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文档简介
边做边学 大肠杆菌的接种与分离培养导学案【学习目标】1、学会微生物的分离和培养2、掌握无菌操作技能 【学习重点】1、无菌操作技能2、微生物培养基的配制方法【学习难点】微生物接种和培养的方法【课前自主导习】1、实验室常采用的灭菌方法:实验室常利用处理达到灭菌效果,包括采用和等方法。2、手提式高压灭菌锅的使用:使用步骤包括等。3、培养基的概念:为微生物而制备的,提供适合微生物、或积累的营养基质。4、培养基的类型:(1)天然培养基:含义:是指采用或以及它们的或粗消化物配制而成的培养基。优点:取材便利、配制简便。缺点:难以控制、实验结果的重复性。(2)合成培养基:含义:是指由的分析纯等高纯度和配制而成的培养基。优点:及其含量明确、实验的可重复性。缺点:配制、成本较。5、培养基的成分:各种培养基的配方不同,但一般都含有水、和等最基本的物质。6、接种微生物:(1)接种:指在条件下将微生物接入的操作过程。(2)不同接种工具的使用:穿刺接种要用;斜面划线接种或平板划线接种要用到;涂抹平板接种要用到。7、大肠杆菌的接种与分离:(1)牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤:配制;调节至;分装:培养基的高度约为试管长度的;包扎;灭菌:是常用的灭菌方法;搁置斜面:待试管冷却至左右,斜面长度不超过试管总长的。(2)斜面接种和培养大肠杆菌:斜面接种的主要目的有转移、培养、保存等;具体操作步骤:准备接种灭菌灭菌培养大肠杆菌低温保存。【课堂互动探究】1.高压灭菌锅是依赖高压灭菌吗?2.在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗?为什么?3.牛肉膏蛋白能培养病毒吗?为什么?4.通常在酒精灯火焰附近接种微生物的原因是什么?5.怎样区分消毒和灭菌?6、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然要灼烧接种环吗?为什么?7、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?8、在作第二次以及其后的划线时为什么总是从上一次划线的末端开始划线?【当堂双基达标】1下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中,错误的是( )A操作顺序为配制培养液、调节PH、分装、包扎、搁置斜面、灭菌B在配制培养基过程中要加入琼脂作为凝固剂C将培养基冷却至50左右时进行搁置斜面D可以用3的HCL或NaOH溶液调节培养液的HP2细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌锅、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?A接种环、手、培养基 B高压锅、手、接种环 C培养基、手、接种环 D接种环、手、高压锅3有关平板划线操作的叙述不正确的是( )A第一次操作前灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C在第二次区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液D划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境或感染操作者4关于灭菌和消毒的理解不正确的是( )A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌的实质是相同的C接种环用灼烧灭菌D常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂发5某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述种正确的是( )A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次 【课后知能检测】1培养基为微生物的生长繁殖提供 ( )A水 B碳源 C氮源 D水、碳源、氮源和无机盐等2将配制好的培养基进行灭菌应用 ( )A灼烧灭菌 B高压蒸汽灭菌 C干热灭菌 D煮沸灭菌3下列叙述错误的是 ( )A培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件4判断以下部位不含有微生物的是 ( )A洗干净的脸上 B洗完澡后的皮肤C刷完牙后的口腔 D灼烧之后的灭菌环5土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成 ( )A尿素酶 B脲酶 C蛋白酶 D细菌酶6设置对照的主要目的是排除实验组中哪一因素对实验结果的影响 ( )A测试因素 B非测试因素 C全部因素 D部分因素7以下操作用到接种环的是 ( )A平板划线操作 B系列稀释操作 C涂布平板操作 D倒平板操作8能排除培养基是否有杂菌污染的方法是 ( )A将未接种的培养基放在实验桌上培养 B将未接种的培养基放在窗台上培养C将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D将已接种的培养基放在恒温箱中培养9有关培养基配置原则表述正确的是 ( )A任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响D营养物质的浓度越高越好10高压湿热灭菌的操作顺序应该是 ( )加水排冷气装置灭菌物品98KPa下灭菌加盖0kPa下排气,打开灭菌锅A B C D11斜面培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的 ( )A1s B23 C14 D1212灭菌的标准是 ( )A杀死所有的病原
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