMP + PPi7.1 双底物酶反应机制7.1.1 顺序机制ordered mechanism此机制有三元复合物生成,大部分脱氢酶属于顺序机制。7.1.2 Theorell Chance机制此机制也属顺序机制,只是没有三元复合物生成。如肝醇脱氢酶,A为NAD+,B为乙醇,P为乙醛,Q为NADH。7.1.3 随机机制random mechanism许多激酶的催化机制属于此类。7.1.4 乒乓机制ping pong mechanism转氨酶、转磷酸酶、转酰基酶属于此机制。7.2 双底物顺序反应动力学7.2.1 反应模式7.2.2 速度方程推导按快速平衡法,如果k4、k5 k1、k2,则总反应的限速步骤为EAB的生成,故可将反应模式简写成:, , , , 分子分母同乘以AB得, , , 分子分母同乘以AB得a当A固定,B可变时,速度方程可写成: ,此方程形式与米氏方程相同。b当B固定,A可变时,速度方程可写成: ,此方程形式也与米氏方程相同。7.2.3 讨论a固定两种反应物中的任一种,都可以使速度方程写成米氏方程的形式;两种反应物浓度都变化时,则不为米氏方程的形式。b当A固定,B可变时,A影响表观米氏常数,不影响最大反应速度。c当B固定,A可变时,B既影响表观米氏常数,又影响最大反应速度。7.2.4 作图法求动力学参数7.2.4.1 A固定,B可变时a双倒数作图, 此直线的横轴截距。b斜率对再作图斜率此直线的横轴截距。c横轴截距绝对值的倒数对再作图此直线的横轴截距。7.2.4.2 B固定,A可变时a双倒数作图在不同的B下以对作出不同的直线,这些直线交于第三象限的一点,交点坐标为,横轴截距。b纵轴截距对再作图纵轴截距此直线的横轴截距。c横轴截距的绝对值对B再作图横轴截距此直线的横轴截距。7.3 Theorell Chance机制动力学7.3.1 反应模式7.3.2 速度方程推导

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