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文档简介

PCR基本原理示意图 待扩增目的DNA片段 红色区域 氢键 加热变性后氢键被破坏 模板分成两条单链 加热变性 退火 迅速降温 退火后 由于引物分子小 浓度又高 在模板之间还未复性前就迅速与模板匹配结合 引物2 引物1 引物是人工设计并合成的脱氧核苷酸短链 升温至Taq酶最适温度 新链延伸方向总是从5 3 在Taq酶最适温度下 新链合成 不断延伸 在终止延伸时 新链的长度可能长于目的片段 延伸至目的片段外侧区域 升温至Taq酶最适温度 在Taq酶最适温度下 新链合成 不断延伸 在终止延伸时 新链的长度可能长于目的片段 延伸至目的片段外侧区域 5 5 3 3 引物2 引物1 3 3 5 5 新链延伸方向总是从5 3 变性温度下链间氢键又被破坏 双链分开成单链 退火后 引物又与模板匹配结合 在Taq酶最适温度下 新链合成 不断延伸 新链的长度不会超过模板 反复经过变性 退火 延伸等步骤 经过约30 40次循环 下面这种产物将以指数级方式递增 成为主要产物 难点 在PCR循环过程中 以下双链形式的DNA只能以算术级方式扩增 成为PCR反应的副产物 难点

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