同型半胱氨酸的检测及临床应用

1,同型半胱氨酸的检测及临床应用,电力医院：马林,2018/1/17,2,认识同型半胱氨酸,高半胱氨酸，或称为同型半胱氨酸或同半胱氨酸，是氨基酸半胱氨酸的异种，在旁链部份硫醇基（-SH）前包含一个额外的亚甲基（-CH2-）。,2018/1/17,3,前 言,同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物。,2018/1/17,4,2018/1/17,5,热 点,最新热点:许多学者认为血液Hcy升高已成为动脉粥样硬化发生的一个独立危险因子，也成为基础医学和临床医学研究的新热点。最新理念:伴有血浆Hcy升高(10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。,2018/1/17,6,同型半胱氨酸（Hcy）能够让四分之三的高血压患者脑卒中死亡风险增加12倍。,2018/1/17,7,1. 加速氧化及衰老2. 损伤你的动脉3. 削弱的免疫系统4. 对大脑的损伤及降低智商5. 增加疼痛、炎症及血栓6. 易患癌症及解毒问题7. 加速衰老的大脑8. 激素问题9. 维生素B的缺乏10. SAMe的缺乏,升高可能与这些有关,2018/1/17,8,一、Hcy的存在形式,有研究发现在正常人和高Hcy血症患者血浆中，Hcy大部分（70-80）是与蛋白质结合，血浆中与Hcy结合的是白蛋白。少部分为游离的氧化型形式，20-30%.极少部分为游离的还原型形式，小于1%,2018/1/17,9,一、Hcy的存在形式,Hcy在血液中的存在方式: 部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。,2018/1/17,10,二、影响血液Hcy水平的因素,1、遗传因素： C667T点突变可引起Hcy升高。 CBS基因多态性。 蛋氨酸合成酶基因多态性。,2018/1/17,11,2、性别与年龄：Hcy随年龄增长而升高，而且男性女性。女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。,2018/1/17,12,3、营养因素： VitB6、VitB12、叶酸是Hcy代谢辅酶，它们的水平与Hcy水平呈负相关，摄入不足时，上述三个酶活性下降，则Hcy升高,2018/1/17,13,3、营养因素：饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成高Hcy血症。 饮食中蛋氨酸含量过高：有报道认为高动物蛋白、低植物蛋白饮食可能是高Hcy血症的危险因素之一。豆制品、黑芝麻酱、海藻类较多，胜过牛肉，但是大豆蛋氨酸少。,2018/1/17,14,三、同型半胱氨酸致病机理,1、内皮毒性作用： 高Hcy可引起内皮细胞损伤，特别是在合并高血压时更易受损，并且破坏血管壁弹力层和胶原纤维。2、刺激血管平滑肌细胞增生： 高Hcy可直接诱导血管平滑肌细胞增殖。,2018/1/17,15,3、致血栓作用： Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活蛋白C和凝血因子、，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集容易形成血栓。,三、同型半胱氨酸致病机理,2018/1/17,16,Hcy通过多种途径损伤血管，它损伤血管内皮细胞同时刺激血管平滑肌细胞生长，二者导致的损伤阻塞血流通路；Hcy还破坏正常凝血机制；增加血栓形成引起心脏病发作及中风 。,10,三、同型半胱氨酸致病机理,2018/1/17,17,4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱： Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。,11,三、同型半胱氨酸致病机理,2018/1/17,18,5、干扰谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。Hcy干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害 。,12,三、同型半胱氨酸致病机理,2018/1/17,19,6、影响体内的转甲基化反应 ： Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，如核酸（DNA和RNA）、蛋白质、髓磷脂、多糖、胆碱和儿茶酚胺类的甲基化；甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这是Hcy致病的关键因素。,三、同型半胱氨酸致病机理,2018/1/17,20,四、我院Hcy循环酶法实验参数的设计,下面列举电力医院OLYMPUS的实验参数： Sample Volume（样品体积）： 9ul R1 Volume （试剂1体积）：167ul R2 Volume （试剂2体积）： 45ul Measure Wave1（主波长） ：340nm Measure Wave2（副波长） ：700nm,2018/1/17,21,METHOD （反应类型） ： END Method Point（反应点）： 2027Reagent OD Limit（吸光度范围）：-2.02.5Dynamic Range (反应范围)： 350Calibration Type （定标数）： 1点Unit （单位）： umol/L,四、我院Hcy循环酶法实验参数的设计,2018/1/17,22,五、同型半胱氨酸的临床应用,18,2018/1/17,23,1、心血管病防治,（1）HCY升高与动脉粥样硬化(AS)的关系： 临床上发现高胱氨酸尿症病人早年多因全身动脉粥样硬化和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞，这与血中Hcy升高有关。,19,2018/1/17,24,动物注射Hcy后引起高Hcy血症，23个月后发生动脉粥样硬化 。认为高Hcy血症是发生动脉粥样硬化的独立危险因素。,20,1、心血管病防治,2018/1/17,25,（3）Hcy水平与心血管疾病的危险性 通过血管内超声观察AS斑块情况 ，观察到血浆HCY 浓度 8umol/L时，斑块明显增大（0.27-1.04，p15umolL为高Hcy血症，普通人群血浆Hey水平升高者只有不到5 ，而在脑卒中患者中可达3040 。,28,2018/1/17,29,Hcy的升高是与中风有重要关联的危险因子。美国最新的数据显示中年后期男性中风发病率，处于55-64这个年龄段的男性相对于45-54年龄段的男性而言，前者患中风的几率是后者的三倍。,2、HCY与神经系统疾病,2018/1/17,30,惠汝太教授等的研究结果显示:随着Hcy浓度增高，脑中风危险度增加1.87倍。,30,2、HCY与神经系统疾病,2018/1/17,31,高HCY是造成老年痴呆症与帕金森的重要因素：1092例（76岁）追踪调查8年Hcy值，结果：Hcy超出14mol/L，患老年性痴呆的危险性增加1.8倍，患多异古怪痴呆发生率增加1.6倍。Hcy水平大于11.2mol/L的病人，三年后随访，发现他们大脑颞叶（包括海马）快速萎缩。,31,2、HCY与神经系统疾病,2018/1/17,32,3、糖尿病及并发症防治,血浆Hcy水平可作为2-型糖尿病患者患大血管疾病的独立危险因素。监测糖尿病患者Hcy水平有利于对其预后的评估。Hcy升高在糖尿病伴肾脏、视网膜及血管并发症的患者更为严重高Hcy血症也能促进糖尿病微血管并发症的发生与发展。,32,2018/1/17,33,4、CRF并发症防治,慢性肾功能衰竭（CRF）患者普遍有高Hcy血症，其发生率是正常人33倍。尿毒症时一方面肝脏蛋氨酸腺苷转移酶活性升高，导致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面肾功能下降使Hcy代谢的必需产物丝氨酸合成减少，导致Hcy代谢受抑制引起Hcy的堆积。,33,2018/1/17,34,5、肺血栓栓塞症防治,高Hcy血症（20mol/L）使得深静脉血栓的危险性明显增大，高Hcy血症可使深静脉血栓发生率增加4倍。高Hcy是我国汉族人群肺血栓栓塞症（PTE）发病的一个独立的危险因子，降低Hcy可降低国人静脉血栓栓塞症（VTE）的危险。,34,2018/1/17,35,6、预测骨折风险,高Hcy的人容易骨折，高Hcy组与低Hcy组相比，男性的骨折风险为后者的4倍，女性为1.9倍。老年人骨折中19%是由高Hcy引起的。Hcy阻碍骨胶原纤维状蛋白质形成网状结构的作用可能就是高Hcy者容易骨折的原因。,35,2018/1/17,36,7、诊断与监测肝损伤,血浆Hcy浓度在急性肝病和慢性肝病患者间差异有显著性；血浆Hcy浓度对于慢性肝损伤的敏感性为91%，特异性为89%。以病理组织切片对照敏感性为94%，特异性为89%。血浆Hcy浓度检测还可应用于对普通人群慢性肝病的筛选。,36,2018/1/17,37,8、优生优育与母婴健康,血中Hcy值高的妇女容易产生妊娠并发症 (32%)；早产 (38%)；新生儿体重减低 ( 99%)。孕妇检测Hcy对防治妊娠并发症与优生优育（预防早产、流产、新生儿体重减低、胎儿神经管畸型等）具有重要意义。,37,2018/1/17,38,9、肿瘤防治,未服抗叶酸药物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有许多患者的血清Hcy升高。Hcy升高是因肿瘤细胞的快速增殖所致。许多恶性肿瘤细胞有对蛋氨酸的依赖性，蛋氨酸的依赖或高Hcy血症可能是恶性肿瘤一种表型的表达。,38,2018/1/17,39,Hcy血清浓度的变化与血清肿瘤标志物CA125、CA15-3、CA19-9及CEA的变化是平行的。这提示血清Hcy与肿瘤标记物一样反应肿瘤细胞的活性或肿瘤细胞的快速增生状况。,9、肿瘤防治,2018/1/17,40,什么样的人需要做HCY检查？,已有CHD、脑血管病或周围AS病者；有高血压、糖尿病、肥胖、吸烟者；有CHD或AS家族史者，尤其是直系亲属中有早发病或早病死者；,2018/1/17,41,什么样的人需要做HCY检查？,有黄瘤或黄疣者； 有家族性高脂血症者；40岁以上男性及绝经期后女性。,2018/1/17,42,六、血标本采集注意事项,样品为血清或血浆，空腹 8h以上，采血后1h之內离心分离, 置干净试管中保存。样本稳定性： 室温 ：2-7天；2-8 ：14天； -20 ：几年。样品不宜反复冻融 。血红蛋白,胆红素,甘油三脂等对 Hcy 结果干扰小。,2018/1/17,43,七、Hcy参考值,空腹血浆总Hcy水平正常值为515umol/L理想值10umol/L 高于15umol/L被认为是高Hcy血症 将高Hcy分为轻、中、重度，其空腹血浆浓度分别为1530、31100及大于100umol/L,2018/1/17,44,八、