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文档简介

交叉配血（凝聚胺法）1、检验目的：规范操作程序，保证受血者用血安全。2、实验原理：聚凝胺（ploybreene）,一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。在检测抗体活性的聚凝胺试验中，红细胞与血清首先在低离子介质中孵育，来促进抗体与红细胞结合，然后加入聚凝胺来凝集细胞。离心后，凝集的细胞不再悬浮，加入重新悬浮液，聚凝胺的凝集作用可通过加入椽酸钠而中和，使正常红细胞的凝集解散，而抗体引起的凝集仍存在。3、样本要求：输血前3天内抽取的抗凝静脉血，禁止使用溶血或已污染的血样，标签不全者拒收。4、材料：试剂（聚凝胺测定配套试剂盒）（1）低离子介质溶液 （2）聚凝胺试剂（3）重新悬浮液（4）阳性对照溶液5、仪器：5.1 白洋80C自动平衡离心机5.2 电热恒温水箱5.3 光学显微镜6、操作步骤：6.1. 取玻璃试管，标记主次侧及对照管，以生理盐水洗涤受者红细胞三次，配成3-5%红细胞悬液。主侧加受血者血清（浆）2滴，加献血者3-5%红细胞悬液1滴；次侧加献血者血清（浆）2滴，加受血者3-5%红细胞悬液1滴。对照管加入阳性对照血清2滴，再加入供（献）者5%红细胞悬液1滴。6.2每管各加低离子介质溶液2滴，混合均匀，室温浮育一分钟。6.3每管各加2滴0.05%聚凝胺溶液，混合后静置15秒。6.43000 rpm离心30-60秒，检查上清有无溶血反应，若无，倾去上清液。轻轻摇动试管，观察有无凝集，如无凝集，必须重做。6.5加入2滴重新悬浮液，并轻轻混合，肉眼或显微镜观察结果。6.6结果判断：如凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为配血相合；如凝集不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，为配血不相合，结果须在3分钟内判读。7、影响因素和药物干扰：7.1在室温较低时，某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性。遇此现象可用37-40生理盐水洗涤红细胞并置37水溶中轻轻摇动，观察结果。7.2若病人血清(血浆)含有肝素，如洗肾患者能影响配血，须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。7.3 红细胞悬液以5为宜，过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当，反应不明显易误判。7.4 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。8、操作注意事项：8.1 试管，滴管吸头和玻片必须清洁干燥，防止溶血。8.2 操作方法应按规定，先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。8.3 离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，
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