白藜芦醇对豚鼠支气管平滑肌的作用影响.doc

机能学科实验中心学生设计性实验一、基本情况项目名称白藜芦醇对豚鼠气管平滑肌作用影响的研究课题组成员姓名学 号班别联系电话吴林展 2009112147 09全513602499933温柳演200911213709全513650996594 李海鹏200911214909全515107538672 冯欣如200911212809全513570437044 林舒欣200911214009全513631444927指导老师韩志远二、实验的目的及背景目的：1.研究白藜芦醇对豚鼠离体支气管平滑肌的作用及其影响因素；2.学会分析曲线并对各药物的药效做出比较及评价；3. 观察不同浓度的白藜芦醇对各致痉剂引起豚鼠离体支气管平滑肌收缩的影响。背景：白藜芦醇，化学名(E)52一(4一羟苯基)一乙烯基一1，3一苯二酚，属于非黄酮类多酚化合物，具有广泛的药理作用，如抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎、免疫调节、抗病毒、抗衰老及雌激素样活性等。主题词：离体气管 曲线三、实验仪器、材料、试剂仪器:生物信号采集系统,张力换能器, 麦式浴槽,手术剪,眼科剪材料:豚鼠一只试剂: Krebs-Henseleit液，氯化钡；氯化钙；磷酸组胺；白藜芦醇；生理盐水四、实验内容、方法方法：1.1气管条的制备 取一成年健康豚鼠，体重250-400g，雌雄兼用，对其进行脱颈法或直接猛击头部处死，迅速切开颈部皮肤，分离气管，从甲状软骨下至气管与肺连接处剪下，将其放入盛有Krebs-Henseleit营养液的培养皿，仔细剔除气管周围结缔组织，将气管剪成2 mm2 cm螺旋条。 1.2水浴恒定在3705，气管条一端系在L型氧气钩上，放人麦式浴槽中，将另一端接张力换能器，通氧，保持每分钟4060个气泡。打开生理信息采集处理系统以及张力换能器，记录2g负荷时曲线升高高度，待其平稳30min后开始实验。 2.1白藜芦醇对离体支气管自发活动的影响 对离体支气管滴加白藜芦醇，每次给药不同的浓度3*10(-9)、3*10(-8)、3*10(-7)、3*10(-6)、3*10(-5)mol/L，体积均为30ul，观察曲线变化，记录相关信息。 2.2白藜芦醇对磷酸组胺所致离体支气管痉挛的影响 待支气管收缩稳定后进行实验，每次给药体积为30uL。以累积浓度法制作磷酸组胺的量效曲线，冲洗3次，重新平衡后，再给予不同浓度的白藜芦醇20min后，再以累积浓度法制作磷酸组胺的量效曲线，以生理盐水对照组最大反应时的平均张力之平均值作为最大效应(Emax)，计算各受试药对肠管收缩最大效应的抑制率（E/Emax，n=5），以EE 对磷酸组胺浓度负对数值作图，并对结果进行讨论、分析。 2.3白藜芦醇对CaCl2（1*10(-7)mmol/L-1*10(-1) mmol/L）所致离体支气管痉挛的影响 制作CaCl2的量效曲线，标本在Krebs-Henseleit营养液中稳定30min后，每次滴加CaCl2 30uL，以累积浓度法制作CaCl2（1*10(-7)mmol/L-1*10(-1) mmol/L）的量效曲线,然后用无Ca2+液冲洗3次，重新平衡后，再给予不同浓度的白藜芦醇（浓度同上）。记录、观察图像并分析实验结果。 2.4白藜芦醇对BaCl2所致离体支气管痉挛的影响 制作BaCl2（1*10(-7)mmol/L-1*10(-1) mmol/L）的量效曲线，方法同