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文档简介

细菌的分离培养与接种技术 潍坊职业学院生物技术2014 细菌实验室 进行细菌学实验的场所 标本的接种 培养 分离 鉴定 药敏等工作在此完成 细菌室要防止外界污染 还要避免细菌播散 配备紫外灯 消毒剂等 注意定期消毒 对无菌物品和标本应明显分开放于指定位置 同时要对用过的物品及时进行灭菌处理 保证细菌室的温度 无菌实验室 是细菌实验室内用于无菌操作的小室 要求更严格 完全封闭 应有缓冲区 用前要用紫外灯消毒30min 定期用甲醛熏蒸消毒 仅限于分装培养基及传染性强的细菌接种 要保证本室的无菌状态 保证本室的温度 无菌实验室可用超净工作台代替 培养基 常用玻璃器材的准备培养基的成分和作用培养基的种类培养基的制备 培养基的成分和作用 培养基 是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质 1 营养物质 蛋白胨 氮源 肉浸液 氮源和碳源 牛肉膏 糖醇类 血液 鸡蛋和动物血清 生长因子 无机盐类 2 水 3 凝固剂 琼脂 明胶 4 抑制剂 非生长必需 而是选择 鉴定及判断结果的需要 5 指示剂 便于观察细菌 培养基的种类 按用途分类 基础培养基 培养营养要求不高的细菌 如普通平板营养培养基 能满足营养需求较高细菌的生长 如血平板鉴别培养基 含有某些特定的底物 用于鉴别细菌 如克氏双糖培养基 KIA 选择培养基 具有选择性抑制作用 用于选择性的培养目的菌 如SS平板增菌培养基 促进目的菌的生长 适用于含菌量较少的标本 如葡萄糖肉汤 厌氧培养基 用于培养厌氧菌 培养基的种类 按物理性状分类 液体培养基 不含凝固剂 用于增菌和接种纯种细菌 半固体培养基 含0 3 0 5 琼脂 用于观察细菌的动力 固体培养基 含2 2 5 琼脂 多用于细菌的分离培养 培养基的制备 玻璃器皿的消毒灭菌制备的程序调配溶化矫正pH过滤澄清分装灭菌鉴定保存 细菌接种的基本程序 灭菌接种环 沾取标本 接种 灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌 以免污染标本 杀灭接种环沾染的细菌 以免污染环境 细菌接种法 平板划线接种法 目的 使混合的细菌呈单个分散生长 形成单个菌落 以便获得纯菌 方法 分区划线法 适用于含菌量较多的标本连续划线法 适用于含菌量较少的标本液体培养基接种法穿刺接种法 用于观察细菌动力斜面接种法倾注培养法 用于细菌计数 分区划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 连续划线法 细菌培养法 一般培养 需氧培养 培养温度 35 采用恒温培养箱 培养时间 18 24h二氧化碳培养法 烛缸法 二氧化碳培养箱厌氧培养法 厌氧培养箱 厌氧袋 厌氧罐 疱肉培养法 硫乙醇酸盐法等 细菌在固体培养基中的生长现象 菌落 定义 指单个细菌在平板培养基上生长繁殖 形成单一肉眼可见的细菌集团 菌落特征 大小 形状 边缘 颜色 表面 透明度 湿润
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