生物安全手册.doc

实验室生物安全手册松原市食品药品检验所二O一一年十二月1 概述1.1 编制生物安全手册目的及依据 为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术，加强病源微生物实验室安全管理，避免实验室感染，有效防止各种病原菌对实验室工作人员健康危害，防止实验室事故，依据中华人民共和国食品安全法及相关法律法规制定本手册。本手册技术要求依据微生物和生物医学实验室生物安全通用准则WS233-2002、实验室生物安全通用要求GB 19489-2004、和生物安全手册WHO第三版，2004制定。1.2 生物安全手册适用范围 本手册适用于松原市食品药品检验所食品、药品、保健食品、化妆品微生物检验实验室。1.3生物安全手册目标本所坚持以人为本，安全第一，科学，公正，优质，高效的质量方针，实现对实验室人员、周边环境、操作样本的安全管理。2 实验室生物安全管理制度2.1实验室负责人职责2.1.1实验室负责人负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作。对所有实验室人员和实验室来访者的安全负责。对实验室以及实验人员进行日常管理监督。2.1.2制定、维护和监督有效的实验室安全计划。该安全计划应包括教育、定位及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。2.1.3监督有关法律和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权阻止不安全的活动。实验室负责人应制定规定和程序确保实验室设施、设备、个人防护设备、材料等符合国家有关安全要求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。2.1.4确保提供实验室人员适当的实验室安全方面（如潜在危害性，保护暴露者必要的注意事项以及暴露评估程序）的培训。实验室人员必须接受年度最新的补充培训，以了解操作规程和政策的变化。2.1.5定期或不定期组织进行实验室安全自查，对于自查情况应有记录，对重大生物安全隐患或发现问题应立即向上级生物安全委员会汇报，对发现问题应有整改与复查措施。2.2 实验室管理制度2.2.1实验室准入制度2.2.1.1实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员，实验室参观人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室负责人的批准，非实验有关人员和物品不得进入实验室。2.2.1.2从事实验室技术人员必须具备相关专业教育经历，相应的专业技术知识及工作经验，熟练掌握自己工作范围的技术标准、方法和设备技术性能。2.2.1.3从事实验室技术人员应熟练掌握与岗位工作有关的检验方法和标准操作规程，能独立进行检验和结果处理，分析和解决检验工作中的一般技术问题，有效保证所承担环节的工作质量。2.2.1.4从事实验室技术人员应熟练掌握常规消毒原则和技术，掌握意外事件和生物安全事故的应急处置原则和上报程序。2.2.1.5进入实验室前必须根据实验室的生物安全级别做好相应的个人防护，熟记紧急情况下的正确应对措施。2.2.1.6实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室进行工作。出现下列情况，不应进入上述区域。（1）、身体出现开放性损伤；（2）、患发热性疾病；（3）、感冒、上呼吸道感染或其他导致抵抗力下降的情况；（4）、妊娠期间；（5）、已经在P2级实验室连续工作4小时以上或其他原因造成的疲劳状态。（6）、16岁以下儿童不应被授权进入实验室工作区。2.2.2设施/设备监测，检测和维护制度2.2.2.1生物安全柜安装维护与管理基本要求2.2.2.1.1实验室涉及任何待检样品与微生物操作不能使用超净工作台，高致病性病原微生物相关试验均应使用生物安全柜。2.2.2.1.2生物安全柜应安装在位于远离人员活动、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。在安全柜的后方以及每一个侧面要尽可能留有30cm的空间，以利于对安全柜的维护。在安全柜的上面应留30-50cm的空间。生物安全柜的所有维修工作应该由专业人员来进行。在生物安全柜操作中出现的人和故障都应该报告，并应在再次使用之前进行维修。2.2.2.1.3新购置生物安全柜应有厂家提供的厂家资质证书与该生物安全柜合格报告书，安装后应进行现场检测合格后方可使用。安全柜被移动位置后、检修后、更换高效过滤器后或每使用一年后均应进行常规现场检测。2.2.2.1.4应制定生物安全柜操作规程，制定相应的使用记录。2.2.2.1.5生物安全柜只有能正常运转时方可使用。2.2.2.1.6使用生物安全柜时，不要打开观察窗。2.2.2.1.7柜内尽量少放仪器和物品。不要阻塞后面气口处的空气流通。物品要先经过表面净化才可放到柜内的工作区。2.2.2.1.8禁止在柜内使用酒精灯。它产生的热量会改变气流方向，也可能破坏滤板。允许使用微型电炉，但无菌的一次性接种环更好。2.2.2.1.9在柜内的所有工作都要在工作台中央或后部进行，并且通过观察能看见柜内的操作。2.2.2.1.10尽量减少操作者后面的人员走动。2.2.2.1.11操作者不要因频繁移动及挥动手臂破坏气流。2.2.2.1.12前面的空气栅格不要被注意事项、吸管或其它材料堵塞，因为这样会干扰气流，引起潜在的材料的污染和操作者的暴露。2.2.2.1.13操作结束后或下班前，应作用适宜的消毒剂擦拭生物安全柜的台面。2.2.2.1.14生物安全柜的风机在工作开始前及操作结束后至少要再开动五分钟。2.2.2.2蒸汽高压灭菌装置安装维护与管理基本要求2.2.2.2.1为防止蒸汽高压灭菌装置在排空内部空气过程中可能将微生物带出，宜选择不外排蒸汽型高压灭菌装置。2.2.2.2.2新购置蒸汽高压灭菌装置应有厂家提供的厂家资质证书、国家高压容器批准证书、该蒸汽高压灭菌装置合格报告书。2.2.2.2.3新购置高压灭菌器应进行蒸汽灭菌效果验证合格后方可使用，每间隔半年应进行蒸汽灭菌器灭菌效果检测。2.2.2.2.4应制定高压灭菌器操作规程，制定相关的使用记录。2.2.2.2.5仪器校准/期间检查的要求：压力表检定每半年年一次2.2.2.3 冰箱维护与管理基本要求2.2.2.3.1冰箱、冷藏柜应当定期除霜和清洁，应清理出所有在储存过程中破碎的安瓿和试管等物品。清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护，清理后要对内表面进行消毒。2.2.2.3.2储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。2.2.2.3.3应当保存一份冻存物品的清单。2.2.2.3.4除非有防爆措施，否则冰箱内不能放置易燃溶液。冰箱门上应注明这一点。2.2.2.3.5冰箱、冷藏柜应定期检查，并登记温度。3 健康医疗监测制度3.1 对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况。3.2实验室技术人员要在身体状况良好的情况下从事相关工作，发生发热、呼吸道感染、开放性损伤、怀孕等或因工作造成疲劳状态免疫耐受及使用免疫抑制剂等情况时，需由实验室主任同意从事相关工作，但不宜再从事高致病性病原微生物的相关工作。4 生物安全实验室安全自查制度4.1科室主任每年至少组织一次生物安全全面检查，检查内容包括：生物安全管理体系运行情况、生物安全管理制度是否完善、是否落实、实验室设施、设备和人员的状态、应急装备、报警体系和撤离程序功能及状态是否正常、可燃易燃性、传染性、放射性以及有毒物质的防护、控制情况、废物处置情况等。4.2科室主任负责实验室生物安全的全面管理，检查、督促生物安全监督员工作，每季度进行科室生物安全工作检查，检查内容包括：生物安全柜使用记录、菌（毒）株、样本的保存、使用、销毁情况、生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况、生物安全设备的运行、维护情况。4.3对于检查中发现的问题及时纠正，必要时制定纠正措施或实施整改，并进行跟踪验证。4.4按照资料、档案管理制度保存所有检查记录，及时归档。5 生物安全实验室资料档案管理制度5.1生物安全实验室记录、资料应至少包括：生物安全手册、生物安全管理制度、生物安全检查记录、健康监护档案、事故报告、分析处理记录、废物处置记录、实验记录、菌（毒）种、保存、销毁等记录、生物危害评估记录、生物安全柜现场检测记录、消毒、灭菌效果监测记录等。5.2生物安全实验室资料档案原则上不外借。5.3因工作需要复制档案资料者需经批准。5.4超过保存期限的档案资料、记录，应经批准是否实施销毁，销毁应至少两人实施，做好销毁记录。6 实验人员培训和能力保证制度6.1 所技术委员会负责实验室人员的组织管理、上岗资格认定、培训、岗位制定和准入标准。负责成立实验室人员考核工作组，定期对实验室人员基本知识、操作技能、生物安全进行考核与评价。6.2 实验室主任负责根据实验室管理的各项要求，组织和实施实验室的各项工作，保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠；组织业务技术培训，对培训的结果进行考核，包括实验室安全知识和操作技术考核，以决定工作人员进入实验室控制区域工作的资格；组织对实验室装备的常规保养；在实验室内发生事故或紧急情况时，决定并采取紧急处置措施，并负责向上级报告。6.3 实验室工作人员在实验室主任的领导下开展工作；严格执行国家、本所的实验室管理法规制度；定期参加培训、考核，从事高致病性实验的工作人员，实行自我监测和报告，定期体检；实验中发现异常情况及时向实验室主任报告；并立即采取控制措施。6.4 由本单位人事部门组织人员培训，实验室负责人组织本实验室人员的专项知识技能培训。培训应至少包括以下内容：病原微生物、生物安全的法律法规和条例；实验室基本操作标准、规范；实验室生物安全和个人防护；实验室清洁及消毒方法。生物安全实验室工作的特殊要求；菌毒种收集、保藏、运输、使用和销毁的要求；生物安全知识和应急处理技能培训；特殊实验室设备的使用和维护。6.5 根据工作需要对实验室人员进行的考核，通用和专项知识技能考核，应包括口试、笔试与实际操作。任何培训和考核都应有相应的记录并存档备案，以作为实验室人员的资质和年度考评之重要组成部分。6.6 实验室工作人员必须达到以下要求，才可获得准入资格。通过实验室专业以及生物安全知识培训，考核合格方可上岗，所有工作人员上岗前应签定知情同意书，证实其已阅读并理解生物安全手册内容，知道所进行工作的危险性和危害性以及预防办法，并自愿从事该项工作。6.7 建立实验室人员健康档案，所有从事高致病性微生物实验室工作人员在进行实验室前都要定期健健康体检，所有检查结果应存档。6.8 实验室人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。对实验室工作人员实行健康监测与报告，出现可疑症状体征时应及时向实验室负责人报告，并立即停止工作，时行必要的医学观察和处置。7 意外事件处理及报告制度7.1预防及处理原则7.1.1实验室主任负责制定应对涉及本科室及工作的意外事故应急处理程序和预案，报技术委员会备案，实验室人员应熟记紧急情况下的正确应对措施。7.1.2实验中发现异常情况应及时向实验室主任报告，并立即采取控制措施；同时做好详细的记录。实验室发生安全事故时，应视事故类型等不同情况，进行紧急处理，并详细记录事故经过，按规定报告所技术委员会。7.2意外情况处理7.2.1应制定紧急撤离的行动方案。该方案应考虑到生物性、化学性、失火和其他紧急情况。应包括所采取的使留下的建筑物处于尽可能安全状态的措施。所有实验室人员都应了解紧急撤离的行动方案、撤离路线和紧急撤离的集合地点。7.2.2实验室主任应备有用于急救的物品储备（如急救药箱，包括普通的和特殊的解毒剂等）。7.3事故应急处理方案7.3.1发生实验室意外和事故后，应及时通知实验室安全员实验室主任，并做好详细记录备查。制定实验室有毒有害化学品、感染性材料溢出时的应急处理方案，实验室人员意外损伤的处理措施，实验室所有人员都应熟知报警电话110、火警电话119、急救电话120及指定医院电话。实验室必须备有急救箱（包括普通和特殊解毒剂）、灭火器，备有防护服、防间消毒工具（如喷雾剂）、工具、（如锺子、斧子、扳手、螺丝刀、梯子、绳子）等物品。7.3.2当实验室人员从事高致病性工作时，如果出现不适症状，要及时报告实验室主任，并且立即停止工作。实验室主任应该立即向所技术委员会报告。并且立即到当地定点收治医院，置单间治疗，并采取相应的医院内感染控制措施，直至病例被排除。7.3.3意外接种、割伤和擦伤，受伤人员应脱去保护服，洗净双手和受伤部位，使用适当的消毒剂，进行急救，同时通知主任受伤的原因及所污染的微生物，如果确实需要，应该征求并遵守医生的建议，并把正确的完整的医疗资料存档。7.3.4潜在的危险材料的意外吸入应脱去防护服并送至急救。7.3.5所有人员应立即撤离现场，任何暴露的人员都应咨询医疗建议。并且马上通知实验室主任。至少1小时内任何人不得进入事发房间，并贴出标识以示禁止进入。规定时间过后，应穿上防护服并配戴呼吸保护装置，在主任的监督下进行房间净化。7.3.6打碎或溅出传染性物质，包括培养物污染了感染性物质的破碎物品，包括小瓶或容器以及包括培养物在内的感染性物质溅出，应该先用一快布或纸巾盖上，再把消毒剂倒到上上面，至少静置30分钟，然后才可用布和纸巾把打碎的物品清理走。玻璃碎片应用镊子夹取，污染区应用消毒剂施干净。如果使用了畚箕清理打碎的器皿，应该将畚箕高压或放在有效的消毒剂里浸泡24小时。布、纸巾和清理用的拖布应放到盛装污染废弃物的容器里。所有以上这些步骤应戴手套进行。如果实验室的其它打印的或手写的材料被污染了，应把这些材料的内容抄到另外的表格上，并把原件丢到盛装污染废弃物的容器里。8 危险标识制度实验室门上贴有国际通用的生物危害警告标志（见下图）。 菌种以及培养物保藏菌种在保藏过程中可能有裂痕或破碎，在低温保存有裂痕或密封不严的安瓶在取出时破碎或爆炸。培养物在冰箱保存不当可能破碎、滴漏导致病源微生物泄露；培养物标识不清可能导致操作者误取或放松对危险物的警惕造成危害。拟采取防护措施：一、 冰箱、低温冷柜和干冰柜应当定期除霜和清洁，应清理出所有在储存过程中破碎的安瓶和试管等物品。清理时应戴厚橡皮手套并进行面部防护，清理后要对内表面进行消毒。二、 储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的学名、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。三、 保存一份冻存物品的清单并定期清点与销毁。四 、冰箱内不放置易燃溶液，如必须放置时在冰箱门上明确标示。实验室工作人员取出样品时，应进行眼睛和手的防护，并对外面进行消毒。副溶血性弧菌实验危害程度风险评估报告一、副溶血性弧菌的主要来源副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus）是一种嗜盐性细菌。副溶血性弧菌食物中毒，是进食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及含盐分较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存1个月以上，海水中可存活47天。此菌对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死；对热的抵抗力也较弱。副溶血性弧菌食物中毒多发生在610月，海产品大量上市时。中毒食品主要是海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染。二、副溶血性弧菌生物学特征副溶血弧菌系弧菌科弧菌属，革兰染色阴性，兼性厌氧菌，为多 副溶血弧菌形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸。最适宜的培养基：温度为3037，含盐2.5%3%(若盐浓度低于0.5%则不生长），pH值为8.08.5。本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中l一3min即死亡。在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在3一35含盐水中繁殖迅速，每89min为一周期。对高温抵抗力小，50 20 min；65 5 min 或80 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。三、副溶血性弧菌致病因素及临床表现潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日320余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。约2%16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样 副溶血性弧菌或粘液血样，但很少有里急后重。由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表现为急发病，潜伏期224h，一般为10h发病。主要的症状为腹痛，优势腹痛在脐部附近剧烈。腹痛是本病的特点，多为阵发性绞痛，并有腹泻、恶心、呕吐、畏寒发热，大便似水样。便中混有黏液或脓血，部分病人有里急后重，重症患者因脱水，使皮肤干燥及血压下降造成休克。少数病人可出现意识不清、痉挛、面色苍白或发绀等现象，若抢救不及时，呈虚脱状态，可导致死亡。四、实验室检查（一）、辅助检查1、白细胞计数总数多在1万mm3以上，中性粒细胞偏高。 2、便检查镜检可见白细胞或脓细胞，常伴有红细胞，易被误诊为菌痢。粪便培养可检出副溶血弧菌，绝大多数迅速转阴，仅少数持续阳性24天。（二）、预防措施包括：动物性食品应煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前应充分加热；防止生熟食物操作时交叉污染；海产品宜用饱和盐水浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。（三）治疗措施包括：1、支持及对症治疗脱不者需输入生理盐水及葡萄盐水，或口服补液盐，以纠正失水。血压下降者，除被补充知容量，纠正酸中毒等外，可酌用血管活性药。 2、抗菌药物轻者患者可不用抗菌药物，较重者可给复方新诺明或庆大霉素、阿米卡星和诺氟沙星等喹诺酮类抗菌药物。 3、发生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到医院医治。副溶血性弧菌对氯霉素敏感。呕吐、腹泻严重者要补充水和盐。（四）、中毒预防加工海产品的案板上副溶血弧菌的检出率为87.9%。因此，对加工海产品的器具必须严格清洗、消毒。海产品一定要烧熟煮透，加工过程中生熟用具要分开。烹调和调制海产品拼盘时可加适量食醋。食品烧熟至食用的放置时间不要超过4个小时。主要病理变化为空肠及回肠有轻度糜烂，胃粘膜炎、内脏（肝、脾、肺）淤血等。 志贺氏菌实验危害程度风险评估报告1、 危害程度分类（1） 分类等级志贺氏菌为细菌性痢疾的病原菌。在卫生部公布的人间传染病的病原微生物名录分类等级中为第二类，属高致病性病原微生物。（2） 不同实验操作生物安全实验室级别要求根据名录中对不同类别病原微生物进行不同实验要求的生物安全级别实验室的解释，在实验操作设计志贺氏菌的大量培养、冻干等易产生气溶的实验操作应在BSL-2实验室进行。2、 背景资料细菌性痢疾主要的传播途径：食物型传播：痢疾杆菌在蔬菜、瓜果、胭菜中能生存12周，并可繁殖，食用生冷事物及瓜果可引起菌痢发生。带菌厨师和痢疾杆菌污染食品常可引起菌痢爆发。水型传播：痢疾杆菌污染水源可引起爆发流行。日常生活接触型传播：污染的手是非流行季节中散发病例的主要传播途径。桌椅玩具门把公共汽车扶手等均可被痢疾杆菌污染，若用手接触后马上抓食，或小孩吸允手指均会致病。苍蝇传播：苍蝇粪食兼食极易造成食物污染。细菌性痢疾又称志贺氏菌病，由志贺氏菌属引起，是发展中国家的常见病，多发病，严重危害着人们的健康，尤其是儿童的生长发育。全世界每年死于志贺氏菌感染的人数约为60万。据1994年1997年的检测资料表明，我国年报告病例在6085万，发病率居甲乙类传染病之首，病死率为0.040.07%。志贺氏菌致病性强，10-100个细菌细胞就可以使人发病，多数临床分离的菌株为多重耐药性。志贺氏菌菌血清型繁多（共47个血清型）。根据生化反应和0抗原的不同，将志贺氏菌分为4个血清群（即痢疾志贺氏菌，福氏志贺氏菌，鲍氏志贺氏菌，宋内氏志贺氏菌，又依次称为ABCD群），共有37个血清型或亚型（其中A群15个，B群13个，C群18个，D群1个）。A群和C群的所有菌型及B群之2a、6型均含有K抗原。我国的优势血清型为福氏2a、宋内氏志贺氏菌的分离率较高。痢疾I型志贺氏菌产生志贺氏毒素，可引起溶血性综合症。（1） 志贺氏菌的生物学症状志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小，不形成荚膜和芽胞，有菌毛。为兼性厌氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最适生长温度为37，最适pH为7.27.4；对营养要求不高，能在普通培养基上生长。在常用的肠道选择性培养基SS和麦康凯平板上生长良好，因不发酵乳糖而使菌落呈无色透明。（2） 志贺氏菌的致病因素志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素，痢疾志贺氏菌产生志贺毒素。侵袭力是志贺氏菌致病的主要毒力因子，由侵袭性大质粒介导。编码侵袭性的基因主要有ipaABCD,缺失了侵袭性基因的菌株，不能够引起痢疾。可使用检测ipaB基因的PCR方法来坚定志贺氏菌的毒株。志贺氏菌侵犯的主要部位是结肠和直肠，偶尔也会波及空肠。志贺氏菌侵入肠上细胞后，在细胞内繁殖并向临近细胞扩散，造成病变部位的中性粒细胞和多形核细胞的沁润，局部上皮细胞坏死和溃疡。志贺氏菌感染主要局限于肠道，细菌一般不进入血流。志贺氏菌属各菌株均有强烈的内毒素，可破坏肠粘膜，形成炎症、溃疡、呈现典型的痢疾脓血便。痢疾志贺氏菌1型产生志贺氏毒素，志贺氏毒素具有肠毒性、细胞毒性和神经毒性，感染后一部分患者可发生溶血性尿毒综合性。亦可引起发热、神志障碍、中毒性休克等。志贺氏菌属主要引起细菌性痢疾，按临床表现可分为两型：（一）急性细菌性痢疾：又分典型、非典型及中毒型三种。典型的急性细菌性痢疾的主要特征是起病急，发热、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便，并有中度全身中毒症状。腹泻日10余次或更多，但量不多。重症患者伴有惊厥、头痛、全身肌肉酸痛，也可引起脱水和电解质紊乱。非典型的急性细菌性痢疾以婴儿多见。多无全身中毒症状，不发热或低热。腹痛较轻，腹泻1日35次。粪便呈水样或稀糊状，含少量粘液，但无脓血。左下腹可有压痛。食欲减退，并有恶心、呕吐。急性中毒性菌痢起病急、发展快，体温可达40以上。小儿患者早期出现烦躁、惶恐、谵妄和惊厥等。少数患儿可表现抑郁，如嗜睡、精神萎靡、昏迷或半昏迷等，数小时内可发生休克或呼吸衰竭。小儿主要表现为高热、惊厥。发病初期肠道症状不明显。成人患者主要表现为脓血便频繁，循环系统症状明显。（二）慢性细菌性痢疾：可为急性细菌性痢疾治疗不彻底，或迁延未愈，或开始症状较轻而逐渐发展起来，且病情迁延达两个月以上者。细菌性痢疾的带菌者有三种类型，即恢复期带菌者、慢性带菌者和健康带菌者，后者是菌痢的主要传染源，特别是炊事员和保育员中的带菌者，危险性更大。细菌性痢疾的诊断原则为依据流行病学史、症状体征及实验室检查进行综合诊断，确诊则需依赖于病原学检查。（一）流行病学史：病人有不洁饮食或与菌痢病人接触史。（二）症状体征1、急性非典型菌痢：症状轻，可仅有腹泻、稀便。2、急性典型菌痢：急性起病、腹泻（排除其他原因）、腹痛、里急后重、可伴发热、脓血便或粘液便、左下腹部压痛。3、急性中毒型菌痢：发病急、高热、呈严重毒血症症状，小儿发病初期可无明显腹痛腹泻症状，常需经灌肠或肛拭做粪检，才发现是菌痢。根据主要临床表现有以下类型：休克型（周围循环衰竭型）：有感染性休克症状，如面色苍白、四肢厥冷、脉细速、血压下降、皮肤发花、发绀等。脑型（呼吸衰竭型）：有脑水肿表现，如烦躁不安、惊厥、嗜睡或昏迷、瞳孔改变，甚至出现脑疝、呼吸衰竭。混合型：同时出现脑型、休克型的征候,是最凶险的一型。4.慢性菌痢:急性菌痢者病程超过2个月以上为慢性菌痢。(三)实验室检查1.粪便常规检查，白细胞或脓细胞15/HPF(400倍)，可见红细胞.2.病原学检查，粪便培养志贺菌属阳性为确诊依据。(一)预防原则应以切断传播途径为主，同时加强对传染源管理的综合性防治措施。对重点人群、集体单位应特别注意预防暴发或流行。（二）治疗原则1病原治疗：细菌性痢疾可以是自限性的，一般情况下可以不使用抗生素。对症状比较严重的患者，抗生素治疗可缩短病程、减轻病情和缩短排菌期。但是，治疗痢疾